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新英格兰生物实验室分析证书
产品名称：LongAmp® Hot Start Taq 2X Master Mix 目录编号：M0533L 浓度：2 X 浓缩物 包装批号：10264389 到期日：03/2026 储存温度：-20°C 规格版本：PS-M0533S/L v2.0 成分 (1X)：60 mM Tris-SO4（pH 9.1 @ 25°C）、20 mM (NH4)2SO4、2 mM MgSO4、0.3 mM dATP、0.3 mM dCTP、0.3 mM dGTP、0.3 mM dTTP、3% 甘油、0.06% IGEPAL® CA-630、0.05% Tween® 20、125 单位/毫升 LongAmp® Hot Start Taq DNA 聚合酶
Invitro DNA扩增和DNA的测序
最初的PCR要求包括100至35000个碱基对的目标DNA，与靶DNA互补并与靶DNA区域结合，二价阳离子（MG 2+），缓冲溶液，脱氧核糖核苷酸，例如DATP，DATP，DCTP，DCTP，DGTP和DTTP，dttp和Prospective Bases。DNA聚合酶是从深海中发现的细菌中分离出的必需酶。因此，该酶通常被称为TAQ聚合酶。该酶的优点是它是热稳定的。也就是说，它可以承受高达95 O的温度上升。查看图8.2，了解执行聚合酶链反应的步骤。用于执行PCR的仪器被称为热环生（图8.3）。建议学习者在给定的链接
PPP主混合不带MGCL2 -TOP -BIO
体积 *试剂最终浓度12.5μlPPP主混合1倍PPP主混合物不含MGCL 2（75 mm Tris-HCl，pH 8.8，无MGCL 2（25 O C），20 mm，20 mm（NH 4）2 sO 4，0.01％，0.01％Tween 20，200μmDatp，200μmDctp，200μmDctp，200μmdgn，200μmdgn，theq，200μmdnumtheq，theq，200μmdnumtheq，theq，200μmdnumtheq，theq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq deq 200 m少量增长很高。 polymerase, stabilizers and additives) 2.5 μl 25 mM MgCl 2 2.5 mM MgCl 2 1 μl Forward primer 0.1 - 1 μM (~ 20 bases in length) 1 μl Reverse primer 0.1 - 1 μM (~ 20 bases in length 1 μl Template DNA 7 μl PCR H 2 O to a final volume 25 μl *Different volumes can be used, but PPP Master Mix without MGCL 2最终应稀释两次
PCR基因分型
Reagent/Material Vendor Stock Number Molecular grade H20 Sigma-Aldrich W4502 * GoTaq® G2 Colorless Master Mix Promega M7833 DNeasy® Tissue Kit Qiagen 69506 Agarose Sigma-Aldrich A9414 1kb+ DNA ladder Life Technologies 10787-018 SYBR SAFE DNA stain Life Technologies S33102 100% ETOH Gold Shield Chemicals DSP-CA-151 *GOTAQ®G2无色主混合混合物是一种预混合的现成溶液，其中含有GOTAQ®G2DNA聚合酶，DNTP，MGCL2和反应缓冲液，可在最佳浓度下以PCR有效地放大DNA模板。GOTAQ®G2DNA聚合酶表现出5´→3´外切核酸酶活性。gotaq®G2无色主混合物，2x：GoTaq®G2DNA聚合酶在2x无色GOTAQ®G2反应缓冲液（pH 8.5），400μMDATP，400μMDGTP，400μMDCTP，400μMDCTP，400μMDTTP和3MM DTTP和3MM MGCL2中提供。
