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不同浓度抗PD-1和抗PD-L1抗体对非小细胞肺癌患者免疫系统细胞活性的影响
将 PBMC 和支气管抽吸物部分放入三块 6 孔板中，在 37°C 和 5% CO 2 条件下培养 24 小时，培养液为 RPMI 1640 培养基（PAA Laboratories，美国），培养基中添加抗生素（1% 青霉素-链霉素-新霉素，Sigma Aldrich，美国），培养液为不同浓度的 nivolum-ab（5 µg/mL、10 µg/mL、20 µg/mL 培养物）（Bristol-Myers Squibb，美国）或 atezolizumab（150 µg/mL、300 µg/mL、600 µg/mL 培养物）（Roche，法国）。培养方法如图 1 所示。培养完成当天，从培养孔中回收细胞，并进行免疫表型分析。将外周血和支气管抽吸物中不用于培养的对照细胞分装到流式细胞仪管中，与一组单克隆抗体在 4°C 下孵育 30 分钟。然后用不含 Ca 2+ 和 Mg 2+ 离子的 PBS 缓冲液（离心参数：2000 rpm/5 分钟）洗去未结合抗体的残留物，并在流式细胞仪中对细胞免疫表型进行详细分析。反过来，将用单独的抗PD-1或抗PD-L1抗体进行短期培养的细胞在孵育24小时后，与结合有适当荧光染料的选定抗体（抗CD4-FITC、抗CD274-FITC、抗CD14-FITC、抗CD8-PE、抗CD14-PE、抗CD25-APC、抗CD69-APC、抗CD95-APC、抗CD279-APC（Becton Dickinson，美国））孵育。
转铁蛋白修饰的壳聚糖纳米颗粒用于靶向...
与经典的血脑屏障通道相比，抽象的鼻子到脑递送提出了一种有希望的替代途径，尤其是用于递送高分子量的药物。通常，大分子在生理环境中迅速降解。因此，可以使用纳米标志系统来保护生物分子免受过度降解。此外，由于特定的结合和较长的停留时间，靶向纳米颗粒表面上的配体能够改善生物利用度。在这项工作中，转铁蛋白装饰的壳聚糖纳米颗粒用于评估模型蛋白在体外通过鼻上皮屏障的通过。已证明，促进的叠氮化叠氮化物 - 烷基环加成反应可用于将功能组连接到转铁蛋白和壳聚糖，在壳聚糖纳米颗粒制备后，在轻度反应条件下，在轻度反应条件下可以快速共价表面缀合。通过SDS-PAGE和SPR测量确认了转铁蛋白及其结合效率的完整性。产生的转铁蛋白装饰纳米颗粒的大小约为110-150 nm，表面电势为正。纳米颗粒的表面结合配体的最高量也显示出最高的细胞摄取到人鼻上皮细胞系中（RPMI 2650）。在与胶质母细胞瘤细胞（U87）的空气 - 液体界面共培养模型中，转铁蛋白充分的纳米颗粒显示出更快的通过上皮细胞层的通过，并增加了细胞对胶质母细胞瘤细胞的摄取。这些发现证明了特定靶向配体的有益特征。使用这种化学和技术配方概念，在纳米颗粒形成后，可以将多种靶向配体连接到表面，同时保持货物完整性。
开发定向能源沉积的NASA HR-1，以优化液体火箭发动机应用的特性
添加剂制造和新材料正在发展，多个同事和组织负责NASA HR-1的发展和发展。作者要感谢SLS液体发动机办公室（LEO）计划以及快速分析和制造推进技术（RAMPT）提供资金和支持以开发流程并推进这种合金。我们要感谢Johnny Heflin，Keegan Jackson和John Fikes提供了项目领导。我们要感谢我们的行业和学术界合作伙伴，包括RPM创新（RPMI），Beam，Fraunhofer，Formalloy和Auburn University的Nima Shamsaei（Rampt公共私人合作伙伴），以及阿拉巴马大学（UAH）大学（UAH）的Judy Schneider（UAH）（UAH）（UAH）开发和特征分类的sampemples。我们还要感谢提供原料粉的各种供应商，包括均质化金属公司（HMI），Praxair和Powder Alloy Corporation（PAC）。热处理是一项关键操作，我们的专家Pat Salvail，Kenny Webster和David Cole提供了出色的支持。我们还要感谢NASA GRC Counterparts，包括David Ellis，Justin Milner，Chris Kantzos，Ivan Locci以及许多其他帮助评估和表征样本的人。此外，我们认识到其他工程师在整个开发和测试中都提供了投入，包括托马斯·蒂斯利（Thomas Teasley），克里斯·普罗尔兹（Chris Protz），威尔·蒂尔森（Will Tilson），布莱恩·韦斯特（Brian West），凯瑟琳·贝尔（Brian West），凯瑟琳·贝尔（Catherine Bell），萨曼莎·麦克莱罗（Samantha McLeroy）以及MSFC，GRC和工业的许多其他工程。
机器的补充信息...
材料。Fmoc-β-amino acids, including Fmoc- L -β-homoalanine, Fmoc- L -β-homoisoleucine, Fmoc- L -β-homoleucine, Fmoc- L -β-homophenylalanine, Fmoc-(1S,2S)-2-aminocyclopentane carboxylic acid, Nβ-Fmoc-Nω-Boc- L -β-homolysine, Fmoc-O-tert-butyl- L -β-homoserine, and Fmoc-α-amino acids, including Fmoc-glycine, Fmoc- L -alanine, Fmoc- L -isoleucine, Fmoc- L - leucine, Fmoc- L -phenylalanine, Fmoc-O-tert-butyl- L -serine, FMOC-L-β-双晶，FMOC-L-主要酸β-TERT-丁基酯，FMOC-L-谷氨酸γ-tert-叔丁基酯，Nα-FMOC-Nε-boc-l-赖氨酸是从Chem-impex International，Inc.（Wood Dale，Inc.，IL，USA，USA，USA）购买的。fmoc-l-脱毛氨酸是从热科学化学品购买的。FMOC-L-Norvaline购自Santa Cruz Biotechnology。hatu是从奥克伍德化学品获得的。Tentagel S RAM FMOC购自Advanced Chemtech（肯塔基州路易斯维尔）。Menadione，N，N-二异丙甲胺，Mueller Hinton肉汤和磷酸二氮的磷酸钠，是从Sigma-Aldrich（密苏里州圣路易斯）获得的。3-（n-甲磷脂）丙烷磺酸（MOPS）获自Fisher Scientific（宾夕法尼亚州匹兹堡）。2,3-双（2-甲氧基-4-硝基-5-磺苯基）-2H-四唑-5-羧基（XTT）购自从Invitrogen购买。Gibco Brand RPMI 1640粉末（含有苯酚红和L-谷氨酰胺，没有碳酸氢钠或HEPES）和Dulbecco的磷酸盐缓冲盐水（DPB，无钙或镁）是从Thermo Fisher Scientific（MA）获得的。使用Millipore过滤系统纯化水（18.2MΩ）。细胞滴度GLO 2.0分析套件来自Promega（WI）。