市场上首个经过鉴定的单克隆 MDCK 悬浮细胞系 MDCK 细胞于 1958 年从一只成年雌性可卡犬的肾脏中分离出来。MDCK 细胞被认为是获得流感病毒原代分离物最合适的培养细胞基质。此外,它们已被证明是大规模流感病毒生产的理想选择,与其他细胞系相比,病毒复制速度更快。¹ 尽管如此,疾病控制和预防中心 (CDC) 估计,大约 80% 的流感疫苗是在祖传鸡蛋平台上生产的,其余的则是使用基于细胞或重组的技术生产的。²
图1在三个平行生物反应器中培养的IAV产生的MDCK悬浮液细胞。生存的细胞浓度(A),可行的细胞体积(B),生存力(C)和平均细胞直径(D)。细胞浓度(a)和细胞体积(b)拟合到指数级生长函数(曲线),以确定特定的生长速率。垂直线表示感染时间,其中细胞悬浮液的稀释量稀释了一半。str1(■),str2(•),str3(▲)。iav,流感病毒; MDCK,MADIN - DARBY犬肾
乳腺癌耐药蛋白 (BCRP) 是药物效应和药物相互作用中的关键转运蛋白。然而,多药耐药蛋白 1 (MDR1) 的内源性表达混淆了体外模型中 BCRP 介导转运的解释。在这里,我们使用 CRISPR-Cas9 编辑的 Madin-Darby 犬肾 (MDCK) II 细胞系 (MDCK cMDR1-KO ) 来稳定表达人类 BCRP (hBCRP),而没有内源性犬 MDR1 (cMDR1) 表达 (MDCK-hBCRP cMDR1-KO )。靶向定量蛋白质组学验证了 hBCRP 的表达,整个蛋白质组的整体分析证实了其他药物转运蛋白或代谢酶的背景表达为零或非常低。这种新的细胞系具有与 MDCK cMDR1-KO 和之前建立的过表达人类 MDR1 (hMDR1) 的相应细胞系 MDCK-hMDR1 cMDR1-KO 相似的蛋白质组。对 MDCK- hBCRP cMDR1-KO 的功能研究证实了高 hBCRP 活性。MDCK-hBCRP cMDR1-KO 细胞系与 MDCK-hMDR1 cMDR1-KO 一起轻松准确地识别了 hBCRP 和 hMDR1 转运蛋白的共享或特定底物。这些细胞系为药物开发中评估药物效应和药物间相互作用提供了新的、改进的体外工具。© 2020 美国药剂师协会®。由 Elsevier Inc. 出版。这是一篇根据 CC BY 许可 (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/) 开放获取的文章。
图 1:STAT1 KO MDCK 细胞中产生的甲型流感病毒 (H1N1;ATCC ® VR-1736 ™)。 (A) WT 亲本和 MDCK.STAT1 KO 细胞产生的病毒上清液的免疫染色 TCID 50。 细胞以 0.01 的 MOI 感染甲型流感病毒。 感染后 48 小时收集上清液,并按照指示的稀释度重新感染 WT MDCK 细胞。 绿色 - 抗甲型流感病毒染色,蓝色 - 核染色。 细胞以 0.01 的 MOI 感染甲型流感病毒 48 小时,然后 (B) 计算感染后 48 小时 MDCK.STAT1KO 细胞中产生的甲型流感病毒上清液的 TCID 50。 (C) 感染后 48 小时 MDCK.STAT1KO 细胞中产生的甲型流感病毒基因组的 RT-PCR 定量。
218 辉瑞-BIONTECH COVID-19 疫苗 - 5-11 年 149 流感,活,鼻内,四价 219 辉瑞-BIONTECH COVID-19 疫苗 - 6 个月 - 4 年 150 流感,注射,四价,不含防腐剂 228 MODERNA COVID-19 疫苗 - 6 个月 - 5 年 158 流感,注射,四价,含有防腐剂 161 流感,注射,四价,不含防腐剂,儿童 21 水痘 171 流感,注射,MDCK,不含防腐剂,四价 187带状疱疹 (SHINGRIX) 185 流感,重组,四价,注射用,不含防腐剂 186 流感,注射用,MDCK,四价,防腐剂 财务类别代码
G蛋白 - 偶联受体(GPCR)的粘附家族由N末端较大的细胞外区域定义,该区域包含各种与粘附相关的结构域和高度保守的GPCR-Autoprototepotepotepotepotion-apoprotey-oprotote-oprotote-oprotote-oprotote-oprote-oprote-oprote-oprote-oprote-oprote-oprote-opersy-to诱导(增益)结构域,后者是位于典型的七跨透明型跨型跨型跨型跨型跨型跨型区域的后者。这些受体被广泛表达,并参与了各种功能,包括发育,血管生成,突触形成和肿瘤发生。gpr125(ADGRA3)是孤儿粘附GPCR,已显示可调节胃部胃肠杆中的平面细胞极性,但其生化特性和在哺乳动物细胞中的作用仍然很少仍然未知。在这里,我们表明,当在犬肾上皮MDCK细胞和人类胚胎肾Hek293细胞中表达时,人类GPR125可能会经历顺式蛋白质解。在受体生物合成的早期阶段,裂解似乎发生在增益域内的非典型GPCR蛋白水解位点。产品,即,N-ter-minal和c末端片段似乎在自蛋白解析后保持相关,如其他粘附GPCR所观察到的。此外,在极化MDCK细胞中,GPR125专门募集到质膜的基底外侧结构域。募集可能需要C末端PDZ障碍 - GPR125的结合基序及其与细胞蛋白DLG1的相互作用。敲低的GPR125以及DLG1的敲低导致在MDCK细胞的Matrigel 3D培养物中形成具有多个Lu-ens的异常囊肿。与多弹性表型一致,在GPR125 -KO MDCK细胞中,有丝分裂的纺锤体在囊肿发生过程中不正确。因此,基底外侧蛋白GPR125是一种可自启动的Adhe-Sion GPCR,似乎在上皮细胞中的脂质极性中起着至关重要的作用。
