摘要:过去几十年来,基因工程的进步使得开发出生产转基因动物的方法成为可能。转基因技术的发展为研究开辟了新的方向,也为其实际应用创造了可能性。生产转基因动物物种不仅旨在加速传统的育种计划,改善动物健康和食用动物产品质量,还可用于生物医学。动物研究旨在开发用于基因功能和调控研究以及某些人类疾病的遗传决定因素的模型。本综述中描述的另一个研究方向侧重于使用转基因动物作为高质量生物制药(如重组蛋白)的来源。讨论的另一个方面是使用转基因动物作为细胞、组织和器官的来源,以移植到人类受体中,即异种移植。许多研究表明,猪(Sus scrofa domestica)是最适合作为人类疾病研究模型和异种移植的最佳器官供体的物种。与其他牲畜相比,转基因猪的怀孕期短、世代间隔短和产仔数高使得转基因猪的生产耗时更少。本综述介绍了用于生物医学研究的转基因猪以及猪动物模型使用的未来挑战和前景。
引言 转基因小鼠被广泛用于研究基因功能和建立人类疾病模型。传统的基因打靶方法 1 ,是通过在小鼠 ES 细胞中同源重组 (HR) 引入突变来生成的突变小鼠。注射入野生型 (WT) 小鼠囊胚的靶向 ES 细胞可形成嵌合小鼠的生殖系,当嵌合小鼠通过生殖系传递时,就会产生含有靶基因的后代 1 。通过 ES 细胞的 HR 生成突变小鼠成本高且耗时,因为需要选择基因打靶的 ES 细胞克隆并注射入囊胚来生成嵌合小鼠,然后必须对其进行繁殖以产生单基因突变后代,这个过程通常需要 9 到 12 个月。构建携带多个突变的小鼠将增加更多的时间和精力。此外,HR 基因靶向需要使用 ES 细胞技术,而大多数哺乳动物物种无法使用这种方法。
包含的用途必须在已根据第二段批准的实验室和设施中进行,并且根据良好的微生物实践。用户必须采取必要的安全措施来防止健康和环境损害,包括限制因转基因生物的意外释放而造成的损害的措施。必须保留所有包含转基因生物的所有使用的记录。
转基因依赖于使用大型复杂的表达载体,在病毒或组织特异性哺乳动物启动子的控制下,通过显微注射将载体递送到原核阶段受精卵中,从而指导互补 DNA (cDNA) 的表达(图 1)。虽然这种方法提供了一种粗略但有效的方法来设计表达报告基因、基因突变形式和条件调控基因的动物模型,但它不能用于精确修改内源基因。此外,转基因在小鼠基因组内的整合是随机发生的,整合位点的位置以及整合的次数可能会影响转基因的表达。此外,如果转基因整合破坏了基因或转录调控元件,整合位点本身可能会诱导其自身的表型。由于转基因整合位点和转基因整合次数可能因小鼠而异,因此需要扩展多个创始者并检查转基因表达水平和由此产生的表型 [1]。
Error 500 (Server Error)!!1500.That’s an error.There was an error. Please try again later.That’s all we know.
摘要:苯乙烯是一种重要的工业化学化学物质。尽管有几项研究报告了微生物苯乙烯的产生,但可以增加批量培养物中产生的苯乙烯量。在这项研究中,使用基因设计的大肠杆菌产生了苯乙烯。首先,我们评估了拟南芥(Atpal)(Atpal)和Brachypodium distachyon(BDPAL)的五种类型的苯丙氨酸氨裂解酶(PAL),以产生反式甲酸(CIN),一种苯乙烯前体。ATPAL2-表达大肠杆菌的CIN大约700 mg/L,我们发现BDPAL可以将CIN转换为苯乙烯。为评估苯乙烯的产生,我们构建了一个大肠杆菌菌株,该菌株从酿酒酵母中表达ATPAL2和阿魏酸脱羧酶。在含油醇的双相培养后,葡萄糖的苯乙烯产生和产量分别为3.1 g/L和26.7%(mol/mol),据我们所知,这是分批种植中获得的最高价值。因此,该菌株可以应用于苯乙烯的大型工业生产。
雄性蚊子具有生育能力,因此可以交配并产生可存活的后代。这种蚊子经过基因改造后主要产生雄性后代(实验室中高达 95%)。雄性蚊子不会叮咬,因此不会传播疾病。由于这种蚊子不携带基因驱动技术(50% 的后代通过正常遗传携带转基因),在获得批准的野外释放中,这种基因改造只会传递有限的几代,然后就会从种群中消失,大概在两个雨季内。雄性蚊子具有父系遗传性,这意味着携带基因改造的雄性会生出大多数雄性后代,而与未携带基因改造的雄性交配的雌性会拥有 50% 雌性和 50% 雄性的正常性别比例。
抽象背景T细胞在抗肿瘤反应中起着核心作用。然而,它们通常在肿瘤微环境中面临许多障碍,包括缺乏可用的必需代谢物,例如葡萄糖和氨基酸。此外,癌细胞可以通过上调代谢物转运蛋白并维持高代谢率来垄断这些资源,从而繁殖和增殖,从而胜过T细胞。方法中,我们试图通过增强其与肿瘤细胞竞争的糖酵解能力来提高肿瘤附近的T细胞抗肿瘤功能。为了实现这一目标,我们设计了人类T细胞,以表达一种关键的糖酵解酶,磷酸果糖激酶与葡萄糖转运蛋白3(一种葡萄糖转运蛋白)结合使用。我们将它们与肿瘤特异性的嵌合抗原或T细胞受体共表达。与对照细胞相比,的结果工程细胞表明,T细胞激活标记物的细胞因子分泌增加和T细胞激活标记的上调。 此外,它们显示出上糖溶解的能力,在人类肿瘤的异种移植模型中转化为改善的体内治疗潜力。 总结,这些发现支持实施T细胞代谢工程,以增强细胞免疫疗法对癌症的疗效。的结果工程细胞表明,T细胞激活标记物的细胞因子分泌增加和T细胞激活标记的上调。此外,它们显示出上糖溶解的能力,在人类肿瘤的异种移植模型中转化为改善的体内治疗潜力。总结,这些发现支持实施T细胞代谢工程,以增强细胞免疫疗法对癌症的疗效。
Yassir Lekbach 1+,Toshiyuki Ueki 1+,小米刘2,Trevor Woodard 1,Jun Yao 2,3,4和Derek R. 4
。cc-by-nd 4.0国际许可证(未经同行评审证明)获得的是作者/资助者,他已授予Biorxiv的许可证,以永久显示预印本。这是该版本的版权持有人,该版本发布于2024年1月5日。 https://doi.org/10.1101/2024.01.05.574427 doi:Biorxiv Preprint