评论CRISPR的生物伦理问题:一种基因组编辑技术Ashima Bhan,Satish Sasikumar,Arvind Goja,Rajendra TK Genetics and Molecular Biologary Lim,D。Y. Patil Biotechnologicy and BiioInformatics D. Y. Patil Vidyapeeth博士,D。通讯作者:Ashima Bhan。电子邮件 - ashimabhan@gmail.com摘要生物技术领域的最新和重大科学成就是CRISPR的发现(聚集了定期散布的短篇小说重复序列)。crispr已成为最现代,最受欢迎的工具之一,这主要是由于其低成本和效率,可用于编辑基因组。因此,这项技术几乎是生物医学和农业科学的每个维度的关键,并且在治疗病毒感染,血友病,癌症和遗传遗传异常方面具有潜在的应用。但是,当这种用于编辑基因的技术不公平地用于改善生物学特征时,道德问题可能会出现,这仅仅是出于美学的目的或比人群中其他人的优势。这不仅会导致社会歧视和动荡,而且有可能改变生物的进化进化。在这方面,应制定对CRISPR技术,风险评估,政策和程序的监管实施,以防止严重滥用这项技术。关键词:生物伦理学,生物技术,CRISPR,进化,优生学,基因编辑
传统的放大方法与指南RNA的分子不适应,因此第一作者和前博士后研究员LoϊcBinan制定了一种创新的策略,以在其原始站点生成每个指南RNA的许多本地副本。通过将其与称为Merfish的基于荧光的空间转录组方法结合起来,在空间环境中,witturb-fish可以揭示每个扰动的身份和细胞的转录组。
亚培养从粘附细胞中去除旧培养基,并用无钙和镁的PBS洗涤它们。使用3-5毫升PBS进行T25瓶,T75瓶子使用5-10毫升。然后用电池完全覆盖电池,用1-2 mL盖住T25瓶,T75瓶的2.5毫升。让细胞在室温下产生8-10分钟,以松开它们。孵育后,将细胞与10 ml培养基仔细混合,以重悬于它们,然后以300xg离心3分钟。扔掉上清液,将细胞重悬于新鲜培养基中,然后将其转移到已经包含新鲜培养基的新瓶中。
由于其NUP96-MEGFP合并蛋白的表达稳定,并保持U-2 OS系列的典型特性,包括在与癌细胞迁移和转移有关的研究中至关重要的稳健细胞骨架结构,因此选择了该特定克隆的数字195。使用CRISPR技术可确保精确的基因编辑,从而最大程度地减少了可以削弱实验结果完整性的外观作用。这确实会做U-2 OS-CRISPR-NUP96-MEGFP KLON No.195对于高分辨率成像技术和细胞结构的详细研究特别有用,这有助于细胞生物学,癌症研究和核转运现象的高级研究。
该工具在Tulane开发的工具与大学卫生网络/多伦多大学,肺炎儿童健康研究(PERCH)研究的样品进行了测试,以及国际Mycose预防,研究,研究,实施,网络和培训(Imprint)联盟(Impint)。
废水包含许多不同的ARG与来自人类,病毒和细菌在内的各种来源的遗传物质混合在一起。因为ARG仅占总DNA含量的很小比例,因此在废水样品中发现它们需要敏感的检测方法。最常见的技术是定量聚合酶链反应(QPCR)。此方法使用称为引物的RNA指南来识别已知ARG的特定DNA序列,然后将其放大以进行检测。
亚培养从粘附细胞中去除旧培养基,并用无钙和镁的PBS洗涤它们。使用3-5 mL PBS进行T25烧瓶,T75烧瓶使用5-10 mL。然后用ACCUTASE完全疲倦,T25 Colber用1-2 mL和T75烧瓶的2.5 mL静止。让细胞在室温下孵育8-10分钟以松开它们。孵育后,将细胞与10 ml培养基轻轻混合以使其恢复它们,然后以300xg离心3分钟。丢弃上清液,将细胞重悬于新培养基中,然后将其转移到已经包含新培养基的新瓶中。
亚培养消除了粘附细胞的古老介质,并用缺乏钙和镁的PBS洗涤它们。 div>对于T25烧瓶,使用3-5毫升PBS,对于T75烧瓶,使用5-10毫升。 div>然后用1-2 mL对T25和2.5 mL烧瓶进行T75烧瓶的作用覆盖细胞。 div>让细胞在室温下孵育8-10分钟以释放它们。 div>孵化后,将细胞与10 ml培养基轻轻混合,以重悬于它们,然后离心至300xg 300倍。 div>丢弃上清液,将细胞重悬于凉爽的介质中,然后将其转移到已经包含新鲜手段的新瓶中。 div>
亚培养物从粘附细胞中去除旧培养基,并用不含钙和镁的PBS洗涤它们。将T25活塞3-5毫升PBS和T75活塞使用5-10毫升。然后将细胞完全用ACCUTASE覆盖,其中T25活塞的1-2 mL和T75活塞的2.5 mL。让细胞在室温下孵育8-10分钟以更换它们。孵育后,将细胞与10 ml培养基仔细混合以使它们共振,然后以300xg离心3分钟。丢弃上清液,在新鲜培养基中产生共鸣,并将其转换为已经包含新鲜培养基的新活塞。
