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CRISPR屏幕在IPSC衍生的神经元中揭示了tau proteostasis
。cc-by-nc-nd 4.0国际许可证（未经同行评审证明）获得的是作者/资助者，他授予Biorxiv授予Biorxiv的许可，以永久显示预印本。它是制作
人类诱导的多能球体的生长是由3D水凝胶环境的粘弹性特性和宏观结构驱动的
摘要：干细胞，尤其是人IPSC，构成了组织工程的强大工具，尤其是通过球形和器官模型。很好地描述了干细胞对其直接微环境的粘弹性特性的敏感性，但干细胞分化仍然取决于生化因素。我们的目的是研究HIPSC球体直接环境在命运中的粘弹性特性的作用。为了确保仅由机械相互作用驱动细胞生长，可在无分化因子培养基中使用具有显着不同粘弹性特性的可生物固定藻酸盐 - 凝集素水凝胶。开发了不同浓度的藻酸盐 - 凝集素水凝胶，以提供具有显着不同机械性能的3D环境，范围从1到100 kPa，同时允许可打印。通过聚集（= 100 µm，n> 1×10 4）制备来自两个不同细胞系的HIPSC球体，在不同的水凝胶中包括并培养14天。虽然密集水凝胶中的球体表现出有限的生长，而不论配方如何，但用液态液乳液法制备的多孔水凝胶显示出球体形态的显着变化和随着水凝胶机械性能的函数的显着变化。横向培养物（相邻球体含有藻酸盐 - 凝集素水凝胶）清楚地确定了每个水凝胶环境对hipsc球体行为的单独影响。这项研究是第一个证明机械调制的微环境会导致不同的HIPSC球体行为而不会影响其他因素。它允许人们设想多个公式的组合来创建一个复杂的对象，其中HIPSC的命运将由其直接微环境独立控制。
人类多能干细胞中的复发遗传异常：靶向液滴数字PCR中培养上清液中的定义和常规检测
人多能干细胞（HPSC）的基因组完整性对于研究和临床应用至关重要。然而，在HPSC产生和常规培养物以及基因编辑后，遗传差异可能会积累。应定期监测它们的发生，但是评估HPSC基因组完整性的当前测定法不完全适合这种常规筛查。为了解决这个问题，我们首先对100多个出版物和鉴定的738例复发遗传异常（即至少在至少有5个不同的不同科学出版物中发现的重叠异常重叠）进行了大规模荟萃分析。然后，我们基于液滴数字PCR技术开发了一项测试，该测试可能可能检测到从培养上清液样品中提取的DNA中，这些HPSC复发遗传异常的90％以上。该测试可用于常规筛选HPSC中的基因组完整性。
CD34+ CD43+造血祖细胞的产生诱导人类多能干细胞的胸腺细胞
摘要：近年来，使用原代T细胞的免疫疗法在某些病理中彻底改变了医疗护理，但是与挑战性细胞基因组版，不足的细胞数量产生，仅使用自体细胞以及缺乏产品标准化有关的局限性限制了其临床使用。通过提供可自我更新的T细胞来源，可以从人类多能干细胞（HPSC）从人多能干细胞（HPSC）产生的T细胞提供巨大的优势，这些源可以很容易地在遗传上进行修饰并促进使用标准化通用的普遍存在的非现成的同种细胞产物和快速临床访问。尽管有潜力，但在进入临床环境之前，必须更好地理解与HPSC区分的T细胞的可行性和功能。在这项研究中，我们从T细胞（T-IPSC）产生了人类诱导的多能干细胞，从而保留已经重新组合的TCR，具有与人类胚胎干细胞（HESC）相同的特性。基于这些细胞，我们通过高效率，造血祖细胞（HPSC）分化了能够自我更新和分化为任何细胞血型的能力，除了DN3A胸腺祖细胞与几个T-IPSC线外。为了更好地理解分化，我们分析了不同细胞类型的转录组亲纤维，并证明与HIPSC分化的HPSC具有与脐带血造血干细胞（HSC）非常相似的pro纤维（HSC）。此外，分化的T细胞祖细胞在胸腺淋巴细胞的DN3A阶段具有类似的胸腺细胞。因此，利用这种方法，我们能够再生治疗性人类T细胞的前体，以便可能治疗多种疾病。
利用 CRISPR/Cas9 技术生成和鉴定转基因人类多能干细胞的流程
由于其无限的增殖潜力、整倍体状态以及向任何细胞类型分化的能力，人类多能干细胞 (hPSC)（无论是胚胎细胞还是诱导细胞）在疾病建模和生产临床应用细胞方面具有巨大潜力 [ 1 – 3 ]。尽管已经建立了来自患有各种疾病的患者的许多 hPSC 系，但是针对某些病理或罕见基因突变生成 hPSC 系仍然具有挑战性。此外，个体间的遗传异质性可能导致生物学变异，从而使系间比较困难，尤其是来自健康对照和患者的 hPSC 之间的比较 [ 4 , 5 ]。对 hPSC 进行遗传操作的能力为我们引入、修改或校正突变以及生成遗传匹配的同基因对照系提供了机会，从而建立明确的基因型-表型关联 [ 6 , 7 ]。近年来，基于位点特异性核酸酶（包括锌指核酸酶 (ZFN)、转录激活因子样效应核酸酶 (TALEN)，尤其是成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 系统）的技术已使 hPSC 的基因组工程变得十分灵活 [8,9]。然而，由于 hPSC 的固有特性，包括相对较差的转染效率和转染后存活率低、难以分离克隆群、优先选择和扩增非整倍体克隆以及自发细胞分化，hPSC 工程仍然具有挑战性。为了缓解这些问题，已经描述了几种用于产生各种不同诱变事件的方案 [10-14]。尽管人们投入了大量精力来改进产生转基因 hPSC 的方法程序，但只有少数研究
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使用患者衍生的多能干细胞
