摘要 屎肠球菌是一种普遍存在的革兰氏阳性细菌,可从环境、食物和哺乳动物的微生物群中分离得到。屎肠球菌的共生菌株可对宿主的生理和免疫产生有益影响,但抗生素的使用已从牲畜和人类中产生了抗生素耐药性和致病性分离株。然而,由于基因编辑方法效率低下,对屎肠球菌功能和机制的解析受到限制。为了解决这些限制,我们在此报告,屎肠球菌 RecT 重组酶的表达可显著提高重组工程技术在屎肠球菌的共生菌株和抗生素耐药菌株以及其他肠球菌种(如 E. durans 和 E. hirae)中的效率。值得注意的是,RecT 与成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR)-Cas9 和向导 RNA (gRNA) 的结合表达能够实现高效的无瘢痕单链 DNA 重组,从而在屎肠球菌中产生特定的基因编辑突变体。此外,我们证明屎肠球菌 RecT 表达促进了编码抗生素选择标记的双链 DNA 模板的染色体插入,从而产生了基因缺失突变体。作为进一步的原理证明,我们使用 CRISPR-Cas9 介导的重组敲除屎肠球菌中的两个分选酶 A 基因,以进行下游功能表征。此处描述的通用 RecT 介导的重组方法应能显著增强对屎肠球菌和其他密切相关物种的遗传研究,以进行功能和机制研究。
第2部分:技术/专业知识(70分)1。消防工程基本面:火灾的化学,燃烧过程,易燃性,火焰传播的限制,热量的影响,耐火,火负荷等等。2。消防化学品:水,泡沫,DCP,清洁剂等。3。火灾检测与控制:火灾探测原理,检测器的分类,火灾灭绝方法,基于水的基于化学的,清洁剂系统,操作和维护检测 /警报系统4。< / div>防火保护 - I(特殊危害:工业火灾):火灾抑制系统,消防水系统,洒水系统,防火结构,紧急情况存在5.防火保护 - II(特殊危害:易燃液体储藏):植物位置注意事项,点火源控制,散装危险,防火储藏的火灾保护,被动屏障6.消防服务液压学:洒水系统需求,洒水系统的液压等。7。消防安全法:主权免疫学说;工厂法,爆炸物法,石油法等等等8。消防法规和标准:消防设备,人身安全设备等标准等。9。护理人员 /急救:烧伤,断裂,伤口,创伤处理等的管理等。< / div>10。消防系统的检查和测试:消防喷头测试,OISD/NFPA测试和检查标准,消防泵测试等。11。安全管理:安全性和需求,预防事故,事故调查,个人保护设备等。12。13。建筑安全:焊接和气体切割,发掘,高度工作,电气,材料处理,举起/提升等方面的工作等等。安全工程:行业,安全指数,频率和严重性率,工作安全分析,工作许可管理等的事故趋势等。---------------------------------------------------------------------------------------------------------- NOTE: The syllabus/topics mentioned are indicative in nature.候选人有望拥有与相关学科及其合格学位有关的重要知识/水平
标题:RECT重组酶表达能够在肠球菌作者Victor Chen 1,Matthew G. G. G. G. G. G. G. G. G. G. G. G. G. Hang 1,2*隶属关系1化学生物学和微生物发病的实验室,纽约大学,纽约,纽约10065。2个免疫学和微生物学和化学部门,Scripps Research,La Jolla,加利福尼亚州92037,美国。*通信:hhang@scripps.edu摘要肠球菌是一种普遍存在的革兰氏阳性细菌,已从哺乳动物的环境,食物和微生物群中回收。粪肠球大肠杆菌的共生菌株可以对宿主生理和免疫产生有益的影响,但抗生素使用量可从牲畜和人类中提供抗生素耐药性和致病性分离株。然而,粪肠球菌功能和机制的解剖受到了效率低下的基因编辑方法的限制。为了解决这些局限性,我们在这里报告了粪肠球菌的表达重点酶的表达,显着提高了粪肠球菌和其他肠球菌种类(例如杜兰大肠杆菌)和Hirae等肠球菌和其他肠球菌中的重组技术的效率。值得注意的是,我们证明了E.粪便的表达表达促进了编码抗生素可选标记的单链和双链DNA模板的染色体插入。此外,RECT的表达与簇的定期间隔的plindromic重复(CRISPR)-CAS9和引导RNA(GRNA)相结合,使高效的Scar-Lise SSDNA重新组合可以在E.粪eC中产生特定的基因编辑突变体。此处描述的矩形介导的重组方法应显着增强粪肠球大肠杆菌和其他密切相关的物种的遗传研究,以进行功能和机械研究。重要性肠球菌被广泛认为是新兴的公共卫生威胁,耐药性和医生感染的兴起。然而,共生肠球菌菌株在哺乳动物中具有有益的健康功能,可以上调宿主免疫并预防微生物感染。这种肠球菌物种的功能性二分法强调了深入研究的必要性,以发现和表征强调其多种活性的遗传成分。但是,粪肠球菌中的基因工程仍需要被动同源重组,这通常需要克隆多个同源片段和筛选。为了减轻这些挑战,我们发现直接成型酶使诱变DNA模板更有效地整合能够产生粪便中基因组DNA的插入,缺失和取代。这些改进的重新组合方法应促进肠球菌的功能和机理研究。
摘要:欧洲人群中黑死亡大流行的毁灭性程度(1346-53)是从文献来源及其细菌来源从古代病原体DNA的研究中阐明的。在中世纪社区的社会分层的背景下,大流行对当地规模的人类流动性和遗传多样性的影响。在这里,我们研究了275个新报道的中世纪和中世纪后剑桥郡的古代基因组,这些基因组来自黑人死亡之前,期间和之后被埋葬的人。大多数被检查的人都有局部遗传祖先。与机构的功能一致,我们发现,与他们在城市和农村教区社区中的丰富相反,医院和医院的囚犯之间缺乏近亲。考虑到高度的遗传成分,可以突出根据长骨头估计的地位的社会群体之间的差异,作为健康和生活质量的代表。我们检测到剑桥郡的局部遗传血统的长期转变,无论是在黑死病前还是在黑死亡之前,我们都没有发现遗传血统发生了重大变化的证据,也没有与最近的主张相比,在黑死亡之前和之后生活的同胞之间的免疫基因群的更高分化。
