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World File Search SystemPBMC
现成的，完全关闭的解决方案以自动化大型...
图2。Prime-XV T细胞CDM支持量子柔性细胞扩展系统中的强大细胞扩展。用抗CD3和抗CD28珠激活人PBMC，并在200 IU/ML IL-2的存在下扩展。量子柔性细胞扩展系统中的8天扩展在95％的生存力下总共产生了6 x 10 9的细胞（a）。使用Vicell XR评估细胞计数和生存能力（锥虫蓝色排除）。 PBMC培养物同样显示出高CD62L表达和可忽略的PD-1水平，在第9（B）中通过多参数流式细胞仪分析。 结果代表了3个健康捐助者。细胞计数和生存能力（锥虫蓝色排除）。PBMC培养物同样显示出高CD62L表达和可忽略的PD-1水平，在第9（B）中通过多参数流式细胞仪分析。结果代表了3个健康捐助者。
在早期...
图1以SCRNA-SEQ为特征的EOAD中ISAG HI T细胞的扩展。（a）来自EOAD病例和认知正常对照的约182,000个PBMC的均匀歧管近似和投影（UMAP）图，并以簇身份有色。主要细胞类型在图中标记。插图（右）显示了以灰色显示的主要T细胞分组，ISAG HI T细胞群集在Magenta中显示。（b）ISAG HI T细胞丰度相对于所有PBMC（左; P = 0.005; P fdr = 0.079），所有T细胞（中间，P = 0.013）和所有CD4 T细胞（右; P = 0.016）进行定量。（c）通过性别分层，ISAG HI T细胞相对丰度在EOAD中仅在女性中显着增加，该女性表示为PBMC的百分比（左，P = 0.006），T细胞（中间，P = 0.01）和CD4 T细胞（右，P = 0.008）。（d）所有T细胞（左）的重簇生成一个T细胞亚集群（11）代表ISAG HI
使用CRISPR系统在外周血单核细胞中使用CFTR基因的ΔF508突变囊性纤维化的遗传修饰
文章类型：原始文章目标：囊性纤维化（CF）是一种遗传常染色体隐性疾病，是由囊性纤维化跨膜电导调节剂（CFTR）基因突变引起的。本研究旨在研究外周血单核细胞（PBMC）中CRISPR使用CRISPR对CFTR基因进行CF的遗传修饰。材料和方法：设计了两个单个引导RNA，以靶向CFTR基因中的序列。通过使用荧光显微镜评估绿色荧光蛋白（GFP）表达，检查了PBMC细胞的转染效率。此外，测试了SGRNA-CAS9质粒以靶向CFTR基因。通过PCR和Sanger测序方法评估并确认ΔF508基因修饰。结果：我们的结果表明使用CRISPR/CAS9系统靶向位点特异性基因的可行性。在突变基因座中使用CRISPR校正了33％的样品，并通过NCBI数据库的序列BLAST和手臂基因座外的底漆确认。crispr/cas9方法代表了修复PBMC细胞中CFTR基因突变的有效工具。结论：因此，CRISPR系统可以高效且具有特定的特异性，并为细胞和模型动物的基因工程提供了强大的方法。通常，提出的方法对人类疾病的治疗开辟了新的见解。
MACC1调节LGR5以促进结直肠癌的癌症干细胞特性
