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体外实验
目的：芹菜素是一种具有抗肿瘤和抗炎特性的黄酮类化合物，目前正在研究其在治疗肝细胞癌 (HCC) 中的潜力。本研究评估了芹菜素对 SNU-449 HCC 细胞系增殖、侵袭和活力的影响。方法：为了评估芹菜素对 HCC 的抗增殖和抗转移作用，我们在 24、48 和 72 小时进行了 MTT 试验，使用了六种芹菜素浓度（2.5-100 µM）。在确定 48 小时的最低有效浓度后，在该剂量下进行了 SRB、菌落形成和伤口愈合试验。所有结果均以中位数（四分位数间距）表示。结果：MTT 试验确定 72 小时时 5 µM 芹菜素为最低有效剂量。 5 µM 芹菜素和未治疗对照组的吸光度分别为 0.581（IQR：0.26）和 0.67（IQR：0.049）（p>0.05）。SRB 测定显示芹菜素治疗组和对照组之间没有显着差异（0.54 [IQR：0.07] vs. 0.381 [IQR：0.365]；p>0.05）。菌落形成测定显示芹菜素治疗组的存活分数略有降低（相对于对照组为 74%）。伤口愈合测定结束时，芹菜素治疗组的伤口面积为 528,366（IQR：691,200）µm²，对照组为 528,861（IQR：523,150）µm²（p>0.05）。芹菜素治疗组和对照组的伤口愈合率相似（59.5 [IQR：36.9]% vs. 59.75 [IQR：15.4]%；p>0.05）。结论：本研究结果表明，芹菜素对肝癌细胞的直接抗增殖和抗转移作用可能有限。进一步研究肿瘤微环境的调节和抗肿瘤免疫反应的诱导可能会提供有价值的见解。关键词：芹菜素、抗转移治疗、抗增殖作用、肝细胞癌、SNU-449 细胞系
抗抑郁药的体内和Invitro评估...
G. R. Phadtare摘要：迄今为止，从各种药用植物及其成分对精神病疾病的新型药物疗法进行了显着发展。在不同的动物模型（例如强制游泳试验（FST））中，进行了本研究，以评估螺旋藻和氯吡格雷的抗抑郁潜力。在这项研究的螺旋藻和氯吡格雷分别以两种剂量（150,300 mg/kg＆75,300 mg＆75,150 mg/kg）和标准的imipramine and imipramine-indioum-cgc（分别为150,300 mg/kg＆75,150 mg/kg）。分开一组Wistar大鼠和白化小鼠。从这两种动物模型中发现，螺旋藻和氯吡格雷以剂量依赖性的方式在FST上固定的持续时间显着降低，并且高剂量的螺旋藻和150 mg/kg的clopidogrel的作用是与甲米皮胺的作用显着降低。螺旋藻和氯吡格雷与丙咪嗪制剂相比还显示出显着的抗抑郁作用，研究证实，螺旋藻和氯吡格雷会增加Na，dA，5HT的神经递质水平，表明神经传递调制调制是一种可能的作用机制。螺旋藻和氯吡格雷具有显着的抗抑郁活性。
Invitro DNA扩增和DNA的测序
最初的PCR要求包括100至35000个碱基对的目标DNA，与靶DNA互补并与靶DNA区域结合，二价阳离子（MG 2+），缓冲溶液，脱氧核糖核苷酸，例如DATP，DATP，DCTP，DCTP，DGTP和DTTP，dttp和Prospective Bases。DNA聚合酶是从深海中发现的细菌中分离出的必需酶。因此，该酶通常被称为TAQ聚合酶。该酶的优点是它是热稳定的。也就是说，它可以承受高达95 O的温度上升。查看图8.2，了解执行聚合酶链反应的步骤。用于执行PCR的仪器被称为热环生（图8.3）。建议学习者在给定的链接
Nauclea latifolia root提取物的Invitro抗菌活性
背景。感染正在成为全球健康危机，尤其是产生微生物的扩展谱β-内酰胺酶（ESBL）。世界卫生组织已将MDROS发生的趋势视为医学科学面临的迫切迫切需求。含有含有植物化学物质的草药植物可以合成为新的抗菌剂，是治疗MDROS的潜在替代方法。方法论：从灌木中收集了nauclea latifolia的新鲜根，并由Botanist在Nnamdi Azikiwe University的植物学家中鉴定出标本数Nauh-215 a。将根清洗，切成较小的尺寸，易于干燥，在阴影下干燥，并使用铣床粉碎。使用甲醇，己烷，乙酸乙酯和萃取水萃取粉碎的植物根。伤口拭子是从具有步道溃疡的糖尿病患者中收集的，并使用常规培养物分离和用于用作测试生物的细菌分离株的传统培养物隔离和生化鉴定测试方案进行处理。