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体外实验
目的：芹菜素是一种具有抗肿瘤和抗炎特性的黄酮类化合物，目前正在研究其在治疗肝细胞癌 (HCC) 中的潜力。本研究评估了芹菜素对 SNU-449 HCC 细胞系增殖、侵袭和活力的影响。方法：为了评估芹菜素对 HCC 的抗增殖和抗转移作用，我们在 24、48 和 72 小时进行了 MTT 试验，使用了六种芹菜素浓度（2.5-100 µM）。在确定 48 小时的最低有效浓度后，在该剂量下进行了 SRB、菌落形成和伤口愈合试验。所有结果均以中位数（四分位数间距）表示。结果：MTT 试验确定 72 小时时 5 µM 芹菜素为最低有效剂量。 5 µM 芹菜素和未治疗对照组的吸光度分别为 0.581（IQR：0.26）和 0.67（IQR：0.049）（p>0.05）。SRB 测定显示芹菜素治疗组和对照组之间没有显着差异（0.54 [IQR：0.07] vs. 0.381 [IQR：0.365]；p>0.05）。菌落形成测定显示芹菜素治疗组的存活分数略有降低（相对于对照组为 74%）。伤口愈合测定结束时，芹菜素治疗组的伤口面积为 528,366（IQR：691,200）µm²，对照组为 528,861（IQR：523,150）µm²（p>0.05）。芹菜素治疗组和对照组的伤口愈合率相似（59.5 [IQR：36.9]% vs. 59.75 [IQR：15.4]%；p>0.05）。结论：本研究结果表明，芹菜素对肝癌细胞的直接抗增殖和抗转移作用可能有限。进一步研究肿瘤微环境的调节和抗肿瘤免疫反应的诱导可能会提供有价值的见解。关键词：芹菜素、抗转移治疗、抗增殖作用、肝细胞癌、SNU-449 细胞系
Nauclea latifolia root提取物的Invitro抗菌活性
背景。感染正在成为全球健康危机，尤其是产生微生物的扩展谱β-内酰胺酶（ESBL）。世界卫生组织已将MDROS发生的趋势视为医学科学面临的迫切迫切需求。含有含有植物化学物质的草药植物可以合成为新的抗菌剂，是治疗MDROS的潜在替代方法。方法论：从灌木中收集了nauclea latifolia的新鲜根，并由Botanist在Nnamdi Azikiwe University的植物学家中鉴定出标本数Nauh-215 a。将根清洗，切成较小的尺寸，易于干燥，在阴影下干燥，并使用铣床粉碎。使用甲醇，己烷，乙酸乙酯和萃取水萃取粉碎的植物根。伤口拭子是从具有步道溃疡的糖尿病患者中收集的，并使用常规培养物分离和用于用作测试生物的细菌分离株的传统培养物隔离和生化鉴定测试方案进行处理。抗菌敏感性测试（AST）是通过柯比·鲍尔（Kirby-Bauer）椎间盘扩散技术进行的，并确定每个分离株的多药耐药性（MDR）。使用标准方法评估植物提取物的植物化学成分。使用琼脂井扩散方法一式三份和测量的平均抑制区域直径，以400mg/ml的浓度确定甲醇根提取物和级分的抗菌活性。还评估了时间杀伤分析。结论。使用串行加倍稀释技术确定甲醇根提取物的最小抑制浓度（MIC）和甲醇根提取物的最小杀菌浓度（MBC）。结果：乳杆菌的根提取物产率表明甲醇提取物的产量更高12.8％，其次是乙酸乙酸乙酯根部分数为8.0％，己烷分数为7.6％，水提取物的产量最小为6.8％。植物化学分析表明，甲醇根提取物含有各种植物化学物质，包括苯酚，类黄酮，单宁，糖苷，生物碱，皂苷，霉菌素，萜类化合物和三萜。The methanol root extract produced a higher mean inhibition zone diameter of 25.0±00mm against Escherichia coli, followed by mean inhibition zone diameter of 23.0±1.0mm against Klebsiella pneumoniae , 20.0±2.0mm against Staphylococcus aureus and Streptococcus pneumoniae , and the least mean inhibition zone diameter of铜绿假单胞菌为18.7±1.2mm。N. latifolia的甲醇根提取物的MIC范围为3.125至12.5mg/ml，MBC范围为6.25至25.00 mg/ml。在1x MIC，2X MIC和3倍MIC处的甲醇提取物的时间杀伤分析表明，在37 O C下孵育的2-8小时内观察到初始接种物的可行细胞计数的减少，表明高活性。乳杆菌的甲醇根提取物可能是抗菌剂的潜在来源，抗菌剂可以补充目前用于治疗由MDR细菌分离株引起的感染的常规抗生素。主编：S。S. Taiwo教授关键字：Nauclea latifolia;提取物；抗菌；噬抑制；杀菌； 2024年10月28日收到的时间杀害分析； 2024年11月19日修订； 2024年11月21日接受版权2025 AJCEM开放访问。本文根据创意共享损耗4.0国际许可证
EP0402 TAQ DNA聚合酶（rec。）
图3。准备和使用病毒载体在靶细胞中重组蛋白表达。（1）包装细胞（例如HEK293）用编码感兴趣基因和必要病毒蛋白的三个或四个质粒转染。（2）将病毒组装在包装细胞中，然后收获和纯化。（3）该病毒用于转导靶细胞，释放感兴趣的基因。（4）在此示例中，将慢病毒载体的RNA反向转录为DNA，将DNA整合到宿主基因组中以进行重组蛋白表达。
Invitrogen™Neon™NXT电穿孔系统
仅用于研究使用。不适用于诊断程序。©2023 Thermo Fisher Scientific Inc.保留所有权利。除非另有说明，否则所有商标都是Thermo Fisher Scientific及其子公司的财产。col023914 0223
Invitrogen™ LentiArray™ 人类 CRISPR 文库，96 孔...
转导条件 • 您必须根据经验确定每种细胞系的转导条件和感染复数 (MOI)。如果需要共感染，我们建议对 Cas9 至 CRISPR 文库慢病毒颗粒使用 5–10 的 MOI 比率，以达到最佳基因敲除程度。 • 感染期间使用含较低水平 FBS（例如 3– 5% FBS）的培养基可能会增加某些细胞类型的转导效率。 • Polybrene™（六甲溴铵）可以将慢病毒转导到人细胞的效率提高 2–10 倍。您必须根据经验确定目标细胞的最佳 Polybrene™ 浓度（例如最大感染性，最小毒性）。我们建议使用浓度范围（2–8 µg/mL）对 Polybrene™ 耐受性进行初步测试。 • 如果您计划使用嘌呤霉素进行选择，则必须首先确定选择转导细胞所需的最佳嘌呤霉素浓度。抗生素批次、细胞类型、细胞生长动力学和细胞培养条件（包括细胞密度）会影响筛选所需的嘌呤霉素量。使用嘌呤霉素进行筛选通常需要 7-10 天。