抽象的DNA损伤是化学试剂引起的最重要作用之一。我们使用末端脱氧核苷酸转移酶DUTP Nick End标记(TUNEL)测定法(TUNEL)分析对DNA片段化的比较分析,通常用于检测细胞凋亡。我们的方法结合了分离的细胞结构中的细胞遗传学技术和研究,从培养基中恢复,目的是比较三个不同细胞系的DNA片段化,甚至超出了遵守底物的细胞之外。因此,我们检测到单个染色体,整个核和其他细胞结构上的任何碎裂点。细胞暴露于单一和联合处理中的白藜芦醇(RSV)和阿霉素(DOXO)。对照和处理的星形胶质细胞在凝结的核和分离结构中显示DNA损伤。CACO-2细胞仅在Doxo处理后才显示出碎片的DNA,而对照组显示出碎片的染色体,指示复制细胞中的DNA损伤。MDA-MB-231细胞在RSV处理之后表现出核凝结和DNA片段化,并且与分离的结构有关。该模型被证明执行了基因组不稳定性(GI)的分级。星形胶质细胞显示GI的混合水平。CACO-2细胞显示出碎片的中期染色体,证明了DNA大坝被传输到子细胞可能是由于缺乏DNA修复机制所致。相反,MDA – MB-231细胞显示出很少或没有碎片的中期,表明可能激活DNA修复机制。通过应用这种替代方法的TUNEL测试方法,我们获得了可以更具体地表征DNA碎片的数据,以适用于在各个领域的合适应用。
1巴西可再生能源,冠军大学(UNICMP),冠军13083‑852,巴西; Carlos.ruphs@carissm.eu 2 Interinstitutes Graduate Program in Bioenergy (USP/UNICMP/UNESP), 330 Coralina Streets, Children 1336-, Campina 130836‡ laugh, Brazil 396, Brazil CASSSSSSSSSSSSSSSSSSMSSSSSSSSSSSSSSSOSSSSSSSSSSSSCSSSSSSSSSSSCSSSSSSCSSSSSSSSSCSSSSSSSSCSSSSSSSCSSSSSSSSCSSSSSSSSSSSSCSSSSSSSSSSSSSSCSSSSSSS. Mobelity(C -Ecos),Technish Hochschole,85049 Englasstad,德国; money@carissma.eu(D.K.); ster.walter@carissma.eu(g.w.); yash.kotaak@carissma.eu(y.k。);他们−genergorg.schweger@thi.de(H.-G.S.)4,Palemo大学(UNIPA),意大利Palemo 90128; heeonor.revaseverine@commonty.it(E.R.R.S.); pierlus.galo@commonty.it(p.g.)5国家电信公司(CNIT),意大利43124 PARM 43124 Catalonya Energy(IREC)研究促进,西班牙巴塞罗那08930; gbenvenistic@irec.cat(G.B.P.)*对应:hzanine@unly.br
抽象目的:这项研究的目的是研究使用细胞化学方法的特发性不育男性中的精子DNA完整性与常规精液参数之间的关系。方法:通过使用酸性苯胺蓝色染色来评估精子DNA的完整性,指定核染色质凝结和TUNEL方法鉴定了40个特发性不育男性中的精子DNA断裂。涂片上的精子头被计为Tunel+和苯胺蓝+,显示了精子DNA损伤。这些发现用于确定鲁丁精液参数与精子DNA完整性测试结果之间的相关性。结果:苯胺蓝+染色的百分比与精子形态和进行性运动之间存在显着的负相关。和在TUNEL+染色的百分比与正常形态和进行性运动性(P <0.01)之间观察到了负相关,在这些相关性与精子浓度和精子总运动性方面没有相关性。结论:诸如酸性苯胺蓝色和TUNEL之类的方法可以显示出独立于常规精液参数的精子的结构缺陷。尽管这些方法与某些精液参数相关,但它们特别适用于特发性不育患者组,可能会对辅助生殖技术的成功产生积极贡献。关键字:精子,染色质冷凝,DNA碎片,tunel,苯胺蓝