代表Ca L Ifornia交通运输部(Ca L Trans),我很轻松地介绍州气候恢复运输供您运输(SCR I PT)。scr i pt是ca l trans版本的ca l ience i ience i provement p l an the scrip p l an the pl an the scr i pt s scr i pt pt scr i p l an the scr s resi l an the the the the促进的转换,高效和节省成本运输(保护)计划法规(23 USC 176(e))。The SCR I PT summarizes the breadth of existing climate adaptation po l icies, too l s, guidance, and activities that have positioned Caltrans and its partners to take a systemic approach to making immediate and l ong-range investments to improve the resi l ience of the mu l timoda l transportation system to c l imate change impacts, from the onset of I nfrastructure I nvestment & Jobs Act ( II JA) through the Ca L Ifornia运输的生效日期(CTP)2050(2021-2050)。该脚本由附录纳入CTP 2050中,如在2月28日至2023年9月28日,至2023年10月30日收集的scr i pt rec ect l ect rect l ects rect l ects rout pob l ic Input。porta。
最大转发'记录。每个库存类型案例材料 Olssl·峰值反向电流时间编号功能部分反向电流 @VF"IV Nano- 1·I 25·1 100 •wan,VOII uA@V rnA 秒。24 99 向上 578·0034 lN34A 00-7 G55 130 75 30-10 5 .40 I .32 I .20 577·0060 lN60 00-7 G55 .080 40 200·10 5 .40 .32 .20 1-99 100-999 10oo·向上 552-0456 lN456A 00-7 5GP .2 30 025-25 100 .69 1. 506 J .345 552·0457 lN457A 00-7 SGP .2 70 025-60 100 .69 .506 .345 552-0458 lN458A 00-7 SGP 2 125 025-125 100 .375 .28 .195 552·0459 lN459A 00-7 5GP .2 175 .025·175 200 .69 .506 .345 1·24 25-99 l00-Up 577-0538 lN538 00-1 S 矩形 200 300-200 750mA 10 .73 I .551 .38 577·0540 lN540 00-1 S 矩形 400 300-400 250mA 10 .98 .70 .47 577-0547 lN547 00-1 5 矩形 600 350-600 250mA 10 1.40 1.00 .66 1-99 100·999 1000-Up 551-0659 lN659 00-7 SCO 60 1-100 400 6 .66 I .48 I .33 551-0661 lN661 00-7 SCO 200 10-200 6 300 .90 .672 .468
图2:总延迟测量的示意图。A.用CFIR(红色)和RECT(蓝色)方法提取信封的速度准确折衷。cfir优于所有延迟值。本研究中使用的CFIR设置(100 ms的延迟)以十字为标志。b:使用光电传感器同步“大脑时间”(顶部)和“ PC时间”(底部)。EEG信号(大脑事件)由计算机注册,脑电图滞后。计算机将信号发送到屏幕,该信号由光电传感器测量,然后通过辅助EEG频道将其发送回计算机,该通道具有相同的EEG到PC滞后。整体延迟是从感兴趣的大脑事件(瞬时α波段振幅)到相应的光电传感器事件的时间,这两个测量都指的是PC时轴。c:零延迟α振幅,y 0(t)(红色)和光电传感器p(t)(蓝色)捕获的实时NFB。d:在y 0(t)和p(t)的互相关函数作为时间滞后的函数。互相关峰的时间对应于整个NFB潜伏期。
尽管我们认为没有偏见,但上诉人有权获得正确反映其诉讼内容的军事法庭记录。3 根据 RCM 1111(c)(2),我们修改了 EOJ 并指示将其纳入记录。在修改 EOJ 并仔细考虑了上诉律师的记录和简报后,我们确定调查结果在法律上是正确的,判决在法律和事实上是正确的,并且没有发生任何对上诉人的实质权利造成重大损害的错误。4
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