在过去的几个月中,“挑战”一词不断出现。对于许多人来说,它是家里,工作中或在杂货店中的生活。但是这个词从哪里来,这是什么意思?科学和医学中的每个人都不喜欢一个好挑战吗?那不是让我们许多人从事这些领域的职业?根据在线词源词典(Etymonline),名词“挑战”在14世纪初被用来指责“可以被指控的东西;”它来自拉丁动词calumniari,意思是“指责错误,虚假陈述,诽谤”。据说名词“挑战”的指责内涵已在15世纪开始退缩,但直到1954年才遵守“艰巨的任务”。在NIH校园以及整个联邦政府中,挑战的新旧含义似乎都为某些人的看法着色。的确,我们一些劳动力的服务持续时间受到了挑战,保持冷静和专注于我们为什么在NIH的原因以及美国和世界各地的人民都取决于我们要做和实现的目标变得具有挑战性。,但实际上,这是我们必须做的,正是领导的定义要求那些有特权的人担任此类职位的人能够促进,授权并促进维持平静和专注于我们整个NIH劳动力。这是我们对我们对健康和科学的单一关注的奉献精神的致敬
先前已从皮肤活检中收获了原代真皮犬成纤维细胞。使用人类端粒酶逆转录酶 (hTERT) 对真皮犬成纤维细胞进行永生化,以从每个供体 (PDK4 野生型或 wt/wt、PDK4 杂合子或 wt/del、PDK4 纯合子或 del/del) 中创建永生化细胞系。这些细胞将在含有 10% 胎牛血清和 1% 抗生素抗真菌剂的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基的 6 孔板中接种和培养。将使用 QuickExtractTM DNA 提取溶液提取 DNA。将使用 Thermo Scientific NanoDropTM 1000 分光光度计对 DNA 进行分光光度定量。提取 DNA 后,将对 PDK4wt/wt 和 PDK4del/del 细胞中的 PDK4 基因进行 PCR 扩增。扩增后,将使用 DNA Clean & Concentrator™-25 试剂盒纯化 PCR 产物以进行裸 DNA 切割反应。兽医学学生将测试一种名为 KKH 的新酶,它是 Cas9 变体,可在不同的 PAM 或识别位点切割 DNA。我们使用计算方法确定 KKH 将在 PDK4 基因中所需的切割位点切割,从而有效地为插入双链寡脱氧核苷酸 (dsODN) 探针腾出空间。该 DNA 片段将通过同源重组将缺失的 16 个碱基对添加到基因中。已经设计了两个 dsODN,它们包含“丢失的外显子”序列以及与 DCM1 相关的缺失的 16 个碱基对,并将通过核转染反应测试它们是否掺入细胞 DNA 中。dsODN1 由 DCM1 突变两侧的 300 个碱基组成,dsODN2 由突变两侧的 350 个碱基组成。正向和反向引物组将由 Integrated DNA Technologies(IDT,美国爱荷华州科勒尔维尔)合成。将对每个引物组进行 PCR 梯度,退火范围为 dsODN1 的 55°C 至 67°C 和 dsODN2 的 54°C 至 64°C。目标是将缺失的 PDK4 片段插入切割的 DNA 中,并将在体内缺失 16 个碱基对的成纤维细胞中使用核转染试验进行测试。此后,将从细胞中提取 DNA 并评估整合效果。
董事办公室(OD)尼克·安德拉德(Nick Andrade)| nick.andrade@nih.gov |培训专家,数据科学策略办公室伊夫林·博茨威| botchwaye@od.nih.gov |数据科学策略办公室计划分析师Philip Chiang | chiangpt@od.nih.gov |校内研究办公室布莱恩特·詹(Bryant Jen)办公室专家| jenb2@od.nih.gov |室内研究办公室Nitin Kumar办公室专业经理| kumarn6@od.nih.gov |壁内研究办公室基础设施系统官员Etan Kuperberg | etan.kuperberg@nih.gov |卫生科学政策分析师,校外研究办公室Alison Lin博士| alison.lin@nih.gov |培训,劳动力倡议和社区参与(两次)部门负责人,数据科学办公室策略Steevenson Nelson博士| nelsons2@od.nih.gov |程序总监Rashod Qaim | qaimra@od.nih.gov |机器学习工程师,执行办公室卡洛斯·桑切斯(Carlos Sanchez)| sanchezc3@od.nih.gov |执行办公室的计划官克里斯·索尔兹(Chris Sowards)| chris.sowards@nih.gov |信息系统安全官,信息技术办公室Ylang Tsou | tsouyh@od.nih.gov |壁内研究办公室荣誉荣誉办公室| zhouh5@od.nih.gov |计划官员,执行办公室
Example projects under this priority: - Genomic surveillance and characterization against viral diseases like Influenza, RSV and SARS CoV2, Dengue, Chikungunya, Zika, JE, Non-polio enteroviruses, Chandipura, Rabies, Hepatitis, Enteric Viruses, Measles, Mumps, Rubella, Varicella and of unidentified viruses from the virus repository.- 体内和体内发病机理以及宿主对SARS-COV-2,登革热和chikungunya,流感和RSV的免疫反应。- 评估Chikungunya序列的免疫机制,免疫调节剂对单核细胞介导的对登革热的免疫反应的影响以及对预测严重登革热的生物标志物的鉴定。
涉及生成科学数据的壁内NIH研究受到2023年NIH数据管理和共享政策的约束。该政策要求提交数据管理和共享计划,并遵守批准的计划。对于将在2023年1月25日或之后进行的所有正在进行的与Zia(且不包含在临床方案中)相关的壁内研究,研究人员/项目负责人必须在2023年1月25日之前提交DMS计划。在该日期之后,可以全年提交新的和修订的计划,但必须作为年度报告过程的一部分批准并批准。对于与2023年1月25日或之后提交的IC初步科学审查相关的研究,必须与其他协议材料一起提交DMS计划。对于先前的协议,必须将DMS计划作为四年审查的一部分提交。如果拟议的研究将生成大规模的基因组数据,则基因组数据共享策略也适用,应在DMS计划中解决。DMS计划结合了2015年壁内人类数据共享政策所需的数据共享计划要素。壁内DMS计划模板与NIH为校外研究社区开发的建议模板一致,可在此处获得。有关DMS策略的其他指南,请访问sharing.nih.gov和OIR资源书。有关NIH共享政策,包括新数据管理和共享政策,请联系sharing@nih.gov。NIH图书馆提供一对一和小组咨询,以及课程和其他服务。DMP工具是加利福尼亚大学的一项服务,提供了其他指导和示例语言。提供了一些DMP工具示例答案。仅提供这些示例,调查人员使用此语言是可选的。