使用该酶的浓度。应在将使用的DMSO的最终浓度下进行酶的初始滴定(请参见上面的注1)。可以使用5-10%(v/v)DMSO(最终浓度),但这将导致活动巨大损失。在存在DMSO的情况下,需要添加更多酶,以允许其抑制作用。例如,如果酶在5%DMSO的存在下仅具有50%的活性,则是两倍(即2U)将需要添加以获得完整的超螺旋。在这种情况下,可能需要添加更多的抑制剂才能获得50%的抑制作用。4)稀释缓冲液含有高浓度的甘油,因此添加了总稀释缓冲液
产品名称:MluI-HF® 产品编号:R3198S 浓度:20,000 U/ml 单位定义:一个单位定义为在 37°C 下 1 小时内消化 rCutSmart 缓冲液中的 1 µg Lambda DNA 所需的酶量,总反应体积为 50 µl。 包装批号:10274793 有效期:07/2026 储存温度:-20°C 储存条件:10 mM Tris-HCl、200 mM NaCl、1 mM DTT、0.1 mM EDTA、200 µg/ml rAlbumin、50% 甘油,(pH 7.4 @ 25°C) 规格版本:PS-R3198S/L v2.0
产品名称:FspI 产品编号:R0135L 浓度:10,000 U/ml 单位定义:一个单位定义为在 37°C 下 1 小时内消化 rCutSmart 缓冲液中的 1 µg Lambda DNA 所需的酶量,总反应体积为 50 µl。 包装批号:10273387 有效期:12/2026 储存温度:-20°C 储存条件:10mM Tris-HCl、300mM NaCl、0.1mM EDTA、1mM DTT、0.15% Triton X-100、300 ug/ml rAlbumin、50% 甘油(pH 7.5 @ 25°C) 规格版本:PS-R0135S/L v2.0
T ECHNIQUES I N M OLECULAR B IOLOGY – R ESTRICTION D IGEST AND A GAROSE G EL E LECTROPHORESIS This lab will introduce you to DNA modification by restriction enzymes using the purified plasmids you prepared from your transformation.我们还将使用水平凝胶电泳对纯化的质粒和消化进行分析。您将对限制酶进行切割之前和之后对纯化的质粒进行凝胶分析。您将执行质粒的模拟(控制)摘要,一种具有两种不同限制酶和双重摘要的单个摘要。从中,您应该能够确定Qiagen微型制备质粒DNA的纯度,以及在PQE60载体中的WGMDH插入物。一定要阅读有关限制摘要(教科书读数)和琼脂糖凝胶(教科书和讲义)的信息,以了解每个概念的理论,并了解执行成功实验所需的细节。必需的视频 - 新英格兰Biolabs准备的网页上的限制酶链接。观看所需的最小视频是(具有限制性酶的消化,限制酶消化的标准协议和NEB限制酶Double Digigest协议视频)。在进行实验之前,您还应该查看其他几个。https://www.neb.com/applications/cloning-‐and-‐synthetic-‐ biology/dna-‐preparation/restriction-‐enzyme-‐digestion Practical notes on Restriction Endonucleases (RE) and Their Use Enzymatic Unit definition: 1 Unit = amount of enzyme necessary to digest 1 µg DNA in 1 hr (37°C, with适当的缓冲区)。glycerol Re Digests。确保您使用的是正确的缓冲液,酶与底物的正确比率(DNA和正确消化的条件)。Rextion缓冲每个限制酶具有一个缓冲液,其中最高活性(通常为10倍浓缩物)。某些酶具有共同的缓冲液,而其他酶则需要与独特的缓冲液一起使用以进行最佳活动。几家公司(以新英格兰的Biolabs为例)具有与多种酶合作的共同缓冲液。您的网站上有一个链接 - 探索几家公司以了解缓冲液和酶。存储条件RE通过反复暴露于较高的温度来对活动丧失敏感;使用库存以长期存储保持在-20°C,在使用时在〜0°C(在冰上)处于〜0°C(在冰上)。进行消化时,温育几个小时后,某些酶的活性就会损失。由于RE昂贵,因此必须谨慎处理库存。酶应在-20°C时不断存储在非冻结冰箱中。(无霜的冰柜定期在冰点上加热以限制冰的积累。)也最好将酶放在冰箱中的绝缘容器中,该酶在打开冰柜时会限制温度变化(如果存储在霜冻的冰柜中,这一点尤其重要)。为防止在-20°C下冻结,RE库存在含有50%甘油的溶液中。由于在存在> 5%甘油的情况下可以抑制或改变RE活性,因此应库存不超过10%的最终RE消化反应混合物。[A 1:10 RE的稀释度将50%的甘油含量为5%。]在不正确的缓冲液条件下或在存在> 5%甘油的情况下,RE的恒星(*)活性可以显示出改变的DNA裂解特异性,称为“恒星活性”。在这种情况下,酶可以识别出其正常6 bp识别位点的4个基对子集,因此将在比预期的更多位点上切割DNA。例如,熟悉的酶EcoRI因其在低离子强度溶液中的恒星活性而臭名昭著。