二水合物、柠檬酸一水合物、新霉素、卡那霉素、氢化可的松、鸡蛋蛋白(≤0.4 mcg)、十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)、甲醛 Fluarix Octoxynol-10 (TRITON X-100)、α-生育酚琥珀酸酯、聚山梨醇酯 80 (Tween 80)、氢化可的松、硫酸庆大霉素、卵清蛋白、甲醛、脱氧胆酸钠、磷酸钠缓冲等渗氯化钠 Flublok 氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、聚山梨醇酯 20 (Tween 20)、杆状病毒和草地贪夜蛾细胞蛋白、杆状病毒和细胞 DNA、Triton X-100 Flucelvax Madin-Darby 犬肾 (MDCK) 细胞蛋白、磷酸盐缓冲溶液、除 HA 以外的蛋白质、MDCK 细胞DNA、聚山梨醇酯 80、十六烷基三甲基溴化铵和 β-丙内酯、硫柳汞(多剂量瓶装)FluLaval 卵清蛋白、甲醛、脱氧胆酸钠、α-生育酚氢琥珀酸酯、聚山梨醇酯 80、硫柳汞(多剂量瓶装)、磷酸盐缓冲盐溶液。Fluzone High Dose 和 Fluzone
流感A(H1N1)PDM09细胞培养的1个候选疫苗病毒或重组疫苗抗原(S)用于开发和生产疫苗,用于在2023 - 2024年北半部半球季节中使用认证的人流感病毒隔离(E.G. MDCK 33016 PF A,NIID-MDCK b)由WHO全球流感监测和响应系统(GISRS)的WHO合作中心(CCS)进行。 WHO CCS还对细胞培养的候选疫苗病毒(CCCVV)进行抗原和遗传分析。 除非另有说明,否则这些CCCVV已通过双向血凝抑制(HI)或病毒中和(VN)测试(VN)测试针对细胞培养的传播原型病毒与WHO建议2相匹配2。 WHO CCS对这些CCCVV进行了其他测试(包括不定代理)。 国家或区域控制当局通常批准每个国家使用的流感疫苗的制造,组成和制定3。 制造商应就使用这些CCCVV进行流感疫苗生产的适用性咨询相关的国家或区域控制当局。MDCK 33016 PF A,NIID-MDCK b)由WHO全球流感监测和响应系统(GISRS)的WHO合作中心(CCS)进行。WHO CCS还对细胞培养的候选疫苗病毒(CCCVV)进行抗原和遗传分析。除非另有说明,否则这些CCCVV已通过双向血凝抑制(HI)或病毒中和(VN)测试(VN)测试针对细胞培养的传播原型病毒与WHO建议2相匹配2。WHO CCS对这些CCCVV进行了其他测试(包括不定代理)。国家或区域控制当局通常批准每个国家使用的流感疫苗的制造,组成和制定3。制造商应就使用这些CCCVV进行流感疫苗生产的适用性咨询相关的国家或区域控制当局。
流感B Yamagata谱系细胞培养的1个候选疫苗病毒或重组疫苗抗原(S)用于开发和生产疫苗,用于在2024年使用认证的细胞系(例如MDCK 33016 PF A,NIID-MDCK b)由WHO全球流感监测和响应系统(GISRS)的WHO合作中心(CCS)进行。WHO CCS还对细胞培养的候选疫苗病毒(CCCVV)进行抗原和遗传分析。除非另有说明,否则这些CCCVV已通过对细胞培养的双向出血抑制(HI)测试(HI)试验传播了与WHO建议2相匹配的原型病毒。WHO CCS对这些CCCVV进行了其他测试(包括不定代理)。国家或区域控制当局通常批准每个国家使用的流感疫苗的制造,组成和制定3。制造商应就使用这些CCCVV进行流感疫苗生产的适用性咨询相关的国家或区域控制当局。
B/Phuket/3073/2013 样菌株(B/Singapore/INFTT-16-0610/2016,野生型) 每 0.5 毫升剂量 15 微克 HA** ………………………………………. * 在 Madin Darby 犬肾 (MDCK) 细胞中繁殖 ** 血凝素 该疫苗符合世界卫生组织 (WHO) 建议(北半球)和欧盟对 2021/2022 季节的建议。 Flucelvax Tetra 可能含有微量 β-丙内酯、十六烷基三甲基溴化铵和聚山梨醇酯 80。有关辅料的完整列表,请参阅第 6.1 节。 3. 药物形式 预充注射器中的注射用悬浮液(注射剂)。透明至微乳白色的液体。 4. 临床特点 4.1 治疗适应症 预防成人和 2 岁以上儿童的流感。应按照官方建议使用 Flucelvax Tetra。 4.2 剂量和给药方法 剂量