·工程技术:民用,机械,电气,航空和环境工程的创新;机器人技术,机器人和自动化;材料科学,纳米材料和生物材料。·能源与可持续性:可再生能源,能源效率和可持续资源管理技术。·AI,机器学习与计算科学:AI,深度学习,机器学习,计算方法,仿真模型和优化。·电信和网络:通信系统,物联网,网络优化和网络安全。·量子计算与信息技术:量子算法,计算系统和相关技术。·智能城市和基础设施:智能城市系统,可持续基础设施和整合的城市规划。·生物工程与生物技术:基因工程,医疗设备,诊断和医疗保健创新。·工业工程与管理:过程优化,供应链管理和系统工程。·管理与创新:战略管理,企业家精神,技术管理,创新和IP。·医疗保健与金融:医疗保健管理,金融科技和投资系统中的技术。
1 趋化因子信号传导组,免疫学和肿瘤学系,国家生物技术中心/CSIC,坎托布兰科校区,28049,马德里,西班牙。 2 林雪平大学卫生、医学和护理科学系诊断和专科医学科,58185,林雪平,瑞典。 3 玛格丽塔萨拉斯生物研究中心(CIB-CSIC),28040,马德里,西班牙。 4 生物计算部门,国家生物技术中心(CNB-CSIC),Cantoblanco 校区,28049 马德里,西班牙。 5 西班牙马德里公主大学医院(IIS-Princesa)健康研究所免疫学系,28006。 6 加拿大安大略省汉密尔顿市麦克马斯特大学施罗德过敏和免疫学研究所麦克马斯特免疫学研究中心 (MIRC) 医学系,邮编 L8S 4L8。 7 弗朗西斯科维多利亚大学(UFV)实验科学学院,28223,马德里,西班牙。 8 B 淋巴细胞动力学,免疫学和肿瘤学系,国家生物技术中心 (CNB)/CSIC,坎托布兰科校区,28049,马德里,西班牙。 9 神经退行性疾病生物医学研究网络中心(CIBERNED),卡洛斯三世健康研究所,28029 马德里,西班牙 10 X 射线晶体学部门,大分子结构系,国立生物技术中心/CSIC,坎托布兰科校区,28049,马德里,西班牙。 * 通讯作者:Mario Mellado,西班牙马德里 28049 Cantoblanco, Darwin 3,CNB/CSIC 免疫学和肿瘤学系。电话:(+34)91/585-4852;传真:(+34)91/372-0493;邮箱: mmellado@cnb.csic.es
摘要:植物中的病毒感染威胁粮食安全。因此,需要简单有效的病毒检测方法,以采用可以防止病毒扩散的早期措施。然而,基于聚合酶链反应(PCR)扩增病毒基因组的当前方法需要实验室条件。在这里,我们利用了CRISPR-CAS12A和CRISPR-CAS13A/D系统来检测三种RNA病毒,即烟草的烟叶病毒,烟草蚀刻病毒和马铃薯病毒X,在Nicotiana Benthamiana植物中。我们应用了CRISPR-CAS12A系统来检测由PCR或等温扩增产生的病毒DNA扩增子,并且在混合感染的植物中也进行了多重检测。此外,我们调整了检测系统以绕过昂贵的RNA纯化步骤,并获得带有横向流条的可见读数。最后,我们应用了CRISPR-CAS13A/D系统直接检测病毒RNA,从而避免了进行前置步骤的必要性,并获得了随病毒载荷缩放的读数。这些方法允许在收获叶片后半小时内进行病毒诊断的性能,因此可能与可灭绝的应用有关。关键词:核酸检测,CRISPR诊断,多重诊断,植物病毒■简介