治疗的小鼠。此外,在Lomitapide处理的小鼠中,肿瘤体积或肿瘤的重量都显着降低(图。6b和6c)。此外,进行了TUNEL分析和KI-67免疫组织化学分析以检测凋亡和增殖指数。如图6D和6F,来自Lomitapide治疗的小鼠的异种移植物呈现出增加的细胞凋亡率和细胞增殖率降低。Western印迹数据显示,Lomitapide激活了肿瘤组织中的AMPK途径和自噬,这是由P-AMPK和LC3 I/II的表达水平升高所示(图6H)。值得注意的是,Lomitapide治疗对动物诱导了NO毒性作用,如主要器官的体重和病理形态不变所表明的那样(图6e和6g)。共同验证了
Results: Focusing on Ube2d3 for subsequent functional studies, we con fi rmed its high expression in the MI group through qRT-PCR and Western Blot detection after successful construction of a MI mouse model by left anterior descending (LAD) coronary artery ligation, and further clari fi ed the correlation of cuproptosis with MI development by detecting the levels of cuproptosis-related proteins.此外,通过体外实验,ube2d3得到了确认,可以在氧气 - 葡萄糖剥夺(OGD)处理的心肌细胞AC16中高度表达。In order to further clarify the role of Ube2d3, we knocked down Ube2d3 expression in OGD-treated AC16 cells, and con fi rmed Ube2d3 ' s promoting role in the hypoxia damage of AC16 cells by inducing cuproptosis, as evidenced by the detection of MTT, TUNEL, LDH release and cuproptosis-related proteins.
方法:在这项研究中,NSCLC细胞系A549和H460在低氧条件下培养1周,以诱导对阿霉素(DOX)的耐药性。通过逆转录和实时聚合酶链反应(RT-QPCR),Western blot和Dual-Luciferase Assays测定,miR-194-5p和HIF-1之间的连接揭示了。我们使用TUNEL染色和CCK-8测试来评估NSCLC细胞对DOX的敏感性。结果:我们发现缺氧诱导的NSCLC细胞增强了对DOX的抗性。miR-194-5p大大降低了,在缺氧诱导的耐药NSCLC细胞中增加了HIF-1。此外,MiR-194-5p通过直接抑制HIF-1成功诱导NSCLC细胞凋亡,从而增强了DOX敏感性。结论:miR-194-5p通过直接抑制HIF-1来增强NSCLC细胞对DOX的敏感性。这项工作为耐药NSCLC的基本治疗提供了见解。
