摘要:传统上,螺原体仅从花和其他植物部位的表面、各种昆虫的内脏和血淋巴以及维管植物的液体(韧皮部汁液)和以这些液体为食的昆虫中分离出来。在本文中,我们报告了在虾中发现的第一种致病螺原体,以及通过组织学评估、原位杂交测定、透射电子显微镜、16S rRNA 序列同源性和注射感染性研究对其进行表征的结果。此外,还介绍了为检测这种微生物而开发的分子方法,该微生物被确定为哥伦比亚养殖的南美白对虾的病原体,导致其死亡率很高。使用标准组织学方法和原位杂交测定,证实南美白对虾感染了这种致病螺原体。组织学分析显示受影响器官/组织出现全身性炎症反应。为了鉴定细菌,使用来自初始流行区的冷冻感染南美白对虾样本对 16S rRNA 基因进行测序并开发分子检测方法。通过 PCR 扩增 16S rRNA 基因,然后进行测序。使用 GenBank BLAST 搜索分析序列数据,结果显示与柑橘树病原体柑橘螺原体有 98% 的同源性。对 16S rRNA 序列数据进行评估以开发针对假定螺原体的独特 PCR 引物。使用针对螺原体属的螺旋素基因开发的 PCR 引物,开发并测试了地高辛标记的探针。该探针是物种特异性的,与以此形式测试的其他细菌样本没有发生阳性反应或交叉反应。
摘要:开发了评估黑虎虾(Penaeus monodon)免疫刺激剂功效的新方法。试验虾饲喂 2% 或 4% 酵母提取物 (YE) 涂层饲料,而对照组饲喂无涂层饲料。喂养 4 周后,对单只虾进行总血细胞计数 (THC)、颗粒血细胞 (GH) 数量和细菌清除率评估。对于血细胞计数,在室温下用 50% 乙醇中的 1.2% 玫瑰红对福尔马林固定的血淋巴染色 20 分钟。一部分混合物用血细胞计数器进行 THC 计数,一部分涂在显微镜载玻片上晾干,然后用苏木精复染进行 GH 计数。通过这种技术,可以获得高质量的涂片以进行准确的分类计数。细菌清除试验用于评估体液和细胞防御机制的总体效果。每只虾肌肉注射 1 × 10 8 个哈维氏弧菌,注射后 0、15、30 和 60 分钟收集抗凝血淋巴,在 TCBS 琼脂上进行四次滴数计数(20 µl)。饲喂 4% YE 的虾的总血细胞计数显著高于(p < 0.05)饲喂无涂层饲料的虾。饲喂 YE 的虾的颗粒细胞百分比和细菌清除率高于饲喂对照饲料的虾。这两种方法可以简单快速地比较虾组抗菌防御能力的差异。
耕种的淡水虾(Macrobrachium Rosenbergii)和黑老虎虾(Penaeus Monodon)构成了孟加拉国海鲜出口的很大一部分,从而引起了人们对环境影响的担忧。淡水虾农场需要相对较高的饲料供应量,释放1.0吨Co 2-均等年/年,相当于18.8千克CO 2 E/MT虾,对全球变暖和气候变化的风险做出了重大贡献。综合多营养养殖(IMTA)为传统的大虾养殖系统提供了另一种耕作方法,因为它可以最大程度地减少温室气体(GHG)排放和气候变化的影响。系统地回顾了关于IMTA的112篇科学文章,本文提出了采用IMTA来推广孟加拉国可持续淡水虾种植的建议。imta正在世界许多地方进行广泛的实验和实践,提供经济利益,社会可接受性和环境可持续性。除了本地虾类外,还有各种土著有机提取的淡水软体动物和无机的提取植物可用,可以无缝地用于量身定制IMTA系统。提取生物,包括虾农场内的水上软体动物和植物,可以有效地捕获蓝碳,从而有效降低温室气体排放并帮助减轻气候变化的影响。水生软体动物为鱼类和牲畜提供饲料,而水生植物则是双食物来源,并为农田的堆肥生产做出了贡献。对孟加拉国的IMTA的研究主要是在淡水池塘中的鳍鱼进行的,而虾农场的IMTA缺乏研究。这需要在大虾农民一级进行研究,以了解孟加拉国西南部虾产生地区的提取水生软体动物和植物的生产。
摘要:传染性皮下和造血组织坏死病毒(IHHNV)在泰国养殖的斑节对虾和南美白对虾中广泛存在。它会导致南美白对虾出现身体异常和生长迟缓的矮小畸形综合征,但不会导致斑节对虾出现明显的疾病。在这两个物种中,该病毒可能会在外胚层和中胚层组织中产生 Cowdry A 型内含物,但这些在南美白对虾中很常见,而在斑节对虾中很少见。使用 IHHNV 特异性 PCR 引物可以更容易地在这两个物种中检测到该病毒。通过使用特异性 IHHNV 探针进行原位杂交(ISH),与心肌细胞相关的固定吞噬细胞在这两个虾种中往往表现出强烈的阳性反应。仅凡纳滨对虾的卵巢和神经组织(神经节中的神经元和神经索中的神经胶质细胞)对 IHHNV 呈 ISH 阳性。通过透射电子显微镜检查,在 IHHNV 感染的凡纳滨对虾的鳃中发现了坏死细胞,而在 IHHNV 感染的斑节对虾的淋巴器官中发现了病毒体的准晶状阵列和凋亡细胞而不是坏死细胞。因此,斑节对虾的细胞凋亡可能是 IHHNV 临床疾病缺失的原因之一。这些结果揭示了这两种虾对 IHHNV 感染的不同反应。斑节对虾 IHHNV 感染的一个奇怪特点是,通过 ISH 和实时 PCR 检测到的不同样本组织之间的比较病毒载量不一致。这种明显的组织偏好的不一致以及两种虾类之间不同细胞反应的原因仍然无法解释。
虾养殖目前是一个巨大的挑战,因为意外的疾病和商业饲料的价格上涨。基于发酵米麸的替代商业饲料的替代,对黑虎虾(Penaeus Monodon)的生长,免疫和存活率的替代,进行了这项研究,以评估水生蛋白培养技术的影响。水上培养池在路堤中使用高密度的聚乙烯衬里设计,以防止土壤侵蚀,并带有吸入泵的中央坑,以消除累积的培养物质,而传统的现有现有池塘则按照标准方法制备。液体发酵米麸(LFRB)在库存前用来生产食物。虾在三种处理中生长90天:T 0(对照):传统池塘中的100%商业饲料(CF),T 1:90%CF + 10%LFRB或T 2:70%CF + 30%LFRB在Aquamimicry Pond中,密度为10 PL/M 2。lfrb是通过在连续曝气下用枯草芽孢杆菌发酵24小时的24小时来制备的。在T 2(0.47 g天-1)中,虾的平均生长速率显着高于t 1(0.34 g天-1)或t 0(0.05 g天-1)。治疗中虾的存活率t 2(55±12%)和t 1(45±8%)高于治疗t 0。此外,基于从控制池中从水和虾的水和肝肝脏获得的细菌菌落形态,鉴定出了导致P. monodon早期死亡率综合征的致病菌株的弧菌。T 2处理中的虾具有更健康的肝癌,总血细胞计数明显高于T 0(2.5×10 3细胞ML -1)和T 1(2.5×10 3细胞ML-- 1))。这项研究表明,绿色老虎虾的生长,免疫力和生存率可以确保水生培养技术的更好,而70%CF + 30%LFRB(即T 2)表现出最佳性能。