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调整 CRISPR/Cas9 系统以靶向线粒体基因组
使用 CRISPR-Cas9 系统对线粒体基因组进行基因编辑极具挑战性，主要是因为将向导 RNA 和 Cas9 酶复合物递送到线粒体中的效率较低。在本研究中，我们能够通过将 NADH-泛醌氧化还原酶链 4 (ND4) 靶向向导 RNA 附加到 RNA 转运衍生的茎环元件 (RP 环) 上并表达具有先前线粒体定位序列的 Cas9 酶来在线粒体 DNA 中进行基因编辑。我们观察到 RP 环 gRNA 的线粒体共定位和携带 ND4 序列中 11205G 变体的细胞中 ND4 表达显著减少，同时降低了线粒体 DNA 水平。这项概念验证研究表明，添加 sgRNA 的茎环元件可以运输到线粒体并与 Cas9 相互作用，介导序列特异性的线粒体 DNA 切割。使用这种新方法靶向线粒体 DNA，我们的结果进一步证明 CRISPR-Cas9 介导的基因编辑可能用于治疗线粒体相关疾病。
使用指定的mtDNA ...
掺假或伪造食品引起了公众对清真问题的担忧。许多与食品有关的问题，例如肉丸，香肠和咸牛肉，都使用猪肉来伪造。这项研究旨在确定一种直接的聚合酶链反应（DPCR）技术，用于在肉丸，香肠和咸牛肉等加工肉类产品中检测到猪肉DNA检测，并在短时间内使用特定的引物，ND4和D-loop以低成本，以低成本。该研究使用了一种直接的PCR技术，其在样品上的裂解过程的孵育时间和温度方面有变化。从裂解结果获得的DNA浓度，新鲜肉类和加工肉类产品的孵育时间和温度的变化为66.17-469.23 ng/µl，新鲜和加工肉类产品中DNA的纯度为1.70-25.25。ND4底漆对使用Direct PCR在处理后的肉类产品中对DNA扩增更敏感。使用牛肉写在包装上的肉丸，香肠和咸牛肉产品未发现任何混合或添加猪肉。直接PCR可以在加工肉类产品（例如肉丸，香肠和咸牛肉）中检测猪肉DNA。
由于线粒体DNA编码的呼吸复合物I亚基
leber遗传性视神经神经病（Lhon，Omim＃535000）是记录失明案例的重要贡献者。大多数LHON病例超过90％，是由线粒体脱氧核酸（MTDNA）中三个经典致病突变之一引起的：M.3460G> a，M.11778G> a，或M.144484T> c。这些突变发生在编码亚基ND1，ND4或ND6的基因中，氧化磷酸化（OXPHOS）呼吸复合物I（CI）[1]。但是，并非所有携带其中一个突变之一的本性人都会发展出这种疾病，这是一种被称为不完全渗透率的现象。这种高光是其他因素参与疾病表现[2]。对携带这些突变的患者的研究主要定义了与该疾病相关的简化元素，包括生理，环境，