Yuanyuan Qin 1* , Parth Chhetri 1* , Elizabeth Theusch 1* , Grace Lim 1 , Sheila Teker 1 , Yu-Lin Kuang 1 , Shahrbanoo Keshavarz Aziziraftar 2 , Mohammad Hossein Mehraban 2 , Antonio Munoz-Howell 1 , Varun Saxena 3 , Dounia Le Guillou 4 , Aras N. Mattis 2,5,6，Jacquelyn J. Maher 4,5，Marisa W. Merisa W. 1,5,7 1加利福尼亚大学旧金山分校儿科学系2加利福尼亚州旧金山3 Kaiser Southerente Southerente Southerente South San Francisco San San Francisco Uncilent of California San San Francisco 5 Ucsf live of Cactornia of Cactornia Medicine and Stem Cell Research, University of California San Francisco 7 Institute of Human Genetics, University of California, San Francisco *Contributed equally Corresponding Author : Marisa Medina 5700 Martin Luther King Jr. Way Oakland, CA 94609 Marisa.medina@ucsf.edu Keywords : Functional lipid assessment, MASLD cohorts, precision medicine, individual susceptibility, patient-derived IPSC，MASLD预防策略电子单词计数：2000个数字和表数：2利益冲突陈述：ANM是Biomarin Pharmaceuticals，Pliant Therapeutics，Regeneron Pharmaceuticals和Hepatx的顾问。财政支持声明：这项工作得到了CIRM DISC2-12358（MWM，ANM），NIH R01 DK130391（MWM，ANM），NIH R01 DK132129（ANM），ANM），以及由Sandler Fundation的部分资金，由Sandler Fundation（MANM）（MMWMWM）（MMWMWM）资助。通过CIRM IT1-06563（JJM），R21DK118380（JJM）和UCSF肝脏中心P30 DK026743提供了。。作者贡献概念化 - MWM方法论 - AMH，VS验证 - GL正式分析 - MWM，YQ，GL，ET调查 - YQ，PC，PC，GL，ST，ST，YK Resources - SKA，MHM，MHM，DLG，ANM，ANM，JJM，JJM
临床特征和诱导多能干细胞（IPSC）疾病模型的Harel-Yoon综合征模型由复合杂合ATAD3A变体引起
ATPase家族AAA含有域的蛋白3a（ATAD3A）富含线粒体膜，对于维持线粒体结构和功能至关重要。 ATAD3A基因的变体可以导致Harel Yoon综合征（Hayos），这是神经，心血管和其他系统的发育缺陷。 这项研究旨在从患者的体细胞（Zjuchyli001-A）和阴性对照（Zjuchyli002-A）中开发出诱导的多能干细胞（IPSC），作为对ATAD3A变异疾病的病因的进一步研究的有效工具。 我们描述并分析了Proband及其家人的临床表现。 从概率和阴性对照中收集并将其重新编程为IPSC。 此外，我们测量了IPSC中的ATAD3A表达水平，以确认这些细胞系的有效性。 Proband和她的姐姐都病重病，并有复合杂合的ATAD3A变体（F459S/T498NF*13）。 他们的父母是这些变体的载体，没有任何临床表现。 两个变体都位于ATAD3A蛋白的ATPase结构域上。 细胞系Zjuchyli001-A和Zjuchyli002-A呈现多能干细胞的典型特征。 与Zjuchyli002-A相比，Zjuchyli001-A的ATAD3A表达水平显着降低。 这项研究从ATAD3A的复合杂合变体的患者中产生了IPSC，并且是负面对照，作为阐明ATAD3A变体相关疾病的分子机制的有价值工具。ATPase家族AAA含有域的蛋白3a（ATAD3A）富含线粒体膜，对于维持线粒体结构和功能至关重要。ATAD3A基因的变体可以导致Harel Yoon综合征（Hayos），这是神经，心血管和其他系统的发育缺陷。 这项研究旨在从患者的体细胞（Zjuchyli001-A）和阴性对照（Zjuchyli002-A）中开发出诱导的多能干细胞（IPSC），作为对ATAD3A变异疾病的病因的进一步研究的有效工具。 我们描述并分析了Proband及其家人的临床表现。 从概率和阴性对照中收集并将其重新编程为IPSC。 此外，我们测量了IPSC中的ATAD3A表达水平，以确认这些细胞系的有效性。 Proband和她的姐姐都病重病，并有复合杂合的ATAD3A变体（F459S/T498NF*13）。 他们的父母是这些变体的载体，没有任何临床表现。 