产品名称:MmeI 产品编号:R0637L 浓度:2,000 U/ml 单位定义:一个单位定义为在 37°C 下 1 小时内消化 rCutSmart 缓冲液中的 1 µg PhiX174 RF I DNA 所需的酶量,总反应体积为 50 µl。 包装批号:10263891 有效期:2026 年 11 月 储存温度:-20°C 储存条件:10 mM Tris-HCl、300 mM NaCl、1 mM DTT、0.1 mM EDTA、0.32 mM S-腺苷甲硫氨酸 (SAM)、50% 甘油、500 µg/ml rAlbumin(pH 7.4 @ 25°C) 规格版本:PS-R0637S/L/V v4.0
在多剂量小瓶中提供的每种0.25 ml剂量的现代Covid-19疫苗,带有深蓝色帽子和洋红色标签边框,包含25个编码前融合型稳定稳定的Spike糖蛋白SARS-COV-2 WUHAN HANAN HANAN HUHAN HUHAN HU-1的核苷修饰的Messenger RNA(mRNA)。每个0.25 mL剂量还包括以下成分:总脂质含量为0.5 mg(SM-102,聚乙烯乙二醇[PEG] 2000 dimyristoyl甘油[DMG],胆固醇,胆固醇,和1,2酸酸盐 - 2-酸酸酯-SN-甘油-3-甘油-3-磷磷脂[Dsppc],0.12妈妈,0.12 MOTHETHMETH [DROM 0.12 MOTH),TROLS 0.13 MM,TRTORN MONTRON TRRON TRRON TRRON TRTORM MONTROM盐酸葡萄胺,0.011毫克乙酸,0.049 mg乙酸钠三水合物和21.8 mg蔗糖。
产品名称:XhoI 产品编号:R0146S 浓度:20,000 U/ml 单位定义:一个单位定义为在 37°C 下 1 小时内消化 rCutSmart 缓冲液中的 1 µg Lambda DNA(HindIII 消化)片段所需的酶量,总反应体积为 50 µl。 包装批号:10269860 有效期:05/2026 储存温度:-20°C 储存条件:10 mM Tris-HCl、50 mM KCl、1 mM DTT、0.1 mM EDTA、50% 甘油、200 µg/ml rAlbumin(pH 7.4 @ 25°C) 规格版本:PS-R0146S/L/E v3.0
产品名称:NheI-HF® 产品编号:R3131S 浓度:20,000 U/ml 单位定义:一个单位定义为在 37ºC 下 1 小时内消化 rCutSmart 缓冲液中的 1 µg Lambda DNA(HindIII 消化物)所需的酶量,总反应体积为 50 µl。 包装批号:10275520 有效期:01/2027 储存温度:-20°C 储存条件:250 mM NaCl、10 mM Tris-HCl、1 mM DTT、0.1 mM EDTA、50% 甘油、0.15% Triton X-100、200 µg/ml rAlbumin(pH 7.4 @ 25ºC) 规格版本:PS-R3131S/L v2.0
亚洲柑橘溃疡的病因,革兰氏阴性细菌xanthomonas citri subsp。citri(XAC)比Xanthomonas fuscans亚种产生更严重的症状并发作更多的cit宿主。aurantifolii Xaub和Xauc,肿瘤的病因,疾病的温和形式。在这里,我们报告了XAC和XAUB的富含周质的蛋白质组学分析XAM-M中的XAC和XAUB(一种致病性 - 诱导培养基),用于鉴定差异蛋白。蛋白质通过二维电泳与液相色谱 - 质量光谱法相结合。Among the 12 proteins identified from the 4 unique spots from XAC in XAM-M (p < 0.05) were phosphoglucomutase (PGM), enolase, xylose isomerase (XI), transglycosylase, NAD(P)H- dependent glycerol 3-phosphate dehydrogenase, succinyl-CoA synthetase β subunit, 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶,以及保守的假设蛋白XAC0901和XAC0223;当两种细菌在NB培养基中生长,这是一种致病性的非诱导培养基时,它们中的大多数都没有被视为XAC的差异。XAUB与XAM-M中的XAC显示出截然不同的特征,其中呈现了29个独特的斑点,其中包含与各种代谢途径相关的蛋白质。通过蛋白质印迹分析在两种细菌的富含周质含量的馏分中,PGM和XI在XAC中的占主导地位得到了验证。
产品名称:耐热 RNase H 产品编号:M0523S 浓度:5,000 U/ml 单位定义:一个单位定义为在 50°C 下,20 分钟内从 40 皮摩尔荧光标记的 25 碱基对 RNA-DNA 杂交体产生 1 nmol 核糖核苷酸所需的酶量,总反应体积为 50 µl。 包装批号:10275866 到期日:01/2027 存储温度:-20°C 存储条件:50 mM Tris-HCl、100 mM NaCl、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1% Triton®X-100、50% 甘油(pH 7.5 @ 25°C) 规格版本:PS-M0523S v1.0