摘要 - 内脏利什曼病是一种威胁生命的载体传播疾病,对儿童和老年人免疫功能低下的人的影响不成比例,是一种主要的热带忽视疾病。在利什曼尼亚·多诺瓦尼(Leishmania Donovani)尚未报道过凋亡的伴侣蛋白质,而它们的识别可能会导致有关寄生虫细胞死亡和建立替代治疗剂的知识。我们搜索了哺乳动物的Bcl-2家族蛋白直系同源物,并在多诺瓦尼乳杆菌中发现了一种抗凋亡和两个促凋亡的直系同源物。。 进行了进行分子对接和分子动力学模拟,以评估已识别的凋亡蛋白与模拟哺乳动物固有的凋亡途径之间的蛋白质蛋白相互作用。 恢复表明,两种促凋亡蛋白都与抗凋亡直系同源物的疏水袋相互作用,形成稳定的复合物。 这种相互作用可能代表L. Donovani的凋亡途径中的关键事件。 为了进一步表征它,我们使用了CRISPR-CAS9方法来靶向识别蛋白。 纯敲门的种群突变体,并暴露于凋亡刺激中。 末端脱氧核苷酸转移酶Dutp nick末端标记(TUNEL)测定和定量表达促进表明,这些蛋白质与寄生虫的凋亡有关,并可能在其生存中起作用。。进行分子对接和分子动力学模拟,以评估已识别的凋亡蛋白与模拟哺乳动物固有的凋亡途径之间的蛋白质蛋白相互作用。恢复表明,两种促凋亡蛋白都与抗凋亡直系同源物的疏水袋相互作用,形成稳定的复合物。这种相互作用可能代表L. Donovani的凋亡途径中的关键事件。为了进一步表征它,我们使用了CRISPR-CAS9方法来靶向识别蛋白。纯敲门的种群突变体,并暴露于凋亡刺激中。末端脱氧核苷酸转移酶Dutp nick末端标记(TUNEL)测定和定量表达促进表明,这些蛋白质与寄生虫的凋亡有关,并可能在其生存中起作用。
在胰腺癌的治疗研究中,超声靶向的微泡破坏(UTMD)在促进凋亡作为一种安全和非侵入性辅助治疗方面可能显示出潜力。自噬是一种细胞应激反应和存活的调节机制,在肿瘤发育,进展和治疗中起双重作用。然而,自噬在UTMD诱导的胰腺癌细胞凋亡中的作用尚不清楚。在这项研究中,将自噬抑制剂氯喹(CQ)与UTMD结合使用,以治疗体外和体内胰腺癌,并通过Western blot和Tunel染色评估了凋亡的变化。结果表明,UTMD在胰腺癌细胞中诱导了凋亡和自噬。值得注意的是,抑制自噬显着增强了UTMD诱导的凋亡,而抑制凋亡并不影响UTMD诱导的自噬。这些发现表明自噬可降低UTMD在治疗胰腺癌中的有效性。这项研究提供了有关治疗胰腺癌的UTMD的新观点,这表明将自噬抑制剂结合起来可能是提高胰腺癌治疗有效性的有前途的策略。
核黄素-5-磷酸 (RF) 是角膜交联 (CXL) 中最常用的光敏剂,但其亲水性和负电荷限制了其穿透角膜上皮进入基质。为了增强 RF 对角膜的通透性并提高其在圆锥角膜治疗中的疗效,以 ZIF-8 纳米材料为载体制备了新型芙蓉状 RF@ZIF-8 微球复合材料 [6RF@ZIF-8 NF (纳米片)],其特点是疏水性、正电位、生物相容性、高负载能力和大表面积。苏木精和伊红内皮染色和 TUNEL 分析均证明 6RF@ZIF-8 NF 具有良好的生物相容性。在体内研究中,6RF@ZIF-8 NF 表现出优异的角膜渗透性和出色的跨上皮 CXL (TE-CXL) 功效,略优于传统 CXL 方案。此外,6RF@ZIF-8 NF 的特殊芙蓉状结构意味着它比 6RF@ZIF-8 NP(纳米颗粒)具有更好的 TE-CXL 功效,因为与上皮的接触面积更大,RF 释放通道更短。这些结果表明 6RF@ZIF-8 NF 有望用于跨上皮角膜交联,避免上皮清创的需要。
摘要:乳腺癌是女性健康最重要的原因之一,尽管其诊断和治疗取得了进展,但它仍然是女性死亡的主要原因之一。其中一个最突出的原因是疾病对治疗药物的抗药性。因此,除了常规疗法之外,联合疗法研究的趋势也有所增加。在本研究中,我们旨在调查咖啡因 (CAF) 和常用于治疗乳腺癌的紫杉醇 (PTX) 联合使用对 MDA-MB-231 和 MCF-7 细胞的影响。为此,确定了 4 组作为对照组、CAF、PTX 和 CAF+PTX。MTT 测定用于评估细胞活力并确定 CAF 的适当剂量。用 TUNEL 方法评估药物组合对细胞系的凋亡作用,并通过细胞周期分析确定它在哪个阶段暂停细胞分裂。根据研究结果,结果表明 CAF 诱导乳腺癌细胞凋亡,其中 PTX 组效果最佳。此外,研究发现,MCF-7 细胞系中的 CAF 和 PTX 联合或单独使用均可阻断 MCF-7 细胞系 S 期的细胞分裂。这些结果为未来研究提供了希望,将证明 CAF 作为乳腺癌辅助治疗的有效性。