猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种主要的经济性病原体,已经发展了各种逃避先天免疫力的策略。抗病毒干扰素的下调在很大程度上通过利用细胞质黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)来促进PRRSV免疫抗性,这是一种感受病毒RNA的受体。在这项研究中,观察到PRRSV感染中猪MDA5的下调转录和表达水平,并探索了详细的机制。我们发现,由于两个因素,p62和MDA5之间的相互作用得到了增强:上调的激酶CK2α和K63泛素化磷酸化受体p62的磷酸化修饰和由e3 Ubiquitinase Trim21催化的猪MDA5催化的猪MDA5的K63泛素化。由于这些修改,触发了经典的p62介导的自噬。此外,猪MDA5与含有TCP1亚基2(CCT2)的伴侣蛋白相互作用,该伴侣通过PRRSV NSP3增强。这种相互作用促进了独立于泛素化的MDA5-CCT2-NSP3的骨料形成和自噬清除率。总而言之,通过两种自噬途径在PRRSV感染中发生了增强的MDA5降解:MDA5与自噬受体p62和凝集受体CCT2的结合,导致强烈的先天免疫抑制。这项研究揭示了PRRSV感染中免疫逃避的一种新型机制,并为开发新疫苗或治疗策略提供了基本见解。
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)已困扰养猪业 30 多年,造成了巨大的经济损失。目前,市场上有各种不同的商业疫苗,但治疗手段有限。到目前为止,至少有六种潜在的宿主因子被确定为 PRRSV 感染的关键受体。其中,CD163 分子是 PRRSV 生命周期中最重要和最关键的分子,负责介导病毒脱壳和基因组释放。它决定了靶细胞对病毒的敏感性。研究表明,在猪 CD163 蛋白表达的情况下,几种 PRRSV 非允许细胞(如 PK-15、3D4/21 和 BHK-21)对 PRRSV 感染完全敏感。因此,CD163 已成为设计新型抗病毒分子(破坏 CD163 与病毒糖蛋白之间的相互作用)或培育抗 PRRSV 感染的基因改造动物的靶标。本综述全面总结了近年来针对CD163受体抑制PRRSV复制的研究进展,并讨论了在病毒生命周期脱壳过程中是否还有其他潜在分子与CD163相互作用。
猪生殖和呼吸综合征(PRR)由PRRS病毒(PRRSV)引起的是一种重要疾病,严重影响猪工业,因此需要快速而准确的诊断来控制其控制。尽管在开发诊断工具方面取得了进展,包括聚合酶链反应(PCR)的方法,例如逆转录定量PCR(RT-QPCR)诊断PRRSV感染,但由于其高遗传变异性,其在遗传水平上的诊断却是具有挑战性的。然而,RT-QPCR是诊断PRRSV的最简单,最快的方法。因此,本研究旨在通过涵盖所有公开使用的PRRSV序列来开发RT-QPCR测定,以快速准确地诊断PRRSV。使用高度特异性引物和探针的开发测定最多可检测10份PRRSV -1和-2亚型的副本。此外,对开发测定的性能与韩国广泛使用的商业试剂盒的性能进行了比较,证明了开发测定法在检测现场样品中PRRSV感染时的效率更高。在PRRSV-1检测中,开发的测定法显示了ORF5测序结果的诊断一致性为97.7%,而对于商业试剂盒,它显示了95.3%和72.1%的一致性。对于PRRSV-2,开发的测定法显示了97.7%的诊断协议,而商业套件的诊断协议显示93%和90.7%的协议。总而言之,我们开发了一种比经过测试的商业试剂盒的测定法,这将显着促进全球PRRSV控制。
