多倍体在禾本科植物中很常见,对传统育种提出了挑战。基因组编辑技术绕过了杂交和自交,能够在一代中对多个基因拷贝进行有针对性的修改,同时保持许多多倍体基因组的杂合背景。巴哈草(Paspalum notatum Flügge ́;2 n =4 x =40)是一种无融合生殖的四倍体 C4 物种,在美国东南部广泛种植,作为肉牛生产和公用事业草坪的饲料。叶绿素生物合成基因镁螯合酶(MgCh)被选为在四倍体巴哈草中建立基因组编辑的快速读出目标。含有 sgRNA、Cas9 和 npt II 的载体通过基因枪法递送到愈伤组织培养物中。通过基于 PCR 的检测和 DNA 测序对编辑植物进行了表征,并观察到高达 99% 的 Illumina 读数的诱变频率。野生型 (WT) 巴哈草的测序显示,MgCh 的序列变异水平很高,这可能是因为存在至少两个拷贝,可能包含八种不同的等位基因,包括假基因。MgCh 突变体表现出明显的叶绿素消耗,叶片绿度降低了 82%。两种品系显示出随时间推移的编辑进展,这与体细胞编辑有关。获得了嵌合 MgCh 编辑事件的无融合生殖后代,并允许在一系列叶绿素消耗表型中识别出统一编辑的后代植物。高度编辑的突变体的 Sanger 测序显示 WT 等位基因的频率升高,可能是由于频繁的同源定向修复 (HDR)。据我们所知,这些实验是首次报道将基因组编辑应用于多年生暖季草皮或牧草。该技术将加速巴哈草品种的开发。
16. 摘要 科罗拉多州交通部多年来一直使用 MgCl 2 进行防冰和除冰。有人担心这些化学物质可能会影响汽车和卡车的各种部件。在科罗拉多大学博尔德分校材料实验室进行的这项实验研究中,选择了汽车行业的代表性金属,以比较它们在暴露于除冰盐 NaCI 和 MgCh 时的腐蚀行为。在测试过程中使用了试剂级 MgCh 和 CDOT 使用的 MgCh(含有腐蚀抑制剂)。对选定的金属采用了两种测试方法:SAE 12334(加速循环测试);和 ASTM B 117(连续喷涂测试)。SAE 12334 的测试环境提供了循环暴露,这更好地模拟了实际使用条件。尽管 CDOT 规范规定氯化镁的腐蚀性必须比氯化钠低 70%,但 SAE J2334 获得的实验结果表明,MgCl 2 对测试的裸露金属的腐蚀性比 NaCl 更强。腐蚀程度各不相同,对于某些金属只有轻微差异,而对于 SS410 则高出 13 倍。与 SAE 12334 的结果相比,ASTM B 117 的实验结果显示出不一致,尤其是对于不锈钢 SS410,NaCI 对其的腐蚀性比 MgCI 2 更强。实验还表明,在三种情况下,MgCl 2 和 NaCl 的混合物对金属的腐蚀比单一盐(MgCl 或 NaCl)略高