两个变体都位于ATAD3A蛋白的ATPase结构域上。 细胞系Zjuchyli001-A和Zjuchyli002-A呈现多能干细胞的典型特征。 与Zjuchyli002-A相比，Zjuchyli001-A的ATAD3A表达水平显着降低。 这项研究从ATAD3A的复合杂合变体的患者中产生了IPSC，并且是负面对照，作为阐明ATAD3A变体相关疾病的分子机制的有价值工具。ATAD3A基因的变体可以导致Harel Yoon综合征（Hayos），这是神经，心血管和其他系统的发育缺陷。这项研究旨在从患者的体细胞（Zjuchyli001-A）和阴性对照（Zjuchyli002-A）中开发出诱导的多能干细胞（IPSC），作为对ATAD3A变异疾病的病因的进一步研究的有效工具。我们描述并分析了Proband及其家人的临床表现。从概率和阴性对照中收集并将其重新编程为IPSC。此外，我们测量了IPSC中的ATAD3A表达水平，以确认这些细胞系的有效性。Proband和她的姐姐都病重病，并有复合杂合的ATAD3A变体（F459S/T498NF*13）。他们的父母是这些变体的载体，没有任何临床表现。两个变体都位于ATAD3A蛋白的ATPase结构域上。细胞系Zjuchyli001-A和Zjuchyli002-A呈现多能干细胞的典型特征。与Zjuchyli002-A相比，Zjuchyli001-A的ATAD3A表达水平显着降低。这项研究从ATAD3A的复合杂合变体的患者中产生了IPSC，并且是负面对照，作为阐明ATAD3A变体相关疾病的分子机制的有价值工具。
2024; 20（15）：6255-6278。 doi：10.7150/ijbs.100113研究论文来自人类诱导的多能干细胞的细胞外囊泡表现出独特的MIC
1。fondazione irccs ca'granda ospedale maggiore Policlinico，意大利米拉诺的fondazione irccs ca和Gene疗法单位。2。瑞士苏黎世大学医院医学肿瘤学和血液学系。3。ITB-CNR，国家研究委员会生物医学技术研究所，意大利分离。4。脑损伤和神经保护症实验室，急性脑和心血管损伤部，意大利米兰的Istituto di Ricerche Farmacogiche Mario Negri Irccs。5。San Raffaele科学研究所，意大利米拉诺神经科学部，神经科学部。 6。 意大利L'Aquila大学的生活，健康与环境科学系。 7。 Epiget Lab，米兰米兰大学临床科学与社区健康系。 8。 意大利米兰米兰比科卡大学生物技术与生物科学系。 9。 移植免疫学SC Trapianti Lombardia的实验室 - NITP。 fondazione irccs ca'granda ospedale maggiore Policlinico，意大利米兰。San Raffaele科学研究所，意大利米拉诺神经科学部，神经科学部。6。意大利L'Aquila大学的生活，健康与环境科学系。 7。 Epiget Lab，米兰米兰大学临床科学与社区健康系。 8。 意大利米兰米兰比科卡大学生物技术与生物科学系。 9。 移植免疫学SC Trapianti Lombardia的实验室 - NITP。 fondazione irccs ca'granda ospedale maggiore Policlinico，意大利米兰。意大利L'Aquila大学的生活，健康与环境科学系。7。Epiget Lab，米兰米兰大学临床科学与社区健康系。 8。 意大利米兰米兰比科卡大学生物技术与生物科学系。 9。 移植免疫学SC Trapianti Lombardia的实验室 - NITP。 fondazione irccs ca'granda ospedale maggiore Policlinico，意大利米兰。Epiget Lab，米兰米兰大学临床科学与社区健康系。8。意大利米兰米兰比科卡大学生物技术与生物科学系。9。移植免疫学SC Trapianti Lombardia的实验室 - NITP。fondazione irccs ca'granda ospedale maggiore Policlinico，意大利米兰。
Pluri与Bar-Ilan University合作，在以色列创新管理局支持
HAIFA, Israel – October 28, 2024 – Pluri Inc. (Nasdaq:PLUR) (TASE:PLUR) (“Pluri” or the “Company”), a leading biotechnology company that transforms cells into solutions, today announced that the Israel Innovation Authority (“IIA”) will fund Pluri's collaboration with the Bar- Ilan University Research and Development Company Ltd., （“ Birad”），Bar-ilan大学的商业部门，以支持实体瘤的胎盘粘膜相关不变t（“ Mait”）细胞的持续发展。与传统的T细胞相比，已知Mait细胞具有独特的优势，但以前很难扩展和扩展以进行临床研究和潜在的商业化。mait细胞特别适合治疗实体瘤，这是一种巨大的未满足医疗需求。