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2023兽医支原体研究报告
Appendices .......................................................................................................................................... 261
新型口服二氧化硅疫苗诱导粘膜免疫的疗效评估
猪hyopneumoniae是猪Enzootic肺炎的主要病因学剂，在全球猪生产中广泛传播。它的预防对生产系统引起了极大的兴趣，因为它在肺组织中的定殖导致了巨大的生产损失。这项研究旨在将30头猪的溶质性脱落和急性期反应比较不同的疫苗接种方案：使用纳米结构的中孔二氧化硅（SBA-15）作为佐剂（n = 10）的实验性口服疫苗； 24天大的肌肉内市售疫苗（n = 10）；在对Hyopneumoniae的实验挑战之后，对照组（n = 10）。喉和鼻拭子，并在感染后7、10、14、14、17、23、28、35、42和49天收集口服液体，以通过qPCR监测病原体排泄。鼻拭子还用于检测ELISA的抗杀菌性IGA。血液样本以监测急性相蛋白。疫苗接种后七天在两个免疫组中观察到抗体反应，而对照组在挑战后4周对这种免疫球蛋白呈阳性。肺病变评分在免疫组中相似，低于对照中观察到的。SBA-15辅助口服疫苗提供了免疫学反应，减少了Hyopneumoniae的脱落，并通过降低的肺部病变证实了粘膜保护。这项研究为针对Hyopneumoniae的疫苗开发提供了有用的数据。
细胞培养中的支原体
污染源 支原体污染的可能来源有多种。近年来，人们对该问题的认识不断提高，这可能改变了各个来源的贡献。过去，牛血清等培养试剂一直是相当大的污染源。如今，大多数实验室更喜欢无支原体测试血清。实验室人员可能会将支原体引入培养物中，现在他们接受了培训，以避免在处理培养物时受到污染。然而，其他来源更难避免。任何添加到培养物中的物质都是相关的，例如病毒悬浮液、抗体溶液或培养基成分。来自原始组织分离物的支原体在报告病例中所占比例不到 1%。迄今为止最常见的来源是来自受感染培养物的交叉污染。实验室交换受感染的培养物，从而无意中传播支原体。PanReac AppliChem 为每个细胞培养实验室提供检测和治疗支原体的工具。对于显微镜检测，我们提供经过验证的荧光染料 DAPI（产品代码 A1001，包装尺寸从 10 毫克到 10 克）。
澳大利亚养殖的濒死斑节对虾中支原体的分离、特性和 DNA 分析
摘要。在澳大利亚昆士兰州北部爆发的中期死亡综合症期间，对 24 只濒死对虾进行了调查，首次从中培养出 14 株支原体分离株。从对虾的鳃附属物、大脑和眼睛中分离出支原体。支原体在含有 0.5 至 3.0% 氯化钠和 20% 胎牛血清的改良 Frey 培养基中，在有或没有 CO2 的情况下在 20 至 37°C 之间生长。在 37°C 和 5% CO2 下观察到最佳生长。所有菌株都经过大小过滤和克隆，并将它们的形态、生化和生物分子特征与以前描述的支原体种的特征进行了比较。结果表明，这些菌株属于 2 个新种，为其指定了临时名称支原体 P1 (MPI) 和支原体 P2 (MP2)。两种支原体都能发酵大多数测试的碳水化合物，但不能水解精氨酸和尿素。MP1 产生薄膜和斑点，具有高磷酸酶活性，但 MP2 不会产生薄膜或斑点，也没有磷酸酶活性。两种物种都能裂解绵羊红细胞。从 MP1 DNA 中制备基因组文库（Mbol 消化）并克隆到 pUC19 中。使用从纯化的 MPI 制备的探针进行菌落杂交，以识别感兴趣的菌落。通过用 EcoRI 和 HindIII 消化从重组质粒中回收 MP1 DNA 片段。该 DNA 用于制备随机引物探针，用于与来自 MP1、MP2、M. bovis、M. dispar、M. agalactiae、M. bovjyenitalium、M. ovipneumonjae、支原体组 7、M. aryinini 和属于不同属的细菌的固定 DNA 进行点印迹杂交分析。该探针仅与来自 MP1 的基因组 DNA 发生反应。为了进一步提高灵敏度，设计了一种 MP1 特异性聚合酶链反应 (PCR) 检测方法，并产生了 254 bp 扩增子，可将 MP1 与所有其他测试的支原体 DNA 区分开来。使用 DNA 探针和 PCR 检测方法，从患病虾中分离出的大多数支原体可指定为菌株 MP1 (11/14，-80%)。