柑橘溃疡病影响柑橘生产。该病由柑橘黄单胞菌(Xcc)引起。先前的研究证实,在 Xcc 感染期间,转录激活因子样效应物 (TALE) PthA4 会从病原体转移到宿主植物细胞中。PthA4 与溃疡病易感基因 LOB1(EBE PthA4 -LOBP)启动子区中的效应物结合元件 (EBE) 结合,激活其表达,随后引起溃疡症状。之前,采用 Cas12a/CBE 共编辑方法破坏高度纯合的柚子的 EBE PthA4 -LOBP。然而,大多数商业柑橘品种都是杂合杂交种,更难产生纯合/双等位基因突变体。在这里,我们采用 Cas12a/CBE 共编辑方法来编辑 Hamlin(Citrus sinensis)的 EBE PthA4 -LOBP,这是一种在世界范围内种植的商业杂合柑橘品种。构建了二元载体 GFP- p1380N-ttLbCas12a:LOBP1-mPBE:ALS2:ALS1,并证明其可通过 Xcc 促进的农杆菌素过滤在 Hamlin 叶片中发挥作用。该构建体允许通过 GFP 选择无转基因再生体,编辑 ALS 以生成抗氯磺隆再生体作为基因组编辑的选择标记,这是通过 nCas9-mPBE:ALS2:ALS1 瞬时表达 T-DNA 的结果,并通过 ttLbCas12a 编辑感兴趣的基因(即本研究中的 EBE PthA4 -LOBP),从而产生无转基因柑橘。共产生了 77 株幼苗。其中 8 株幼苗为转基因植株(#Ham GFP 1 - #Ham GFP 8),4 株幼苗为非转基因植株(#Ham NoGFP 1 - #Ham NoGFP 4),其余为野生型。在 4 株非转基因幼苗中,三个品系(#Ham NoGFP 1、#Ham NoGFP 2 和 #Ham NoGFP 3)含有 EBE pthA4 的双等位基因突变,一个品系(#Ham NoGFP 4)含有 EBE pthA4 的纯合突变。我们在 C. sinensis cv. Hamlin 中实现了 EBE PthA4 – LOBP 的 5.2% 非转基因纯合/双等位基因突变效率,而之前研究中柚子的突变效率为 1.9%。重要的是,存活下来的 4 株无转基因植株和 3 株转基因植株均能抵抗柑橘
14616;•Jason Caliri,dba Tooty's,60 Union Hill Drive,Spencerport,NY 14559;•William Walsh,dba Chianti's,39 Elsworth Drive,Rochester,NY 14615•Tim Post,dba HELP Services,29 Rose Circle,Hamlin,NY 14464。•Stephen Moore,dba Moore Home Improvements,9192 Warsaw Road,LeRoy,NY 14482•Phil McMurdy,dba Evo- lution Bowling products,185 Fisherman's Cove,Rochester,NY 14626;•Ken Murray,dba Murray's Auto Center,2438 South Union Street,Spencerport,NY 14559; •Jim Condoluci,原商铺老板为 Oak Orchard Lanes,3291 Oak Orchard Road,Albion,NY 14411;•Mike Barco,商铺老板为 Natural Hardwood Floors,原商铺地址为 14 Silver Fox Circle,Rochester,14612;•Bernie Dates,25 Locust Drive,Hamlin;•John Dooley & John's Barber Shop,原商铺地址为 11 Main St.,Hilton;•Colleen Far- rard,商铺老板为 Colleen's Clip- pings,原商铺地址为 Close Hollow Drive,Hamlin;•Frank Frassetto,商铺老板为 Ma's Farm Market,45 Kaymar Drive,Roch- ester,NY 14616;•Ron Garner,535 Washington St.,Spencerport; •John Gerzease,经营 Hess Mart,995 Transit Way,布罗克波特;•John Gulisano 和 Sharon Miele,经营 Core Deli,444 North Ave.,希尔顿;•Donald Janish,经营 Travel-N-Style,117 Seymour Rd.,罗切斯特,14609;•Gary Lee,经营 Gary Lee Asphalt,14 Sigel St.,罗切斯特,14605;•James Moon,经营 Sunset Lanes,40 South Avenue,希尔顿;•Trish Perry,20 East Avenue,希尔顿;•Lori Pfenninger,经营 D & L Cleaning Service,228 Whittier Road,罗切斯特,14624 [TFN]