从HIV-1 + 2，乙型肝炎和丙型肝炎中分离出外周血单核细胞（PBMC）。pBMC，包括人类基因Oct3/4，Sox2，c-Myc和klf4的矢量。HIPSC线BIHI292-A源自单个菌落，并在E8培养基中保持未分化的HIPSC的典型形态（图1 a）。通过PCR确认缺乏仙台病毒载体（Suppl。图1 a）。BIHI292-A HIPSCS ECT3/4，SSEA-4，NANOG和TRA-1 - 60作为未分化HIPSC状态的典型标记，如使用免疫细胞化学所示（图1 b）。进一步的流式细胞仪证实了OCT3/4，SSEA-4，NANOG和TRA-1-60表达在超过96％的BIHI292-A HIPSC中的SSEA-4，Nanog和Tra-1-60表达中的干性标记表达（图。1 c）。g带核分型在GTG上进行（使用GIEMSA的胰蛋白酶G带）进行染色的中期染色体，并揭示了正常的雌性Karyo 46型，XX（图1 D）。 单核苷酸多态性分析表明，与患者的PBMC相比，BIHI292-A HIPSC线没有任何拷贝数变量> 2 Mb> 2 MB> 5 MB（表1）。 短串联重复（STR）分析的结果表明，BIHI292-A细胞系和患者的PBMC的遗传认同是相同的（表1）。 Sanger测序证实了两个Exon 2中的两个Trem2杂合突变C.313del（P.Ala105fs）和C.199del（p。is67fs）（图） 1 e）。 图1 D）。单核苷酸多态性分析表明，与患者的PBMC相比，BIHI292-A HIPSC线没有任何拷贝数变量> 2 Mb> 2 MB> 5 MB（表1）。短串联重复（STR）分析的结果表明，BIHI292-A细胞系和患者的PBMC的遗传认同是相同的（表1）。Sanger测序证实了两个Exon 2中的两个Trem2杂合突变C.313del（P.Ala105fs）和C.199del（p。is67fs）（图1 e）。图为了确认患者突变的存在（Buthut等，2023），在TREM2基因的外显子2中为复合杂合突变进行了BIHI292-A HIPSC的测序。通过将分化为三个细菌层的细胞进行分化，测试了多能分化势。分化测试证实，BIHI292-A HIPSC具有分化为内胚层（CD184 +，SOX17 +），Meso Dermal（CD140B +，CD144 +）和外胚层（PAX-6 +，SOX2 +）细胞的潜力（1 f）。BIHI292-A HIPSC对支原体进行了阴性测试（Suppl。1 b）。
免疫磁捕获粪便杆菌的prausnitzii有选择地修饰粪便菌群及其免疫调节型
抽象的粪便裂门代表着健康成年人人类肠道菌群中最丰富的细菌群之一，可以占细菌总人群的10％以上，这是粪便核酸杆菌prausnitzii是唯一的收获物种。人类肠道中F. prausnitzii的丰度减少与几种人类疾病有关，例如克罗恩病。在这项研究中，我们制定了一种策略，以修改粪便中的F. prausnitzii在粪便中的相对丰度，以评估其对肠道微生物群对使用外外血单核细胞（PBMC）模型的肠道微生物群对免疫调节作用的贡献。，我们使用对F. prausnitzii M21表面的多克隆抗体，使用免疫分化技术从合成和人类粪便菌群中捕获细菌。作为一项原理研究，在PBMC模型中评估了以上提到的免疫分化技术的相对丰度，具有不同的prausnitzii相对丰度的菌群（HDS）施加的免疫调节水平。为此，将PBMC与经过修改的菌群或F. prausnitzii的纯培养物共培养，然后将Crohn供体的微生物群添加到合文中。确定了细胞因子浓度，表明我们的经验模型支持该细菌的抗炎性作用。
现代奴隶制法案 - Evotec（UK）Limited
•原发性HU和啮齿动物肝细胞和细胞系； IPSC衍生的肝细胞和器官•原发性和不朽的Hu肝星状细胞•原代HU PBMC衍生的免疫细胞含有。巨噬细胞，单核细胞； Hu Kupffer细胞，小鼠BMDM；细胞系•3D HU原发性肝球体，小鼠精度切割肝切片•代谢，炎症，纤维化测定