LaboPass™ 订购信息
货号 产品名称 规格 价格 CMM7001 LaboPass™ 1kb Labo DNA Ladder 100 µl x5 (100 lane) ￥33,600 CMM7002 LaboPass™ 1Kb Labo plus DNA Ladder 100 µl x5 (100 lane) ￥42,000 CMM7004 LaboPass™ 100bp Labo DNA Ladder 100 µl x5 (100 lane) ￥16,600 CMM7005 LaboPass™ 100bp Labo plus DNA Ladder 100 µl x5 (100 lane) ￥29,600 NT010 LaboPass™ dATP 100 mM, 1 ml ￥10,700 NT020 LaboPass™ dCTP 100 mM, 1 ml ￥10,700 NT030 LaboPass™ dGTP 100 mM，1 ml ￥10,700 NT040 LaboPass™ dTTP 100 mM，1 ml ￥10,700 NT070 LaboPass™ dUTP 100 mM，1 ml ￥10,800 NT050 LaboPass™ dNTP 套装各 100 mM，0.25 ml ￥37,300 NT060 LaboPass™ dNTP 混合物各 2.5 mM，0.5 ml x2 ￥27,400
核酸研究
8％聚丙烯酰胺凝胶。cDNA（-0.5 tg）范围为550至1500个碱基对，通过电装饰回收。使用末端脱氧核苷酸转移酶（20）与脱氧残基一起扩展了20 ng等分试样，并用PST I裂解并用Deoxyg残基尾巴（20）将PBR322的100 ng退火100 ng。通过公开的程序（23），使用退火的混合物用于转化大肠杆菌K-12菌株294（22）。制备诱导和未诱导的32P-CDNA探针。5 Zg的12S mRNA与2个寡核酸（DT）12-18（协作研究）或每个合成引物池（FIB 1至FIB 6）的2 Ig合并，在10mm Tris-HCl（pH 8），1 mm EDTA中。将混合物煮沸3分钟，然后在冰上淬火。60 ul of 40 mM Tris-HCl (pH 8.3), 40 mM KCl, 16mM MgCl2, 60 mM o-mercaptoethanol, 1 mM dATP, dGTP, dTTP and 5 x 10 7M (Q-32P) dCTP (Amersham, 2,000 - 3,000 Ci/mmole) was added to each template-primer mix at OC.在添加100个AMV逆转录酶后，将反应在42％C下孵育30分钟，并通过超过10 ml Sephadex G-50列的通道纯化。产品用
karonudib在B细胞淋巴瘤的临床前模型中具有有效的抗肿瘤作用
化学免疫疗法在B细胞淋巴瘤患者中的生存率提高了，但是难治性/复发性疾病仍然是一个重大挑战，敦促开发新的治疗剂。karonudib（Th1579）的开发是为了抑制MTH1，这是一种可预防DNA中氧化DNTP掺入的酶。mTH1在肿瘤活检中高度上调，来自弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）和伯基特淋巴瘤的患者，因此确认了针对MTH1的基本原理。在这里，我们在体外和临床前B细胞淋巴瘤模型中测试了Karonudib的功效。使用一系列B细胞淋巴瘤细胞系，Karonudib强烈降低了激活的正常B细胞可耐受的浓度的生存力。在B细胞淋巴瘤细胞中，Karonudib增加了8氧化型DGTP的掺入DNA中，并因纺锤体组装失败而引起的前期停滞和凋亡诱导。MTH1基因敲除细胞系对Karonudib诱导的细胞凋亡的敏感性不太敏感，但显示出与野生型细胞相似的细胞周期停滞表型，表明该药物的双重抑制作用。karonudib在两种不同的异种淋巴瘤模型中作为单一药物高度有效，包括ABC DLBCL患者衍生的异种移植物，导致长期存活和完全控制的肿瘤生长。一起，我们的临床前发现为B细胞淋巴瘤中Karonudib的进一步临床测试提供了基本原理。