抗菌敏感性测试（AST）是通过柯比·鲍尔（Kirby-Bauer）椎间盘扩散技术进行的，并确定每个分离株的多药耐药性（MDR）。使用标准方法评估植物提取物的植物化学成分。使用琼脂井扩散方法一式三份和测量的平均抑制区域直径，以400mg/ml的浓度确定甲醇根提取物和级分的抗菌活性。还评估了时间杀伤分析。结论。使用串行加倍稀释技术确定甲醇根提取物的最小抑制浓度（MIC）和甲醇根提取物的最小杀菌浓度（MBC）。结果：乳杆菌的根提取物产率表明甲醇提取物的产量更高12.8％，其次是乙酸乙酸乙酯根部分数为8.0％，己烷分数为7.6％，水提取物的产量最小为6.8％。植物化学分析表明，甲醇根提取物含有各种植物化学物质，包括苯酚，类黄酮，单宁，糖苷，生物碱，皂苷，霉菌素，萜类化合物和三萜。The methanol root extract produced a higher mean inhibition zone diameter of 25.0±00mm against Escherichia coli, followed by mean inhibition zone diameter of 23.0±1.0mm against Klebsiella pneumoniae , 20.0±2.0mm against Staphylococcus aureus and Streptococcus pneumoniae , and the least mean inhibition zone diameter of铜绿假单胞菌为18.7±1.2mm。N. latifolia的甲醇根提取物的MIC范围为3.125至12.5mg/ml，MBC范围为6.25至25.00 mg/ml。在1x MIC，2X MIC和3倍MIC处的甲醇提取物的时间杀伤分析表明，在37 O C下孵育的2-8小时内观察到初始接种物的可行细胞计数的减少，表明高活性。乳杆菌的甲醇根提取物可能是抗菌剂的潜在来源，抗菌剂可以补充目前用于治疗由MDR细菌分离株引起的感染的常规抗生素。主编：S。S. Taiwo教授关键字：Nauclea latifolia;提取物；抗菌；噬抑制；杀菌； 2024年10月28日收到的时间杀害分析； 2024年11月19日修订； 2024年11月21日接受版权2025 AJCEM开放访问。本文根据创意共享损耗4.0国际许可证
隔离和象征性表征人头皮屑引起微生物
摘要：Barber Shop的人头发头皮屑（HHD）是一种常见的头皮疾病，对世界上大多数人口普遍存在。头皮屑是一种普遍的头皮条件，通常与头皮上的微生物定植有关。尽管出现了常见，但导致头皮屑形成的精确微生物仍不清楚。这项研究旨在通过体外测定法隔离和表征与人发毛有关的微生物。然后将分离的菌株接受各种体外测定，以阐明其在头皮屑发病机理中的潜在作用。通过这种全面的方法，我们试图加深对与头皮屑相关的微生物组成和行为的理解，为制定有针对性的治疗策略提供了宝贵的见解。这项研究旨在隔离和表征负责HHD的病原体以及对其生物控制技术的评估。分离的细菌。这里，使用琼脂井扩散方法来确定针对分离细菌的抗菌活性。发现分离的细菌菌落是革兰氏阳性，小，圆形和紫色的。MALDI-TOF MS测试是用于鉴定微生物的抗菌测试。此外，从植物提取物植物化学测试中进行。本研究将在生物学上给出有希望的鉴定和控制该病原体的方向。
人类胚胎研究，干细胞衍生的胚胎模型和Invitro Gametogenesenes：考虑到修订后的ISSCR指南
构建问题的ISSCR研究指南和临床翻译指南于2016年进行了最后修订。当时，已经认识到，与人类胚胎研究有关的伦理问题远远超出了人类胚胎来生成胚胎干细胞（ESC）的使用。2016年的指南认为与人类胚胎研究有关的更广泛的问题，包括针对人类胚胎的体外培养，干细胞 - 胚胎嵌合体和人类胚胎的基因组编辑的特定生成。2016年的指南还提出，所有与人类胚胎有关的研究都受到特殊过程的监督，名为Embryo Research Bercight（EMRO），并在此类过程中提供了可以允许，审查或禁止的拟议研究类别的指南。自2016年以来，与人类胚胎相关的研究的几个领域都取得了迅速的进展，包括长达14天的人类胚胎的扩展体外培养技术，创建基于干细胞的胚胎模型，这些模型反映了人类胚胎发育的不同阶段，以及来自干细胞的体外配子发生（IVG）。根据不断变化的科学，需要重新审视
热杀死的结核分枝杆菌诱导受过训练的免疫力Invitro和Invivo在全身或室内施用
