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IDT Alt-R Sp HiFi Cas9 核酸酶 V3 (CRS-10083-FL 03/19)
图 1. Alt-R Sp HiFi Cas9 Nuclease V3 促进近野生型靶向编辑效力并显著减少脱靶位点编辑。RNP 复合物由 Alt-R Sp Cas9 Nuclease V3 或 Alt-R Sp HiFi Cas9 Nuclease V3 与靶向 EMX1 基因的 Alt-R crRNA:tracrRNA 复合物结合形成。RNP 复合物 (4 µM) 通过 Nucleofection™ 方法 (Lonza) 递送到 HEK-293 细胞中。通过下一代测序 (rhAmpSeq 扩增子测序，IDT) 测量了靶位点和 9 个已知脱靶位点处的插入/缺失形成 (在 y 轴上以对数标度表示)。
COVID-19在西班牙疫苗接种策略...
西班牙药品和医疗保健产品机构（AEMP）代表西班牙的身体，对每个提前购买过程做出决定。本机构监测疫苗的开发，并确保在购买和分发过程中透明和良好的治理。在此框架内，已经与五家制药公司签署了有关疫苗的预先购买协议：阿斯利康/牛津，牛津，赛诺菲 - GSK，Johnson＆Johnson＆Johnson/Janssen，Pfizer/Biontech和Curevac。谈判继续与Moderna/Lonza和Novavax进行。这是广泛的疫苗组合，可以确保欧洲和西班牙逐渐同时以及整个人群的必要剂量，以面对这种前所未有的情况。
利用机器学习解决方案加速和改进生物工艺开发
Alessandro Butté 在意大利米兰理工大学获得理学硕士学位，在瑞士苏黎世联邦理工学院获得化学工程博士学位。在美国佐治亚理工学院完成博士后研究后，他加入苏黎世联邦理工学院担任高级科学家。2008 年，他加入 Lonza 担任小分子和多肽领域下游技术主管，后来担任项目经理。2013 年，他重返苏黎世联邦理工学院担任讲师，2017 年，他与他人共同创立了 DataHow AG，并担任首席执行官。他是 90 多篇国际同行评审期刊论文和多项专利的作者。2015 年，他在圣加仑大学获得高级工商管理硕士学位。
CRISPR 工作流程中的内毒素及其对转染效率的影响
图 3. 内毒素水平比较。根据制造商说明 (Lonza)，使用 Limulus Amebocyte Lysate (LAL) 测试测量使用 QIAGEN 的 EndoFree Plasmid Kit 和 QIAGEN Plasmid Plus Kit 以及 Zymo 的 ZymoPureII Endo-Zero Plasmid Kit 制备的质粒 DNA 样本中的内毒素水平。对于每个试剂盒，对 2 个样本进行 1:100 稀释，重复三次测试。测试的标准曲线范围在 0.005 EU/ml 和 50 EU/ml 之间。EndoFree Plasmid Plus 试剂盒产生的质粒 DNA 不含任何可检测的内毒素，而 Plasmid Plus 试剂盒提供的质粒 DNA 中内毒素含量显著降低。相比之下，ZymoPureII 产生的质粒 DNA 含有大量内毒素。通过琼脂糖凝胶电泳评估的两个试剂盒的质粒 DNA 的产量和质量相当（未显示数据）。
2030 年制药合同开发和制造组织 (CDMO) 预测
基线：与欧洲和美国相比，印度和中国是 2023 年的主要 CDMO 中心，因为这两个国家的劳动力成本较低。全球 CDMO 已进入中国市场，包括勃林格殷格翰与百济神州，而龙沙则在中国广州开设了一家工厂。中国本土 CDMO 也建立了工厂，包括药明生物，该公司在爱尔兰、新加坡、欧洲大陆和美国也设有海外工厂 10 。然而，由于中国的日益繁荣，中国制造业的劳动力成本自 2015 年以来翻了一番。2022 年，中国制造业劳动力成本为每小时 8.31 美元，而印度、泰国和越南每小时不到 3 美元。此外，亚洲（Altasia）的替代供应链国家教育水平高、物流绩效好、劳动力成本低，有可能吸引制造业离开中国，如图 4 所示。11
Alt-R HDR 设计工具和 HDR 供体寡核苷酸
图 1.与其他修饰相比，具有 Alt-R HDR 修饰的供体寡核苷酸表现出更高的 HDR 效率。 图 1.与其他修饰相比，具有 Alt-R HDR 修饰的供体寡核苷酸表现出更高的 HDR 效率。 （A）供体寡核苷酸修改的示意图。 （B）每次修改的 HDR 效率。使用 4D-Nucleofector™ 系统（Lonza）将四个靶向基因位点的 RNP 复合物（2 µM）与 0.5 µM 单链 HDR 供体寡核苷酸通过电穿孔共转染到 Jurkat 和 HeLa 细胞中。使用的 RNP 复合物是 Alt-R Sp HiFi Cas9 Nuclease V3，以及 Alt-R CRISPR-Cas9 crRNA 和 tracrRNA。 使用了三种类型的供体寡核苷酸：未经任何修饰的寡核苷酸（未修饰的）、具有硫代磷酸酯键的寡核苷酸（PS 修饰的）和具有 Alt-R HDR 修饰的寡核苷酸（Alt-R HDR 修饰的）。 电穿孔后 48 小时 (HeLa) 或 72 小时 (Jurkat) 提取基因组 DNA。通过在 Illumina™ MiSeq™ 系统 (v2 化学、150 bp 双端读取) 上进行扩增子测序来测量 HDR 效率。