MutT 同源物 1 (MTH1) 从 dNTP 池中去除 N6-甲基-dATP
MutT 同源物 1 (MTH1) 可从核苷酸池中去除氧化核苷酸，从而防止其掺入基因组，并降低基因毒性。我们之前曾报道 MTH1 是 O6-甲基-dGTP 水解的有效催化剂，这表明 MTH1 还可以清除核苷酸池中的其他甲基化核苷酸。我们在此显示 MTH1 可有效催化 N6-甲基-dATP 水解为 N6-甲基-dAMP，并进一步报道 dATP 的 N6-甲基化可显著增加 MTH1 活性。我们还观察到 MTH1 与 N6-甲基-ATP 的活性，尽管水平较低。我们发现 N6-甲基-dATP 会在体内整合到 DNA 中，与未注射 N6-甲基-dATP 的胚胎相比，微注射 N6-甲基-dATP 的 MTH1 敲除斑马鱼卵子发育而成的胚胎中 N6-甲基-dA DNA 水平升高就是明证。远亲脊椎动物的 MTH1 同源物中存在 N6-甲基-dATP 活性，这表明其具有进化保守性，也表明这种活性很重要。值得注意的是，在相关的 NUDIX 水解酶中，N6-甲基-dATP 活性是 MTH1 所独有的。此外，我们展示了 N6-甲基-dAMP 结合的人类 MTH1 的结构，揭示了 N6-甲基被容纳在疏水活性位点亚口袋内，这解释了为什么 N6-甲基-dATP 是良好的 MTH1 底物。据报道，DNA 和 RNA 的 N6 甲基化具有表观遗传作用并影响 mRNA 代谢。我们认为 MTH1 与腺苷脱氨酶样蛋白异构体 1 (ADAL1) 协同作用
由于双重SAMDH1突变而引起的三名患有AICARDI-GOUTIères综合征的三名患者的诱导多能干细胞系
aicardi-gouti` eRes综合征（AGS）是一种系统性的炎症性疾病，并且在婴儿早期开始时（Aicardi and Goutieres，1984）。患者通常患有白细胞症状，其特征是易怒，肌张力障碍，癫痫发作和发烧，导致严重的发育延迟和小头畸形。脑成像显示基底神经节钙化和进行性脑萎缩。ags模仿子宫内获得的病毒感染。一些患者会出现自身免疫性疾病全身性红斑狼疮患者的体征，包括肝炎，血小板细胞减少症，抗核抗体以及皮肤恐龙病变（Ramantani等，2010）。淋巴细胞增多症和抗病毒细胞因子干扰素（IFN）-α在脑脊液中通常在疾病病程初期观察到。全身激活I型IFN，如外周血细胞中IFN刺激的基因的上调所示（也称为IFN信号）通常可以连续检测到。ags是一种由至少九种不同基因（AGS1-AGS9）突变引起的遗传异质性疾病，该疾病在核酸代谢和免疫识别的过程中起作用（Crow and Stetson，2022）。在这项研究中，使用无整合的仙台病毒方法来重新编程源自皮肤活检或外周血单核细胞（PBMC）的成纤维细胞（来自SAMHD1中的常染色体隐性突变（AGS5）的三名AGS患者（AGS5）（AGS5）（Rice等，2009）。SAMHD1编码SAM结构域和含HD结构域的蛋白1，一种依赖于DGTP的三磷酶氢化酶，将脱氧核苷Tri磷酸盐（DNTPS）转换为组成型脱氧核苷和甲磷酸甲磷酸盐。SAMHD1缺乏会导致内部lular DNTP池失衡，导致基因组不稳定性（Kretschmer等，
尼日尔第二次气候变化国家信息通报
缩略语列表 ACMAD：非洲气象应用发展中心 AMESD：非洲环境监测促进可持续发展 AMMA：非洲季风多学科分析 ANPIP：尼日尔私人灌溉促进协会 ASAPI：小型灌溉食品安全支持计划 BDR：道路数据库 BOD：生化需氧量 CC：气候变化 CDM：清洁发展机制 CERMES：医学和社会研究中心 CES/DRS：水土保持/土壤防御与恢复 CFP：形成与改进中心 CFTTR：道路运输技术培训中心 CMC：现代烹饪燃料 CNEDD：国家环境可持续发展委员会 CNES：国家太阳能中心 COD：化学需氧量 COMINAK：阿库塔矿业公司 CoP：缔约方大会 CPA：人造波特兰水泥 CR/AGRHYMET：区域培训和应用中心农业气象学和业务水文学 CRESA：农业专业教学研究中心 CSI：综合健康中心 CSO：民间社会组织 CT3：大陆3号航站楼 CTCVC：气候变化和多变性技术委员会 DA：分析司 DAF：财务和行政指导 DCDS：协调和统计发展指导 DCPB：生物制品控制部 DCR：经济作物指导 DCV：粮食作物指导 DDER：诊断、流行病学和回收利用指导