参考文献1。Nieuwenhuis等人,2012年,《九个母猪牛群中猪生殖和呼吸综合征病毒爆发的经济分析》。VET REC 170:225 2。 progressis通知(SPC)(国家)3。 Reynaud等人,在受污染的环境中使用灭活的PRRS疫苗的镀金和母猪接种疫苗接种的动物效应。 IPVS 2000:601 4。 Joisel等人,PRRS:带有疫苗接种疫苗的疫苗接种。 Pig Journal 2001,48:120-137 5。 Lopez and Osorio,2004年,中和抗体在PRRSV保护免疫中的作用,兽医免疫疾病102:155-163 6。 Kim等人,在韩国农场中疫苗接种EU型PRRS疫苗后的ELISA抗体反应。 APVS 2015:83 b。 Kim等人,SOW中的血清中和(SN)抗体反应,并在韩国农场的eu型PRRS疫苗中播种后转移到小猪中。 APVS 2015:84 7。 Juillard等人,带有不同PRRSV菌株的离体刺激,用于细胞介导的疫苗接种猪的免疫力监测。 ISERPD 2007:144 8。 diaz等,2013年,比较不同的疫苗接种时间表,以维持针对猪生殖和呼吸综合征病毒的免疫反应。 VET Journal 197:438-444 9。 Meyns等人,PRRSV疫苗接种的未来:通过灭活的疫苗提升,以利用先前存在的免疫力,对更强大的保护的创新。 proc。 国际PRRSV大会根特2015:103 10。 Delany等人,2014年,21世纪的疫苗。 IPVS 2014:565VET REC 170:225 2。progressis通知(SPC)(国家)3。Reynaud等人,在受污染的环境中使用灭活的PRRS疫苗的镀金和母猪接种疫苗接种的动物效应。IPVS 2000:601 4。 Joisel等人,PRRS:带有疫苗接种疫苗的疫苗接种。 Pig Journal 2001,48:120-137 5。 Lopez and Osorio,2004年,中和抗体在PRRSV保护免疫中的作用,兽医免疫疾病102:155-163 6。 Kim等人,在韩国农场中疫苗接种EU型PRRS疫苗后的ELISA抗体反应。 APVS 2015:83 b。 Kim等人,SOW中的血清中和(SN)抗体反应,并在韩国农场的eu型PRRS疫苗中播种后转移到小猪中。 APVS 2015:84 7。 Juillard等人,带有不同PRRSV菌株的离体刺激,用于细胞介导的疫苗接种猪的免疫力监测。 ISERPD 2007:144 8。 diaz等,2013年,比较不同的疫苗接种时间表,以维持针对猪生殖和呼吸综合征病毒的免疫反应。 VET Journal 197:438-444 9。 Meyns等人,PRRSV疫苗接种的未来:通过灭活的疫苗提升,以利用先前存在的免疫力,对更强大的保护的创新。 proc。 国际PRRSV大会根特2015:103 10。 Delany等人,2014年,21世纪的疫苗。 IPVS 2014:565IPVS 2000:601 4。Joisel等人,PRRS:带有疫苗接种疫苗的疫苗接种。Pig Journal 2001,48:120-137 5。Lopez and Osorio,2004年,中和抗体在PRRSV保护免疫中的作用,兽医免疫疾病102:155-163 6。 Kim等人,在韩国农场中疫苗接种EU型PRRS疫苗后的ELISA抗体反应。APVS 2015:83 b。 Kim等人,SOW中的血清中和(SN)抗体反应,并在韩国农场的eu型PRRS疫苗中播种后转移到小猪中。 APVS 2015:84 7。 Juillard等人,带有不同PRRSV菌株的离体刺激,用于细胞介导的疫苗接种猪的免疫力监测。 ISERPD 2007:144 8。 diaz等,2013年,比较不同的疫苗接种时间表,以维持针对猪生殖和呼吸综合征病毒的免疫反应。 VET Journal 197:438-444 9。 Meyns等人,PRRSV疫苗接种的未来:通过灭活的疫苗提升,以利用先前存在的免疫力,对更强大的保护的创新。 proc。 国际PRRSV大会根特2015:103 10。 Delany等人,2014年,21世纪的疫苗。 IPVS 2014:565APVS 2015:83 b。 Kim等人,SOW中的血清中和(SN)抗体反应,并在韩国农场的eu型PRRS疫苗中播种后转移到小猪中。APVS 2015:84 7。Juillard等人,带有不同PRRSV菌株的离体刺激,用于细胞介导的疫苗接种猪的免疫力监测。ISERPD 2007:144 8。 