如何安全处理抗体药物偶联物
有效载荷通过接头与抗体连接。这旨在在整个体循环中提供足够的稳定性，然后在到达目标癌细胞后促进有效载荷的有效控制释放。这种有效载荷也称为“弹头”，是具有抗癌作用的 ADC 的一部分。它通常非常有效，因为每个抗体只能附着有限数量的药物分子。 ADC 的概念并不新鲜。1913 年，保罗·埃尔利希首次提出了这一概念，开发实验性 ADC 的工作始于 45 年后。第一次临床试验取得积极成果是在 1983 年进行的，2001 年，惠氏（后来被辉瑞收购）凭借 Mylotarg® 疗法治疗急性髓系白血病获得了市场认可。现在市场上还有其他几种 ADC。龙沙于 2007 年在其强效化合物工厂 (PCP) 中首次进行了 ADC 的生物结合。自那时起，该公司以 CDMO 的身份参与了 70 多个 ADC 项目，生产了 750 多个 cGMP 批次，并合成了 12 多种不同的有效载荷。
优化的γδT细胞扩展和电穿孔方法
摘要：目的：这项研究的目的是探索γδT细胞扩展的最佳条件，并确定γδT细胞最合适的电穿孔条件。方法：在这项研究中，我们将唑来膦酸和细胞因子组合起来诱导γδT细胞，并使用Lonza amaxa 4D-核对象来优化电穿孔的区别。通过流式细胞仪检测到γδT细胞的电穿孔效率。结果：结果表明，外周血比脐带血可能产生更高的纯度γδT细胞（P <0.0001），并且诱导的γδT细胞的比例达到82.43±5.9％。通过流式细胞仪，我们发现与其他电动模块相比，电穿孔模块EH-115导致最高的电穿孔效率（所有p <0.0001）。此外，我们还发现，当100μl电穿孔系统中的细胞数量为3×10 6时，转移效率最高（所有P <0.001），并且最终转染效率达到69.1±2.26％。结论：在这项研究中，可以有效地获得一定比例的γδT细胞，并大大提高了转染效率，这为γδT细胞的遗传修饰提供了有效的程序。
关于 COVID-19 疫苗的常见问题
• Moderna/ NIAID/ Lonza/ Catalent/ Rovi/ Medidata/ BIOQUAL ：在美国、加拿大、以色列、瑞士和英国使用。 • AstraZeneca/Oxford：在阿根廷、巴西、多米尼加共和国、萨尔瓦多、印度、墨西哥、摩洛哥、巴基斯坦和英国使用 • BioNTech/ Pfizer/ Fosun Pharma/ Rentschler Biopharma ：在欧盟委员会、阿根廷、墨西哥、沙特阿拉伯、加拿大、巴林、美国和英国使用。 • Janssen Pharmaceutical Companies/Sanofi/Merk ：在美国被授权“紧急使用”。 • Gamaleya Research Institute：在阿尔及利亚、阿根廷、玻利维亚、匈牙利、巴勒斯坦、巴拉圭、塞尔维亚、土库曼斯坦、阿联酋和委内瑞拉使用，并在白俄罗斯和俄罗斯“注册”。 • 康希诺生物/北京生物技术研究所/ Petrovax ：中国中央军事委员会批准的“军用疫苗”。 • 武汉生物制品研究所/国药集团 ：在中国和阿联酋用于“紧急使用”。 • 科兴生物/布坦坦研究所/ Bio Farma ：在巴西、中国和印度尼西亚用于“紧急使用”。 • 北京生物制品研究所/国药集团 ：在中国、巴林、巴基斯坦和阿联酋使用。 • Bharat Biotech / 印度医学研究理事会/国家病毒学研究所/ Ocugen/ Precisa Medicamentos 在印度用于“紧急使用” • 哈萨克斯坦共和国生物安全问题研究所：在哈萨克斯坦通过“临时注册”使用
氢氧化钙与2%硫酸镁混合使用的效果...
目的：对患有牙髓坏死的慢性根尖周炎成年患者，分别使用氢氧化钙糊剂根管内用药、仅氢氧化钙糊剂根管内用药和未使用根管内用药的机械预备方法，评估术后疼痛并定量细菌内毒素。材料和方法：45 名患有牙髓坏死的单根牙患者分为 3 组（n=15），第一组仅接受机械预备，第二组仅接受氢氧化钙根管内用药，第三组接受氢氧化钙和 2% 氯己定凝胶混合物根管内用药。使用数值评定量表评估术后疼痛体验，同时使用发色终点鲎试剂盒 (LONZA) 来量化内毒素的量。结果：与氢氧化钙糊剂和2%氯己定凝胶混合物相比，氢氧化钙在减少术后4小时和24小时的疼痛方面效果显著，而混合物在减少内毒素方面效果更佳，但统计学上无显著差异。结论：在坏死牙中每隔2周使用一种根管内药物有助于缓解术后疼痛并减少内毒素。关键词：根管内药物，氢氧化钙，2%氯己定凝胶，细菌内毒素。