摘要训练的免疫（TI）代表了先天免疫细胞的记忆样过程。ti可以用各种化合物（例如真菌B-葡聚糖或结核病疫苗）启动。从未考虑到利用TI防止感染和癌症的临床应用，对新的，简单且易于使用的TI诱导剂的需求日益增长。在这里，我们证明了热杀死的细菌结核（HK MTB）在体外和体内诱导Ti。在人类的单核细胞中，这种效果代表了一个真正受过训练的过程，因为HK MTB赋予针对各种异源挑战的炎症反应，例如脂多糖（Toll-like受体[TLR] 4 Ligand）和R848（TLR7/8 Ligand）（TLR7/8 Ligand）。从机械上讲，HK MTB诱导的Ti依赖于SYK/HIF -1 A依赖性方式的表观遗传机制。在体内，HK MTB在系统地和室内施用时会诱导Ti，而后者产生更健壮的Ti响应。总而言之，我们的研究表明，香港MTB有可能充当粘膜免疫疗法，可以成功诱导训练有素的反应。
患者衍生的瘤和人源化小鼠
作为精确医学和个性化疗法指导生物医学研究，患者衍生的瘤和人源化小鼠提供了对肿瘤生物学和药物反应的开创性见解。在2024年在海得拉巴举行的第4届国际研究和进步会议植根于3RS的原理（替代，减少和精致），探讨了生物医学研究的创新替代方案，重点是患者衍生的肿瘤和人类化小鼠。该事件在三个主要会议上进行了演讲，重点是Invitro模型，2D至3D细胞培养系统的演变，患者衍生的肿瘤类似以及人源化小鼠在临床前研究中的作用。研究人员强调了传统的2D细胞培养物和动物模型的局限性，主张模仿人类肿瘤微环境的3D细胞培养系统。人性化的小鼠具有人类免疫系统，作为传统动物模型与人类临床结果之间的有前途的桥梁。这次会议以引人入胜的“我们与他们”的辩论 - 风格的面板，比较和对比Invitro模型和人源化的小鼠的优点，并刺激了临床前研究未来方向的对话。该事件展示了持续向更相关的模型的转变，证明了现代研究中对3RS原则的全球承诺，从而促进了传统动物实验的道德和科学强大的替代方案。
原代人间充质干细胞的扩展Invitro培养物下调BRCA1相关的基因并损害DNA双链断裂识别
间充质干细胞（MSC）是多素的成年干细胞，对基于细胞的再生疗法有很大潜力。体外扩展改变其表观遗传和细胞特性，对DNA损伤反应（DDR）和基因组稳定性的影响很差。我们在这里报告了基于转录组的基于转录组的途径分析的结果，该途径分析了体外 - 脱落的人骨骨髓衍生的间充质干细胞（HBM-MSC），并补充了针对DNA双链断裂（DSB）修复的细胞测定。使用基因，KEGG和GSEA映射受体外衰老影响的基因途径，并被发现涉及DNA修复，同源重组（HR），细胞周期控制和染色体复制。在HBM-MSC中对X射线诱导的X射线诱导的DNA DSB的识别（C-H2AX + 53BP1焦点）的测定表明，在8周的体外衰减期间（即10个双倍的时间），细胞表现出较高的DDRADNA ddra。此外，观察到对DNA DSB识别受损的细胞的明显亚群。通过HR（例如Rad51，Rad54，BRCA1）参与DNA修复中的几个基因显示2.3至四倍降低了QRT-PCR的mRNA表达。我们得出的结论是，HMSC的体外扩张会导致与DNA断裂的识别和修复的衰老相关损害。
脂质纳米颗粒有效地提供了基本编辑器ABE8E，以进行col7a1校正，以疾病性表皮溶液bullosa成纤维细胞Invitro
到编辑脂质纳米颗粒（LNP）已被广泛批准，并在全球范围内用于传递mRNA。lnps可以包装并传递mRNA编码的基因编辑器，包括腺嘌呤碱基编辑器，它们将T碱基对转换为无需双重DNA断裂或供体DNA的G C C碱基对（Gaudelli等，2017）。腺嘌呤基本编辑器是一种潜在的治疗方法，用于遗传性疾病营养不良的表皮溶液Bullosa（DEB）。deb是由COL7A1的致病变异引起的，导致功能障碍或不存在VII型胶原蛋白（C7），这是固定纤维的主要组成部分，它们粘附了皮肤E表皮连接，从而使皮肤稳定性（Bardhan等，2020）。目前无法治愈DEB；然而，W 90％的Col7a1变体是单核苷酸变体，c> t单核苷酸变体可用于W 60％的变体（Clinvar数据库； 2023年8月访问）。这些变体是由腺嘌呤碱基编辑器定位的；我们的小组和其他人已经证明了腺嘌呤基本编辑器在恢复病原变体和恢复C7表达方面的实用性（Osborn等，2020; Sheriff等，2022）。在这项研究中，我们首先探讨了新型LNP的使用，以mRNA格式传递ABE8E（Richter等，2020），其单一指定RNA（SGRNA）针对致病性C.5047 c> t col7aa1 col7a1 col7a1变体在患者锻造的纸张中