diaz等,2013年,比较不同的疫苗接种时间表,以维持针对猪生殖和呼吸综合征病毒的免疫反应。 VET Journal 197:438-444 9。 Meyns等人,PRRSV疫苗接种的未来:通过灭活的疫苗提升,以利用先前存在的免疫力,对更强大的保护的创新。 proc。 国际PRRSV大会根特2015:103 10。 Delany等人,2014年,21世纪的疫苗。 IPVS 2014:565ISERPD 2007:144 8。diaz等,2013年,比较不同的疫苗接种时间表,以维持针对猪生殖和呼吸综合征病毒的免疫反应。VET Journal 197:438-444 9。Meyns等人,PRRSV疫苗接种的未来:通过灭活的疫苗提升,以利用先前存在的免疫力,对更强大的保护的创新。proc。国际PRRSV大会根特2015:103 10。Delany等人,2014年,21世纪的疫苗。IPVS 2014:565IPVS 2014:565Embo Mol Med,6(6):708–720 11。lu,2009年,异源原始促进疫苗接种。Curr Opin Immunol 21(3):346–351 12。Nolz和Harty,2011年,促进疫苗接种的策略和影响,以产生记忆CD8 T细胞。Adv Exp Med Biol 780:69-83 13。Knockaert等人,在PRRSV感染的农场妊娠结束时进行进展后的生殖性能改善了。ESPHM 2015:PO84 14。 Willems等人,在繁殖者中实施混合PRRSV疫苗计划后,苗圃和增生单元中PRRSV循环的稳定。 ESPHM 2015:PO 74 15。 Willems,PRRSV疫苗接种计划的有益影响,该计划结合了经过改良的实时疫苗和ProgressISR对病毒循环和技术性能的影响。 IPVS 2016:PO-PW1-147 16 Spaans等人,双技术效应的效应Prim Boost Boost在SOWS中的疫苗接种在pRRSV后prrsv中的循环中的疫苗接种。 IPVS 2016:PO-PW1-182 17。 defoort等人,在妊娠结束时使用ProgressISR的疫苗接种程序在农场中稳定PRRSV循环。ESPHM 2015:PO84 14。Willems等人,在繁殖者中实施混合PRRSV疫苗计划后,苗圃和增生单元中PRRSV循环的稳定。ESPHM 2015:PO 74 15。 Willems,PRRSV疫苗接种计划的有益影响,该计划结合了经过改良的实时疫苗和ProgressISR对病毒循环和技术性能的影响。 IPVS 2016:PO-PW1-147 16 Spaans等人,双技术效应的效应Prim Boost Boost在SOWS中的疫苗接种在pRRSV后prrsv中的循环中的疫苗接种。 IPVS 2016:PO-PW1-182 17。 defoort等人,在妊娠结束时使用ProgressISR的疫苗接种程序在农场中稳定PRRSV循环。ESPHM 2015:PO 74 15。Willems,PRRSV疫苗接种计划的有益影响,该计划结合了经过改良的实时疫苗和ProgressISR对病毒循环和技术性能的影响。IPVS 2016:PO-PW1-147 16 Spaans等人,双技术效应的效应Prim Boost Boost在SOWS中的疫苗接种在pRRSV后prrsv中的循环中的疫苗接种。 IPVS 2016:PO-PW1-182 17。 defoort等人,在妊娠结束时使用ProgressISR的疫苗接种程序在农场中稳定PRRSV循环。IPVS 2016:PO-PW1-147 16 Spaans等人,双技术效应的效应Prim Boost Boost在SOWS中的疫苗接种在pRRSV后prrsv中的循环中的疫苗接种。IPVS 2016:PO-PW1-182 17。 defoort等人,在妊娠结束时使用ProgressISR的疫苗接种程序在农场中稳定PRRSV循环。IPVS 2016:PO-PW1-182 17。defoort等人,在妊娠结束时使用ProgressISR的疫苗接种程序在农场中稳定PRRSV循环。
猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS) 是最重要的猪病之一,造成全球巨大的经济损失。病原体 PRRS 病毒 (PRRSV) 是一种有包膜的单链正义 RNA 病毒,与马动脉炎病毒 (EAV)、小鼠乳酸脱氢酶升高病毒 (LDV) 和猿猴出血热病毒 (SHFV) 一起被归类为动脉炎病毒科、动脉炎病毒属、Variarterivirinae 亚科。其基因组长度约为 15 kb,包含至少 11 个开放阅读框 (ORF),具有 5' 帽和 3' 多聚腺苷酸尾 (1-3)。约占基因组三分之二的ORF1a和ORF1b编码非结构蛋白(nsp1~12),具有蛋白酶、复制酶和调控宿主细胞基因表达等功能,负责病毒RNA的合成( 4 )。基因组3’末端的ORF2~7编码结构蛋白,包括糖蛋白2(GP2)、GP3、GP4、GP5、包膜蛋白(E)、基质蛋白(M)、核衣壳蛋白(N),由一系列亚基因组RNA表达( 5 )。由于PRRSV RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)缺乏校对能力,病毒基因组极易发生突变和重组,导致世界范围内出现新的PRRSV分离株( 6 )。目前,PRRSV 可分为两个种:PRRSV-1(欧洲基因型,Betaarterivirus suid 1)和 PRRSV-2(北美基因型,Betaarterivirus suid 2)。两个种均表现出很高的遗传多样性,核苷酸序列同一性约为 60%,每个种可进一步分为多个分支、亚株或谱系。在中国,优势毒株为 PRRSV-2,其高致病性变异株的爆发引起养猪业的担忧(7)。PRRSV 感染可导致母猪严重繁殖障碍,并使各年龄段的猪患上呼吸道疾病,并常导致继发性细菌感染(如副猪嗜血杆菌和猪链球菌),临床表现更严重,死亡率更高(8)。
摘要:由PRRS病毒(PRRSV)引起的猪繁殖和呼吸综合征(PRR)是最经济上重要的疾病之一,由于它在1980年代后期在美国已被第一次认可,因此对全球猪肉行业产生了重大影响。归因于PRRSV广泛的遗传和抗原变异以及快速的可突变性和进化,几乎全球流行病已经通过一组新兴和重新出现的病毒菌株所维持。由于第一个修饰的活病毒(MLV)疫苗已市售,因此已广泛使用了20多年,用于预防和控制PRR。一方面,MLV可以通过减轻猪的临床迹象并减少受影响群中的病毒传播,从而诱导针对同源病毒的保护性免疫反应,并有助于提高受异型病毒影响的猪农场的生产性能。另一方面,MLV仍然可以在宿主中复制,诱导病毒率和病毒脱落,并且无法赋予免疫免受PRRSV感染的灭菌性,从而可以加速病毒突变或重新组合以适应宿主并逃避免疫反应,从而促进逆转毒气的风险。MLV的无调异源交叉保护和安全问题是两个有争议的特征,这引起了人们的担忧,即使用这种泄漏的疫苗来保护具有高可能性的可能性。在这里审查了与MLV相关的免疫保护和安全性,有关PRRSV衰减,保护效率,免疫抑制,重新组合和恢复毒力的最新进展和意见,希望对MLV进行更全面的认识,并为了激励新的策略,在这里进行了更全面的认识,以更全面地认识到了新的策略。
本研究评估了用基于抗独特型抗体(功能上模拟酵母杀伤毒素)的工程杀伤肽 (KP) 处理的猪免疫细胞的表型和细胞因子分泌的早期调节。使用猪生殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 和猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 作为体外抗原研究了 KP 对特异性免疫的影响。用 KP 和杂乱肽刺激健康猪的外周血单核细胞 (PBMC) 20 分钟、1、4 和 20 小时或保持不刺激。使用流式细胞术和 ELISA 分析细胞。使用相同的时间段进行 KP 预孵育/共孵育,以使用 ELISPOT 确定对病毒回忆干扰素-γ (IFN- γ ) 分泌细胞 (SC) 频率和单细胞 IFN- γ 生产力的影响。KP 诱导早期剂量依赖性转变至促炎性 CD172 α + CD14 +high 单核细胞和增加 CD3 + CD16 + 自然杀伤 (NK) T 细胞。