为了保留其品种属性,已建立的葡萄品种(Vitis vinifera L. ssp. vinifera)必须进行克隆繁殖,因为它们的基因组是高度杂合的。马尔贝克是一种源自法国的品种,因生产高品质的葡萄酒而受到赞赏,是品种 Prunelard 和 Magdeleine Noire des Charentes 的后代。在这里,我们将 PacBio 长读段三重合并到从父母遗传的两个单倍体补体中,构建了马尔贝克的二倍体基因组组装。经过单倍型感知的重复数据删除和校正后,获得了两个单倍相的完整组装,且单倍型转换错误率非常低(< 0.025)。单倍相比对确定了 > 25% 的多态性区域。基因注释(包括 RNA-seq 转录组组装和从头算预测证据)导致两个单倍相的基因模型数量相似。利用注释的二倍体组装体对四个表现出浆果组成特征差异的马尔贝克克隆种质进行转录组比较。使用任一单倍体作为参考对成熟果皮转录组进行分析,得到了相似的结果,尽管观察到了一些差异。特别是,在仅以 Magdeleine 遗传单倍型为参考鉴定的差异表达基因中,我们观察到假设的半合子基因的过度表达。克隆种质 595 的浆果花青素含量较高,与脱落酸反应增加有关,可能导致观察到的苯丙烷代谢基因的过度表达和与非生物应激反应相关的基因的失调。总体而言,结果强调了生产二倍体组装体的重要性,以充分代表高度杂合的木本作物品种的基因组多样性并揭示克隆表型变异的分子基础。
这项研究旨在通过化学和感觉评估来表征Zelen(Vitis Vinifera L.)葡萄酒的芳香独特性,这是一种来自斯洛文尼亚西部的Vipava山谷的自多品种。通过HS-SPME-GC-MS分析了七十种芳香族化合物,包括品种硫醇,酯,C6-醇,挥发性苯酚,萜类化合物,萜类化合物和丙烯酸酯,在两个调查中,通过HS-SPME-GC-MS进行了比较,将Zelen Wines与Vipava Valley的其他四种种植者进行了比较。Zelen葡萄酒的嗅觉空间是通过将其芳香剖面与Pinela葡萄酒的芳香剖面在分类任务中进行比较,并通过HPLC分数获得的芳香族馏分的嗅探。Zelen葡萄酒的特征是干草药和辣味,例如百里香,迷迭香和罗勒,与Pinela Wines相比。Zelen葡萄酒的化学特征是由单烯烯的原始混合物(包括萜烯异构体,林烯,limonene,p-甲苯,萜酚,linalool,linalool和α-耐酚)的原始混合物所支配的。获得的4-乙烯基鸟醇和甲基水杨酸酯的浓度位于与报道的嗅觉阈值接近或更高的水平上,从而推断了这些化合物对Zelen葡萄酒的辛辣芳香族成分的潜在贡献。通过HPLC半生育分级溶解的Zelen葡萄酒的两种芳族馏分,并通过HS-SPME-GC-MS进行了进一步分析,并通过HS-SPME-GC-MS进行了浏览的存在,这些原始混合物的存在是水合碳单位烯的原始混合物,包括定量测量的化合物,以及其他β-Myrc-β-Myrc,例如β-Myrc,以及其他化合物,以及其他化合物。 E-β-乙烯,Z-β-乙二烯和两个2,4,6-二十二烯-2,6-二甲基异构体。半定量测量结果表明,这组新的单甲烯类也比Pinela,Malvasia Istriana,Chardonnay和Sauvignon Blanc葡萄酒更高。
为了保留其品种属性,已建立的葡萄藤品种(Vitis Vinifera L. ssp。vinifera)必须由于其高度杂合基因组而被克隆繁殖。马尔贝克(Malbec)是一种以法国原始的品种生产高质量的葡萄酒,是品种Prunelard和Magdeleine Noire des Charentes的后代。在这里,我们已经建立了Malbec的二倍体基因组组装,在PacBio Long的三人组合中读取了从任何一个父母继承的两个单倍体补充中。在单倍型的重复数据删除和校正后,以非常低的单倍型开关率(<0.025)获得了两个单倍相的完整组件。单倍相一致性识别> 25%的多态区域。基因注释,包括RNA-Seq转录组组装和从头算预测证据,两种单倍相的基因模型数量相似。在MALBEC的四个克隆辅助的转录组比较中,在浆果组成性状变化的四个克隆辅助中被利用。 使用任何一个单倍相作为参考的成熟果皮转录组分析产生了相似的结果,尽管观察到了一些差异。 尤其是,在仅以玛格德林属性单倍型为参考的差异表达基因中,我们观察到了假设半合子基因的过度占代表性。 总体而言,结果突出了产生二倍体组件以完全表示高度杂合木质作物品种的基因组多样性的重要性,并揭示了克隆表型变异的分子碱基。在浆果组成性状变化的四个克隆辅助中被利用。使用任何一个单倍相作为参考的成熟果皮转录组分析产生了相似的结果,尽管观察到了一些差异。尤其是,在仅以玛格德林属性单倍型为参考的差异表达基因中,我们观察到了假设半合子基因的过度占代表性。总体而言,结果突出了产生二倍体组件以完全表示高度杂合木质作物品种的基因组多样性的重要性,并揭示了克隆表型变异的分子碱基。克隆登录595的较高的浆果花青素含量与脱落酸反应增加有关,可能导致观察到观察到的苯基丙烷代谢基因的过表达以及对与非生物应激反应相关的基因失控。
