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开发了纳米孔测序策略，用于检测突变，在金黄色葡萄球菌菌株中赋予万古霉素中间耐药性
摘要金黄色葡萄球菌是菌血症和其他医院感染的主要原因。细胞壁活性抗生素万古霉素通常用于治疗耐甲氧西林（MRSA）和敏感（MSSA）感染。万古霉素中间的金黄色葡萄球菌（Visa）变体可以通过从头突变产生。在这里，我们进行了试点实验，以开发一种基于PCR/长阅读测序的合并的方法，用于检测先前已知的签证突变。引物旨在生成10个含量涵盖与签证表型相关的16个基因。我们对牛津纳米孔衔接子的读数长期读取，我们对据和and go骨流通量进行了测序。然后，我们通过映射读取读取的父母共识或已知参考序列，并比较称为变体与实验室选择中已知签证突变的数据库进行了比较。池中的每个扩增子被测序为高（。1,000）覆盖范围，并且在扩增子长度和覆盖范围之间未发现任何关系。我们还能够检测到因果突变（步行646c。g）在源自USA300菌株的签证突变体中（来自父母菌株N384的N384-3）。将突变体（N384-3）和父母（N384）DNA从0到1个突变体以不同的比例（N384）DNA表明平均次要等位基因频率（6.5％）的突变检测阈值在95％侧置（两个标准的差异高于平均突变频率高于平均值的频率））。该研究奠定了直接的金黄色葡萄球菌抗生素抗生素基因型基因型推断，并使用临床样品的快速纳米孔测序。
美国西南部印第安儿童和成人金黄色葡萄球菌携带率及基因组流行病学
收到日期：2021 年 9 月 30 日；接受日期：2022 年 3 月 6 日；发布日期：2022 年 5 月 13 日 作者隶属关系：1 中佛罗里达大学，4110 Libra Drive，奥兰多，佛罗里达州 32816，美国；2 约翰霍普金斯大学彭博公共卫生学院，415 North Washington Street，巴尔的摩，马里兰州 21231，美国。 *通讯作者：Catherine G. Sutcliffe，csutcli1@jhu.edu 关键词：携带；基因组流行病学；美洲原住民；系统发育；金黄色葡萄球菌。缩写：AN，前鼻孔；CA-MRSA，社区相关耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；CC，克隆复合体；CI，置信区间；gDNA，基因组 DNA；IHS，印度健康服务局；IRB，机构审查委员会； MLST，多位点序列分型；MRSA，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；MSSA，甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌；NP，鼻咽癌；ONT，牛津纳米孔技术；OP，口咽癌；PR，患病率；SCC mec，葡萄球菌盒式染色体 mec ；ST，序列类型；WGS，全基因组测序。‡现地址：美国辉瑞公司全球肺炎球菌疫苗、科学事务和流行病学部。金黄色葡萄球菌基因组序列的 NCBI SRA 接入号在补充文件 S1 中给出。†这些作者对这项工作贡献相同数据声明：所有支持数据、代码和协议均已在文章中或通过补充数据文件提供。本文的在线版本提供一个补充文件和四个补充表格。 000806 © 2022 作者
病原体面板测试策略编号：AHS - G2149
EIEC Enteroinvasive Escherichia coli ESICM European Society of Intensive Care Medicine ETEC Enterotoxigenic Escherichia coli EUA Emergency use authorization FDA Food and Drug Administration GDH Glutamate dehydrogenase GI Gastrointestinal GIPs Gastrointestinal pathogens GPP Gastrointestinal pathogen panel HIV Human immunodeficiency virus HPV Human papillomavirus infection IDSA Infectious Diseases Society of America LAMP Loop-mediated isothermal amplification LCD Local coverage determination LDT Laboratory developed test ME Meningitis/encephalitis MRSA Methicillin resistant staphylococcus aureus MSSA Methicillin sensitive staphylococcus aureus NAAT Nucleic acid amplification test NICE National Institute for Health and Care Excellence NP Nasopharyngeal NPS Nasopharyngeal swabs PCR Polymerase chain reaction PLA Proprietary laboratory analyses PPA Percent positive agreement RNA Ribonucleic acid RP Respiratory pathogen RP2 Respiratory pathogen panel 2 RPP Respiratory pathogen panel RSV Human respiratory syncytial virus RT-PCR Reverse transcriptase polymerase chain reaction RV+ Respiratory virus plus核酸测试RVP呼吸病毒面板SARS-COV- 2严重的急性呼吸综合症冠状病毒2 CCM CARICAR CARE医学学会Shea Shea医疗保健流行病学学会SOT SOT固体器官移植SSTI SSTI SSTI STI皮肤和软组织感染STEC SHIGA TECE SHIGA TESCAINIA
布里斯托尔健康保护年度报告2023
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