1 KBR,Inc,NASA AMES研究中心,加利福尼亚州莫菲特菲尔德,美国2材料科学部,劳伦斯·伯克利国家实验室,加利福尼亚州伯克利,加利福尼亚州94720,美国3美国3号物理学系美国伯克利,94720,美国5材料科学与工程系,斯坦福大学,斯坦福大学,加利福尼亚州斯坦福大学94305,美国6斯坦福大学材料与能源科学研究所,SLAC国家加速器实验室,加利福尼亚州Menlo Park,加利福尼亚州Menlo Park,94025,美国7机械工程和材料科学系,纽约大学,纽约大学,纽约市765111111111。 OX1 3PJ,英国9 Kavli Energy Nanoscience Institute,位于伯克利,伯克利94720,美国
摘要 在之前的研究中,我们建立了正向遗传筛选,以确定领鞭毛虫 Salpingoeca rosetta 多细胞发育所需的基因 (Levin 等人,2014)。然而,领鞭毛虫反向遗传工具的缺乏妨碍了对基因功能的直接测试,并阻碍了将领鞭毛虫确立为重建其现存近亲动物起源的模型。在这里,我们通过设计一个可选择的标记来富集编辑细胞,在 S. rosetta 中建立了 CRISPR/Cas9 介导的基因组编辑。然后,我们使用基因组编辑来破坏 S. rosetta C 型凝集素基因 rosetteless 的编码序列,从而证明其对于多细胞莲座丛发育的必要性。这项工作推动了 S. rosetta 作为一个模型系统的发展,以研究从遗传筛选和基因组调查中识别出的基因如何在领鞭毛虫中发挥作用并进化为动物生物学的关键调节器。