1. Ferrarini M、Moretto M、Ward JA、Surbanovski N、Stevanovic V、Giongo L、Viola 88 R、Cavalieri D、Velasco R、Cestaro A、Sargent DJ。2013 年。对 89 PacBio RS 平台进行叶绿体基因组测序和从头组装的评估。BMC 基因组学 14:670。91 2. Stadermann KB、Weisshaar B、Holtgräwe D。2015 年。仅 SMRT 测序甜菜 (Beta vulgaris) 叶绿体基因组的从头组装。BMC 93 生物信息学 16:295。 94 3. Pucker B、Holtgräwe D、Stadermann KB、Frey K、Huettel B、Reinhardt R、95 Weisshaar B。2019 年。染色体水平序列组装揭示了拟南芥 Nd-1 基因组及其基因集的结构。PLoS One 97 14:e0216233。98 4. Altschul SF、Gish W、Miller W、Myers EW、Lipman DJ。1990 年。基本局部比对搜索工具。分子生物学杂志 215:403-410。100 5. Koren S、Walenz BP、Berlin K、Miller JR、Bergman NH、Phillippy AM。2017 年。Canu:通过自适应 k-mer 加权和 102 重复分离实现可扩展且准确的长读组装。基因组研究 27:722-736。103 6. Jansen RK、Kaittanis C、Saski C、Lee SB、Tomkins J、Alverson AJ、Daniell H. 2006. 基于完整叶绿体基因组序列的葡萄科(Vitaceae)系统发育分析:分类单元抽样和系统发育方法对解决蔷薇科间关系的影响。BMC 进化生物学 6:32。107 7. Goremykin VV、Salamini F、Velasco R、Viola R. 2009. 葡萄的线粒体 DNA 和猖獗的水平基因转移问题。分子生物学与进化 26:99-110。110 8. Wick RR、Schultz MB、Zobel J、Holt KE。 2015. Bandage:从头基因组组装的交互式可视化。生物信息学 31:3350-2。112 9. Wheeler TJ、Eddy SR。2013. nhmmer:使用概要 HMM 进行 DNA 同源性搜索。113 生物信息学 29:2487-2489。114 10. Chan PP、Lowe TM。2019. tRNAscan-SE:在基因组序列中搜索 tRNA 基因,第 1-14 页。在 Kollmar M(编辑)的《基因预测:方法和协议》中,116 2019/04/26 编辑,第 1962 卷。Springer New York,纽约。117 11. Lowe TM、Eddy SR。 1997. tRNAscan-SE:一种改进基因组序列中 118 种转移 RNA 基因检测的程序。核酸研究 25:955-964。119 12. Laslett D、Canback B。2004. ARAGORN,一种检测核苷酸序列中的 tRNA 基因和 120 种 tmRNA 基因的程序。核酸研究 32:11-16。121 13. Tillich M、Lehwark P、Pellizzer T、Ulbricht-Jones ES、Fischer A、Bock R、Greiner 122 S。2017. GeSeq - 多功能且准确的细胞器基因组注释。123 核酸研究 45:W6-W11。 124 14. Lohse M、Drechsel O、Kahlau S、Bock R. 2013. OrganellarGenomeDRAW——一套用于生成质体和线粒体基因组物理图谱并可视化表达数据集的工具。核酸研究 41:W575-581。127 15. Lohse M、Drechsel O、Bock R. 2007. OrganellarGenomeDRAW (OGDRAW):128 一个用于轻松生成高质量自定义质体和 129 线粒体基因组图形图的工具。当代遗传学 52:267-274。130
1。Brincin C,Ryan T,Harris K.继发于诱导呕吐的胃食管肠use usepsection,随后在矫正手术后发育,随后发育。J小动画实践。2022; 63(1):72-77。 doi:10.1111/jsap.13395 2。Savides MC,Oehme FW,Nash SL,Leipold HW。狗和猫中单剂量对乙酰氨基酚的毒性和生物转化。毒素Appl Pharmacol。1984; 74(1):26-34。 doi:10.1016/0041- 008X(84)90266-7 3。Croft R,Clementi E,Farmer H,Whalley R,Dunning M,FirthA。在英国急诊诊所(2012-2016)的狗中摄入的Vitis Visifera Intestion的回顾性评估:606例。J兽医新兴罪名(圣安东尼奥)。2021; 31(1):74-79。 doi:10.1111/vec.13025 4。Eulell TE,孔雀Re。使用狗中新型的牙龈给药方法用阿哌汀诱导呕吐。J兽医新兴罪名(圣安东尼奥)。2021; 31(6):795-799。 doi:10.1111/vec.13115 5。Fischer C,Drobatz KJ,Thawley VJ。