14616; •Jason Caliri,经营 Tooty’s,60 Union Hill Drive,Spencer-port,NY 14559; •William Walsh,经营 Chianti’s,39 Elsworth Drive,Rochester,NY 14615 •Tim Post,经营 H.E.L.P.Services,29 Rose Circle,Hamlin,NY 14464。•Stephen Moore,经营 Moore Home Improvements,9192 Warsaw Road,LeRoy,NY 14482 •Phil McMurdy,经营 Evo- lution Bowling products,185 Fisherman’s Cove,Rochester,NY 14626; •Ken Murray,商业名称为 Murray’s Auto Center,2438 South Union Street,Spencerport,NY 14559; •Jim Condoluci,原商业名称为 Oak Orchard Lanes,3291 Oak Orchard Road,Albion,NY 14411; •Mike Barco,商业名称为 Natural Hardwood Floors,原地址为 14 Silver Fox Circle,Rochester,14612; •Bernie Dates,25 Locust Drive,Hamlin; •John Dooley & John’s Barber Shop,原地址为 11 Main St.,Hilton; •Colleen Far- rard,商业名称为 Colleen’s Clip- pings,原地址为 Close Hollow Drive,Hamlin; •Frank Frassetto,商业名称为 Ma’s Farm Market,45 Kaymar Drive,Rochester,NY 14616; •Ron Garner,535 Washington St.,Spencerport;•John Gerzease,dba Hess Mart,995 Transit Way,Brockport;•John Gulisano 和 Sharon Miele,dba Core Deli,444 North Ave.,希尔顿;•Donald Janish,dba Travel-N-Style,117 Seymour Rd.,罗切斯特,14609;•Gary Lee,dba Gary Lee Asphalt,14 Sigel St.,罗切斯特,14605;•James Moon,dba Sunset Lanes,40 South Avenue,希尔顿;•Trish Perry,20 East Avenue,希尔顿;•Lori Pfenninger,dba D & L Cleaning Service,228 Whittier Road,罗切斯特,14624 [TFN]
招生小组会议室 301* 42-60 24-36 36-48 36-48 60-75 招生视频会议室 202 不适用 16-20 不适用 教堂主教堂 200 不适用 教堂友谊教堂 25 不适用 教堂地下室教堂 25 不适用 Hallden Hall-N Dangremond 家庭公共空间 104* 42-60 16-20 36-48 不适用 42-65 Hamlin Hall 学术俱乐部 30-40 16-20 不适用 30-40 Hamlin Hall 餐厅 75-100 24-36 不适用 64-90 75-100 Mather Hall 校友休息室 不适用16-24 不适用 18-24 不适用 Mather Hall Rittenberg Lounge 60-80 24-30 48-64 不适用 60-80 Mather Hall Washington Room* 335-450 24-36 225-300 不适用 335-450 Mather Hall Wean Terrace ABC 150-200 28-36 102-136 不适用 150-200 Mather Hall Wean Terrace Room A 不适用 15-20 8-12 不适用 Mather Hall Wean Terrace Room B 60-80 28-36 48-64 不适用 60-80 Mather Hall Wean Terrace Room C* 30-40 16-20 24-32 不适用 30-40 Raether Center Joslin家庭 1823 房间* 60-80 24-36 42-56 42-56 60-80 Smith House Reese 房间* 42-60 24-32 42-56 不适用 42-60
作为 GVSU 的信息安全分析师,Morgan Hamlin 在保护大学网络方面发挥着关键作用。她的职责包括监控安全威胁、进行漏洞评估、审查协议以及确保遵守行业标准。回顾她的工作,Morgan 说:“最有意义的部分是知道我正在积极预防网络攻击。每阻止一个 IP 地址或拦截一个网络钓鱼电子邮件,就意味着少一个人处于危险之中。”
Steffiny 和 Rob Chisholm Cooley LLP Jason 和 Sarah DiLullo Martha Ehmann Conte EY Todd 和 Deborah Frederick George W. Bauer 家庭基金会 Judith 和 Timothy Hachman #HalfMyDAF Te Hamlin 学校 JMA Ventures, LLC Mark Karvosky 和 Nicole Elliott-Karvosky Burke's Heather 和 Clint Kollar Bora Lam Sandra Lee Jess Lifton Maria 和 Peter Lukens 国家教育机会伙伴关系 Michael 和 Naomi Neruda Yume Nguyen 和 Umang Mehta Brendan 和 Leslie O'Neil Joshua 和 Jennifer Peck Peter E. Sills 家庭基金会 Leslie 和 Rick Polhemus Annie Robinson Woods 和 F. Montgomery Woods