基因组编辑 T 细胞治疗的体内模型开发
实施各种小鼠模型对于评估治疗方式的安全性、有效性以及短期和长期持久性至关重要，尤其是对于基于细胞的疗法。为了增加我们可行的人源化小鼠模型库，我们利用 Taconic 的免疫缺陷小鼠开发了两种体内模型：一种用于监测移植物抗宿主病 (GvHD)，另一种用于评估人类自然杀伤 (NK) 细胞的细胞毒性。为了开发 GvHD 模型，我们向 Taconic 的 NOD.Cg- Prkdc scid Il2rg tm1Sug / JicTac (NOG) 小鼠移植了不同剂量的人类外周血单核细胞 (PBMC)，并监测小鼠体重随时间的变化。当 NOG 小鼠同时注射人类天然 T 调节细胞 (nTregs) 和 PBMC 时，与仅移植 PBMC 的小鼠相比，我们观察到存活率延长且体重减轻较慢。此外，同时注射抗原呈递细胞 (APC) 和野生型 T 细胞的 NOG 小鼠在 3 周内就奄奄一息，而接受 APC 加 T 细胞（其中 TRAC 基因座通过 CRISPR / Cas9 编辑被敲除）的小鼠在 90 天内存活率达到 80%。为了建立 NK 细胞毒性模型，我们将原代人类 NK 细胞移植到 Taconic 的 NOG-hIL15 小鼠中，该小鼠组成性产生人类 IL-15。我们观察到 NK 细胞的成功植入和增殖，峰值植入发生在注射后 4 - 5 周，没有异种 GvHD 的迹象。利用表达荧光素酶的 K562 肿瘤细胞和 IVIS 成像，我们发现植入的原代人类 NK 细胞具有快速而强大的细胞毒活性，与非 NK 细胞植入小鼠的肿瘤存活率相比，可消除肿瘤细胞。我们的研究结果共同表明，这里开发的两种体内模型将成为支持过继细胞疗法发展的有价值的药理学模型。
人类和单细胞变化的多尺度整合揭示了自然而然的辅助疫苗，自然是辅助
图1。通过集群混合模型中人类疫苗接种反应的多模式单细胞肖像比较了随时间的疫苗接种效应。人类疫苗接种反应研究大纲；由N = 52 PBMC匹配的n = 26受试者的疫苗前和疫苗后PBMC样品的CITE-SEQ数据，包括2个响应组和两个疫苗配方。框中的数字指示用cite-seq运行的样本数。从2009年TIV +大流行H1N1流感疫苗接种的10个高反应者和10个没有辅助疫苗的疫苗接种，分别在第1天和第7天分别分别在高反应者和低反应者之间均匀分裂。6受试者在基线和接种后第1天介绍了用辅助AS03配制的大流行H5N1禽流感疫苗接种的受试者。b。显示单个群集的数据的层次结构，以激发转录组分析的多级建模方法的必要性。簇基于表面蛋白（从幼稚的B细胞簇中选择蛋白）；在每个以加权混合效应模型簇建模的群集中，由由个体，时间点和不同响应组（高和低响应者）和疫苗组（无辅助与佐剂）组成的PBMC样品的细胞表示。在c的彩色列中。 e。来自CD14单核细胞中的5个基因的5个基因的示例组的方差分数，具有基因表达（Y轴）的其他可视化，与实验因子（X Axis），解释了5个基因的最大方差。c。对于通过基于蛋白质的细胞类型汇总的780个样品和单个X时间点汇总的每个样品中的每个样品，显示了每种细胞类型中的DSB归一化蛋白表达 - 细胞类型的颜色与D相同。 d。顶部：跨单元类型，个体和时间点汇总的库中的多元模型中解释的方差部分；底部：就像在顶部面板中一样，但是在此模型中适合每个蛋白质的细胞类型，即f。顶部：MSIDDB标志性基因集的途径基于根据年龄解释的差异的基因；与年龄呈正相关的基因的子集与CD8幼稚和CD161+ T细胞簇的子集；底部：选择两种细胞类型内与年龄相关的基因。