KP 触发经典 CD4 − CD8 αβ + 细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 和双阳性 (DP) CD4 + CD8 α + Th 记忆细胞 (CD4 + CD8 α +low CD8 β +low) 上的 CD8 α 和 CD8 β 表达。一部分 DP 细胞也表达高水平的 CD8 α 。已鉴定的两种 DP CD4 + CD8 α +高 CD8 β +低/+高 CTL 亚群与肿瘤坏死因子 α (TNF- α ) 和 IFN- γ 分泌有关。KP 显著增强了 PRRSV 1 型和 PCV2b 特异性 IFN- γ SC 的反应性和交叉反应性。结果表明 KP 在刺激 Th1 偏向免疫调节方面有效,并支持将 KP 作为免疫调节剂或疫苗佐剂进行研究。
1994 年,Jay 接受了位于内布拉斯加州林肯市的 SmithKline Beecham Animal Health (SBAH) 的研究职位。一年后,辉瑞收购了 SBAH。2012 年,辉瑞剥离其动物保健部门,成立了 Zoetis,他至今仍在卡拉马祖担任研究主管。Jay 于 1994 年开始研究 PRRS,从未停止。20 世纪 90 年代末,他确定了 PRRSV-2 病毒的第一个全长序列之一,并于 1998 年完成了第一个全长 cDNA PRRSV-2 感染性克隆。GFP 表达版本,昵称 Kermit,是他将 CD163 描述为 PRRSV 的重要受体的关键。“Kermit”和其他试剂在整个 PRRS 研究界的分布加速了几项重要发现。
最近的一项进展是能够将动物胚胎中的单个基因从一种自然发生的多态性编辑为另一种。目前的研究兴趣是使用这种技术引入已知可赋予对特定疾病抵抗力的变异,而目前的品种种群几乎没有或根本没有天然抵抗力,也没有有效的预防和治疗策略。正在研究的两种特定疾病是猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSv) 和非洲猪瘟病毒 (ASFv)。这两种疾病都是动物健康和福利的主要问题,因为它们会导致高发病率和高死亡率。该技术还被研究作为一种可能改善福利的手段,例如通过消除对牛去角或对猪阉割的需要。它也可能提供一种纠正濒危种群遗传疾病的方法,但重要的是资助更多示范项目以证明其在应对这些重要挑战方面的有效性。
猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS) 给养猪场造成巨大的经济损失,给全世界的社会带来经济损失。接种 PRRS 病毒 (PRRSV) 疫苗是受影响农场的常见干预措施。本研究旨在评估潜在的新型 PRRS 疫苗在动物、畜群和国家层面的经济影响和盈利能力,这些疫苗的效力有所提高。模拟了两种疫苗接种策略:(i) 仅对母猪进行大规模疫苗接种 (MS) 和 (ii) 对母猪和仔猪进行大规模疫苗接种 (MSP),包括疫苗有效性、疫苗价格和疫苗接种覆盖率的不同方案。以德国一个养猪密集地区拥有 1,000 头母猪的从分娩到育肥的农场为例。财务收益是从毛利率分析中获得的,定义为未接种疫苗(基线)和接种疫苗(干预)的 PRRSV 感染农场之间的毛利率差异。如果母猪和仔猪都接种疫苗(MSP),经济效益最高。在这些情况下,每头工作母猪的年净效益中位数在 e 170 到 e 340 之间。如果只对母猪接种疫苗(MS),估计疫苗接种带来的效益在 e 148 到 e 270 之间。估计国家层面效益的决定性变量是从现有疫苗转向保护性更强的疫苗的农民数量、采用新疫苗的以前未接种疫苗的牛群数量以及新疫苗相对于已有疫苗的有效性。当以前未接种疫苗的牛群采用新疫苗时,效益最大。分析表明,在所有模拟情景中,接种 PRRS 疫苗都是有益的。疫苗接种带来的效益大小更容易受到疫苗有效性变化的影响,而不是疫苗价格变化的影响。这项研究为支持未来的疫苗开发提供了证据。估计表明,引入更有效的疫苗可能会带来巨大的经济效益,具有社会经济重要性,而且新疫苗可能对减轻疾病负担做出重大贡献。