如果您最近被解雇或工作时间或工资减少,您可能有资格为您所在学区的孩子享受免费或减价午餐。请致电您的学区了解更多信息。[TFN] __________________ 地区狮子会为当地居民提供免费医疗贷款服务。提供病床、轮椅、拐杖、手杖和病房设备。在 Churchville 请拨打 585- 594-2103 或 585-293- 3345;在 Hilton 请白天拨打 585- 392-4144;在 Spencerport 请拨打 585-352-4742;在 Chili 请拨打 585-594-9606; 585- 594-8512 在 Hamlin 拨打 585-733-8459、585-964- 5442、585-964-5231、585-636-4636。此广告是 Suburban News 的一项公共服务。[TFN] __________________ Spencerport Ec- umenical 食品架为 Spencerport 学区需要食品和个人护理用品的人提供服务。请随时拨打 585-277- 4917。
参考文献 3 1. Hamlin JS、Wood D、Pereyra M、Grabowsky M。免疫接种时间不当:类型、原因及其与记录保存的关系。美国公共卫生杂志。1996;86(12):1812-4。10.2105/ajph.86.12.1812 2. Feikema SM、Klevens RM、Washington ML、Barker L。美国儿童的额外免疫接种。JAMA。2000;283(10):1311-7。10.1001/jama.283.10.1311 3. 世界卫生组织。免疫接种后不良事件 (AEFI) 2021 [可从以下网址获取: https://www.who.int/teams/regulation‐prequalification/regulation‐and‐safety/pharmacovigilance/health‐professionals‐info/aefi ]。4. 国家免疫咨询委员会。NIAC 指南第 11 章流感。都柏林:NIAC;2021 5. Lang S、Ford KJ、John T、Pollard AJ、McCarthy ND。向疫苗咨询服务报告的免疫接种错误:改进实践的情报。初级保健质量。2014;22(3):139-46。
作者要感谢以下个人对本文早期草稿的评论以及他们参加 2006 年 1 月在佛罗里达州肯尼迪航天中心举行的人因可靠性分析 (HRA) 方法评估研讨会:Dennis Bley (Buttonwood Consulting)、Roger Boyer (NASA,约翰逊航天中心)、Andreas Bye (挪威能源技术研究所)、Richard Cook (芝加哥大学)、Susan Cooper (美国核管理委员会)、Vinh Dang (瑞士保罗谢尔研究所)、Katrina Groth (马里兰大学)、Bruce Hallbert (爱达荷国家实验室)、Teri Hamlin (SAIC)、Jeff Julius (Scientech)、Gareth Parry (美国核管理委员会)、Pete Prassinos (NASA,总部)、Oliver Sträter (欧洲空中导航安全组织,比利时) 和 Michael Stewart (NASA,约翰逊航天中心)。图 i 显示了 HRA 方法评估研讨会的与会者。我们还要感谢 Barry Kirwan 对本文档早期草稿的广泛评论和指导。我们还要感谢 Michael Stamatelatos、Bill Vesely、Homayoon Dezfuli 和 Lynne Loewy 的编辑评论。
Andrea Aaron Annex Plating LLC Mihal & David Ariyeh Muriel Ashley Dale Atkins Darren Bahar Scott Bale Karen Balik Lorill Bean Laura & Keith Berman Terry & Russell Bernard Ruth Binter Anne Birchenough Lorin & Marc Blitzer Beth & Warren Bromberg Stephanie Browner & Rick Hamlin Blake Bueckman Chabad of Westport Oksana Chaklosh Lewis Cherniack Peter Chieco Erica & Gail Cohen Congregation Ahavath Achim Joseph Coviello Cummings & Lockwood, LLC Mary Beth Dale Amy & Aron Davidson Stacey Delikat Devan Acura of Norwalk Diray Media Lucy Effron Linda & Michael Epstein Bobbi & Eliot Essagof Linda & Allen Essner Held Family Nancy Sutin&Tom Federlin Gail Felsenstein Diane Ferber Claudine Feurstein Kara Schiff和Joseph Feuerstein Greenwich Ellen和Ari Fischel Ellen&Ari Fischel Barbara Stern和Robert Fischer和Robert Fischer Theresa&Robert Fischer&Robert Fischer Gavronsky Elisabeth Giles Jennifer&Lawrence Goichman Joanne&Marshall Goldberg Rebecca Goldenberg Audrey Goldfarb