评估亚丙氨酸的皮下与静脉内给药以诱导狗的诱导。javma。2021; 259(3):283-287。 doi:10.2460/javma.259.3.283 6。Rosenstein NA,Johnson JA,Kirchofer KS。ropinirole具有与阿替宁相似的疗效,用于诱导狗中的呕吐和去除异物和有毒的胃物质。javma。2023; 261(8):1140-1146。doi:10.2460/javma.23.01.0027 7。Dunayer E.雪貂的毒理学。兽医clin North Am Exot Anim实践。2008; 11(2):301-314,VI-VII。2008; 11(2):301-314,VI-VII。doi:10.1016/j.cvex.2008.01.001 8。Willey JL,Julius TM,Claypool Spa,Clare MC。评估和比较盐酸二甲苯和乙酰莫代胺盐酸盐的诱导猫中的eises虫:47病例(2007-2013)。javma。2016; 248(8):923-928。 doi:10.2460/javma.248.8.923 9。 Maxwell KM,Odunayo A,WisselC。使用口服的右美托咪定使用诱导猫的发育作用。 J猫科药。 2024; 26(5):1098612x241248980。 doi:10.1177/1098612x241248980 10。 OBR TD,FRY JK,Lee JA,Hottinger HA。 div>在猫施用3%过氧化氢作为催吐剂的猫中坏死性出血性胃炎。 J兽医新兴罪名(圣安东尼奥)。 2017; 27(5):605-608。 doi:10.1111/vec.126392016; 248(8):923-928。 doi:10.2460/javma.248.8.923 9。Maxwell KM,Odunayo A,WisselC。使用口服的右美托咪定使用诱导猫的发育作用。J猫科药。2024; 26(5):1098612x241248980。doi:10.1177/1098612x241248980 10。OBR TD,FRY JK,Lee JA,Hottinger HA。div>在猫施用3%过氧化氢作为催吐剂的猫中坏死性出血性胃炎。 J兽医新兴罪名(圣安东尼奥)。 2017; 27(5):605-608。 doi:10.1111/vec.12639坏死性出血性胃炎。J兽医新兴罪名(圣安东尼奥)。2017; 27(5):605-608。 doi:10.1111/vec.126392017; 27(5):605-608。 doi:10.1111/vec.12639
单分子实时 (SMRT) DNA 测序技术 (Pacific Biosciences) 生成的长读段是高质量叶绿体 (1, 2) 和线粒体基因组序列组装的起点之一。栽培的葡萄树 Vitis vinifera 极易受到病原体的感染。抗性品种如种间杂交品种‘Börner’ (V. riparia GM183 [母株] V. cinerea Arnold [花粉供体]) 被用作培育优良葡萄品种的砧木。我们从 SMRT 读段中组装并注释了‘Börner’的叶绿体 (cp_Boe) 和线粒体 (mt_Boe) 基因组序列。除非另有说明,所有生物信息学工具均采用默认参数。从品种“Börner”的幼叶中提取基因组 DNA(3),并在 Sequel I 测序仪(1Mv3 SMRT 细胞、结合试剂盒 v3.0、测序化学 v3.0,均来自 PacBio)上进行测序。通过 BLASTN(BLAST 2.7.1)搜索(4)筛选质体或线粒体序列(RefSeq 版本 91),筛选出潜在的质体或线粒体读段。使用的标准如下:读段长度,500 个核苷酸(nt)以上;同一性,70% 以上;查询覆盖率,30% 以上。 292,574 个潜在质体读段(共 2,715,983,671 nt;N50,12,829 nt)和 426,918 个潜在线粒体读段(3,928,350,102 nt;N50,12,624 nt)分别用 Canu v1.7(5)进行组装。每个最长的重叠群都与 V. vinifera 的叶绿体(6)或线粒体(7)基因组序列具有高度相似性。随后,使用 Bandage(8)确认组装正确。手动修剪环状基因组中重叠的末端序列,并将起始序列与葡萄参考序列比对。用 Arrow(SMRT Link 版本 5.1.0.26412)对组装体进行三次完善。最后一轮精炼将起始点移至序列的相反位置。为了帮助注释,根据制造商的说明,使用 peqGOLD 植物 RNA 试剂盒 (Peqlab) 从“Börner”组织中提取 RNA。根据 TruSeq RNA 样品制备 v2 指南,从 1,000 ng 总 RNA 制备索引 Illumina 测序文库。将得到的转录组测序 (RNA-Seq) 文库以等摩尔量汇集,并在 HiSeq 1500 仪器上以 2 100-nt 双端格式进行测序。cp_Boe (161,008 bp;GC 含量,37.4%) 和 mt_Boe (755,068 bp;GC 含量,44.3%) 使用 Web 服务 GeSeq v1.66 进行注释(cp_Boe 的具体设置:
