摘要:气候变化的新威胁要求快速开发对非生物和生物因素具有更高耐受性的优良品种。尽管传统农业实践取得了成功,但仍需要精确操纵作物基因组的新技术。几十年来,双单倍体 (DH) 方法已在主要作物中使用,以在短时间内在优良背景中固定所需的等位基因。DH 植物还广泛用于数量性状基因座 (QTL) 的定位、标记辅助选择 (MAS)、基因组选择 (GS) 和杂交生产。最近发现的负责单倍体诱导 (HI) 的基因允许通过基因编辑 (GE) 在不同作物的非诱导品种中设计这种性状。直接编辑配子或单倍体胚胎可在染色体加倍后产生无效纯合植物,从而提高 GE 效率。对单倍体植物中负责自发染色体加倍的潜在遗传机制的深入了解可能允许将这种性状转移到不同的优良品种中。总体而言,进一步提高 DH 技术效率并结合优化的 GE 可以加速主要作物的育种工作。
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412B JO Sea Coordinator CDR Veronica Camiolo veronica.a.camiolo.mil@us.navy.mil 412F Divo Detailer T-B LT Jessica Yang jessicalynn.b.yang.mil@us.navy.mil 412H Divo Detailer C-G LT Griffin Buskill peter.g.buskill.mil@us.navy.mil 412I Divo Detailer N-S/POCR LT Tatihana Moreno tatihana.v.moreno.mil@us.navy.mil 412K Divo Detailer H-M LT Justice Swett justice.swett.mil@us.navy.mil 412M 1st Tour DH Detailer LCDR Matt Hein matthew.b.hein.mil@us.navy.mil 412N SWO(N) Detailer LCDR Derek Mockel wade.d.mockel.mil@us.navy.mil 412O New Accessions Detailer LT Benjamine Miller benjamine.a.miller@navy.mil 412S 第二轮 DH 细节设计师 LCDR Liz Moten elizabeth.c.moten.mil@us.navy.mil 412T 人力资源专家 Ms.罗比·理查德 roberta.j.richard.civ@us.navy.mil
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412B JO Sea Coordinator CDR Veronica Camiolo veronica.a.camiolo.mil@us.navy.mil 412F Divo Detailer TB LT Jessica Yang jessicalynn.b.yang.mil@us.navy.mil 412H Divo Detailer CG LT Griffin Buskill peter.g.buskill.mil@us.navy.mil 412I Divo Detailer NS/POCR LT Tatihana Moreno tatihana.v.moreno.mil@us.navy.mil 412K Divo Detailer HM LT Justice Swett justice.swett.mil@us.navy.mil 412M 1st Tour DH Detailer LCDR Matt Hein matthew.b.hein.mil@us.navy.mil 412N SWO(N) Detailer LCDR Derek Mockel wade.d.mockel.mil@us.navy.mil 412O New Accessions Detailer LT Benjamine Miller benjamine.a.miller@navy.mil 412S 2nd Tour DH Detailer LCDR Liz Moten elizabeth.c.moten.mil@us.navy.mil 412T 人力资源专家女士罗比·理查德 roberta.j.richard.civ@us.navy.mil
抽象的人群物种,尤其是trichocarpa,长期以来一直是基因组研究的模型树,这是由于完全测序的基因组。然而,高杂合性和重复区域的存在,包括丝粒和核糖体RNA基因簇,剩下了59个未解决的间隙,占三分法P. trichocarpa基因组的3.32%。在这项研究中,改进了愈伤组织诱导方法,以从P. ussuriensis花药中得出双倍的单倍体(DH)愈伤组织。利用长阅读测序,我们成功地组装了一个几乎没有间隙的,端粒到telomere(T2T)P。ussuriensis基因组,跨越了412.13 MB。该基因组组件仅包含7个间隙,其重叠n50长度为19.50 MB。注释显示该基因组中有34,953个蛋白质编码基因,比trichocarpa多465个。值得注意的是,中心区域的特征是高阶重复序列,我们在所有DH基因组染色体中鉴定了和注释的中心粒区域,这是杨树的第一个。衍生的DH基因组表现出与毛thocarpa的高共线性,并显着填补了后者基因组中存在的空白。此T2T P. ussuriensis参考基因组不仅会增强我们对基因组结构的理解,并在杨树属内的功能增强了我们的功能,而且还为杨树基因组和进化研究提供了宝贵的资源。
材料和步骤 微量离心管 20g/l CTAB 研钵和研杵 1.4M NaCl 离心机 0.1M Tris-HCl pH 计 20mM Na2EDTA 称重天平 dH2O 移液器吸头 硼酸 刮铲 Tris 碱 称量皿/纸 EDTA 移液器 DNA 大小标准(Ladder DNA) 烧杯-烧瓶 样品(生菜叶) 6x 凝胶上样缓冲液 琼脂糖 溴化乙锭(0.5 ug /ml) 1X TBE 缓冲液 A. 制备 0.5 M EDTA 原液(500 ml) 称量 93.05 g EDTA 并将其溶解在 200 ml dH 2 O 中,同时用磁力搅拌。用 NaOH 将 pH 值调节至 8.4。用 dH 2 O 将体积调节至 500 ml。