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精选出版物:1. Burocziova M、Burdova K、Martinikova AS、Kasparek P、Kleiblova P、Danielsen SA、Borecka M、Jenikova G、Janečková L、Pavel J、Zemankova P、Schneiderova M、Schwarzova L、Ticha I、Sun XF、Jiraskova K、Liska V、Vodickova L、Vodicka P、Sedlacek R、Kleibl Z、Lothe RA、Korinek V、Macurek L (2019) 截短的 PPM1D 会损害干细胞对基因毒性应激的反应并促进小鼠结肠中 APC 缺陷型肿瘤的生长。细胞死亡问题,10:818。 2. Burdova K、Storchova R、Palek M、Macurek L (2019) WIP1 促进同源重组并调节对 PARP 抑制剂的敏感性。细胞,8:1258。 3. Jaiswal H、Benada J、Müllers E、Akopyan K、Burdova K、Koolmeister T、Helleday T、Medema RH、Macurek L 和 Lindqvist A (2017) 染色质处的 ATM/Wip1 活性控制 Plk1 重新激活以确定 G2 检查点持续时间。 EMBO J, 36:2161-2176。 4. Kleiblova P、Stolarova L、Krizova K、Lhota F、Hojny J、Zemankova P、Havranek O、Vocka M、Cerna M、Lhotova K、Borecka M、Janatova M、Soukupova J、Sevcik J、Zimovjanova M、Kotlas J、Panczak A、Vesela K、Cervenkova J、Schneiderova M、Burocziova M、Burdova K、Stranecky V、Foretova L、Machackova E、Tavandzis S、Kmoch S、Macurek L、Kleibl Z(2019)鉴定有害的种系 CHEK2 突变及其与乳腺癌和卵巢癌的关系。 Int J Cancer,145:1782-1797。
使用嵌合抗原受体 (CAR) T 细胞进行癌症免疫治疗是一个快速发展的领域,制造这些细胞是一个复杂的过程,需要多个优化步骤。我们已经开发出用于分离、激活和扩增人类 T 细胞的试剂,可用于临床细胞疗法制造。可溶性 ImmunoCult™ 人类 T 细胞激活剂通过交联细胞表面的 CD3 和共刺激分子来诱导 T 细胞活化。然后可以对活化的 T 细胞进行基因改造,随后在无血清和无异种的 ImmunoCult™-XF T 细胞扩增培养基中扩增。在这里,我们介绍了几种使用 ImmunoCult™ 产品的优化策略,以获得高转染效率和最大细胞产量。通过评估 T 细胞的活化动力学并确定最佳转染时间点,可以显著提高 CRISPR/Cas9 和慢病毒介导的基因修饰方法中的转染效率。我们的研究还表明,在激活后第三天将 T 细胞稀释至较低的细胞密度可大大提高细胞活力和累积细胞生长,从而使培养 10 - 12 天后的总人类 T 细胞扩增超过 1000 倍,活力 > 85%。扩增的 T 细胞共表达 CD45RO + CD62L + 。例如,我们应用此处描述的工作流程从健康供体中生成 T 细胞受体 α β (TCR αβ ) 敲除 (KO) T 细胞,敲除效率高达 90%。使用 EasySep™ 人 TCR αβ 耗竭试剂盒可以进一步提高 TCR αβ KO 细胞的纯度。总之,本研究中概述的流程可以轻松快速地实施,以提高 T 细胞制造效率。
1 A. Volta,Philos Trans 2 402(1800) 2 B. Scrosati,Journal of Solid State Electrochemistry 15,1623(2011) 3 EM Erickson、C. Ghanty 和 D. Aurbach,J. Phys. Chem. Lett. 5,3313(2014) 4 D. Aurbach、E. Zinigrad、Y. Cohen 和 H. Teller,Solid State Ionics 148,405(2002) 5 M. Dahbi、F. Ghamouss、F. Tran-Van、D. Lemordant 和 M. Anouti,J. Power Sources 196,9743(2011) 6 A. Manthiram、Y. Fu、S. Chung、C. Zu 和 Y. & Su,Chem. Rev. 114 , 11751 (2014) 7 P. Tan, HR Jiang, XB Zhu, L. An, CY Jung, MC Wu, L. Shi, W. Shyy, 和 TS Zhao Applied Energy 204 780 (2017) 8 S. Whittingham, Science 192, 1126 (1976)。 9 MN Obrovac,和 VL Chevrier,化学。 Rev. 114 , 11444 (2014) 10 P. Poizot, S. Laruelle, S. Grugeon, L. Dupont, JM Tarascon, Nature 407, 496 (2000) 11 JW Choi, D. Aurbach, Nat。马特牧师。 1, 16013 (2016) 12 MN Obrovac 和 VL Chevrier,化学。 Rev. 114 , 11444 (2014) 13 A. Casimir、H. Zhang、O. Ogoke、JL Amine、J. Lu 和 G. Wu, Nano Energy 27 , 359 (2016) 14 B. Liang、Y. Liu 和 Y. Xu, J. Power Sources 267 , 469 (2014) 15 M. Winter、JO Besenhard、ME Spahr 和 P. Novák, Adv. Mater. 10 , 725 (1998) 16 CK Chan、H. Peng、G. Liu、K. McIlwrath、XF Zhang、RA Huggins 和 Y. Cui, Nat. Nanotechnol. 3 , 31 (2008) 17 XH Liu, L.zhong, S. Huang, SX Mao, T. Zhu 和 JY Huang, ACS Nano 6, 1522 (2012) 18 JK Lee, KB Smith, CM Hayner 和 HH Kung, Chem. Commun ., 46 , 2025 (2010) 19 Y. Ma, R. Younesi, RJ Pan, CJ Liu, JF Zhu, BQ Wei, K. Edström, Adv.功能。马特。 26, 6797 (2016) 20 E. Greco 等人,J. Mater。化学。 A 5, 19306 (2017) 21 S. Palumbo 等人,ACS Appl。能源材料。 (2019)
A 部分 — 回答问题 1(必答)问题 1 案例研究 TFL International Ltd (TFLI) 由 Harry Dunne 先生于 1983 年创立。其总部和主要设施位于韦克斯福德镇附近,距离罗斯莱尔渡轮港约 8 公里。在创办这家公司之前,Dunne 先生在英国做了几年卡车司机,后来又在沃特福德郡的一家运输公司工作。该公司非常成功,目前是爱尔兰最大的运输和物流公司之一。他将自己的成功归功于“努力工作和不接受否定的回答”。多年来,许多外部投资者入股了该公司,但 Dunne 家族仍然保留着该公司 60% 的所有权。Dunne 先生三年前退休,不再经营该公司,他的女儿 Sorcha Dunne 女士成为董事总经理。 Dunne 女士拥有丰富的行业经验,作为家族继任计划的一部分,她七年前开始在 TFLI 担任“运营经理”。当然,她在学校和大学期间每年夏天都会在公司工作。Dunne 女士拥有计算机科学学位和 UCD 的工商管理硕士学位。TFLI 全年 365 天为客户提供一系列运输、仓储和辅助服务。该公司在爱尔兰境内、爱尔兰至欧洲大陆以及爱尔兰至英国的所有主要航线上运营。它使用从罗斯莱尔和都柏林港口出发的滚装渡轮航线连接英国和欧洲大陆,并使用直达法国(瑟堡和罗斯科夫)的航线和英国“陆桥”进入大陆。该公司每周有超过 25 次往返爱尔兰的航线,卡车的预订量不断增加。TFLI 提供拖拉机和拖车;或者仅提供拖拉机,客户使用自己的拖车。该公司还为中小企业提供零担货物的拼箱服务。TFLI 拥有 340 辆拖拉机和 980 辆拖车。这些拖拉机的平均使用年限为 4 年。大多数拖车用于运载集装箱、温控拖车或“侧帘式”拖车。该公司还有少量阶梯式拖车和平板拖车。TFLI 于 2008 年决定只收购一个拖拉机品牌。这使 TFLI 能够降低运送维护物料和培训技术人员的成本。其 260 辆拖拉机为 DAF CR 型号,其余 80 辆为 DAF XF 型号。之所以选择这些型号,是因为它们省油,因为燃油可占 TFLI 成本的 30-35%。(目前,由于燃油成本,TFLI 要求客户支付燃油附加费。)TFLI 在其总部和韦克斯福德的主要设施拥有一个大型仓库和物流中心。该仓库面积约为 10,000 平方米,包括 12 个装卸区和恒温储藏室。TFLI 还在英国利物浦附近租赁了一个仓库,在法国瑟堡附近租赁了另一个仓库。这两个仓库的面积大约是韦克斯福德仓库的一半。当 Ms.Dunne 成为运营经理后,她开始了两个大型项目,以实现公司管理的现代化。首先,她负责为公司实施新的 IT 系统。新的 IT 系统集成了客户关系管理、销售处理、会计以及卡车监控和负载跟踪。所有这些“实时”信息使公司能够非常有效地管理卡车车队,例如,确保卡车在 90% 以上的行程中满载。它还使每个客户都可以登录他们的帐户,随时查看他们的货物在哪里。这项服务收到了许多积极的反馈,尤其是来自大客户的反馈。第二个项目涉及获得公认的质量认证,TFLI 现在拥有 ISO:14001 认证和 ISO:9001 认证。除了获得认证之外,这个项目还使 Dunne 女士能够重新构想组织流程,正如她所说,“使公司的管理专业化”。
A Armatol 1 , E Armengaud 1 , W Armstrong 2 , C Augier 3 , FT Avignone III 4 , O Azzolini 5 , A Barabash 6 , G Bari 7 , A Barresi 8 , 9 , D Baudin 1 , F Bellini 10 , 11 , G Benato 12 , M Beretta 13 , L Berg´e 14 , M Biassoni 8 , J Billard 3 , V Boldrini 7 , 15 , A Branca 8 , 9 , C Bro↵erio 8 , 9 , C Bucci 12 , J Camilleri 16 , S Capelli 8 , 9 , L Cappelli 12 , L Cardani 10 , P Carniti 8 , 9 , N Casali 10 , A Cazes 3 , E Celi 12, 17, C Chang 2, M Chapellier 18, A Charrier 19, D Chiesa 8, 9, M Clemenza 8, 9, I Colantoni 10, 20, F Collamati 10, S Copello 21, 22, O Cremonesi 8, RJ Creswick 4, A Cruciani 10, A D'Addabbo 12, 17, G D'Imperio 10, I Dafinei 10, FA Danevich 23, M de Combarieu 19, M De Jesus 3, P de Marcillac 14, S Dell'Oro 8, 9, 16, S Di Domizio 21, 22, V Domp`e 10, 11, A Drobizhev 24,L Dumoulin 18,G Fantini 10,11,M Faverzani 8,9,E Ferri 8,9,F Ferri 1,F Ferroni 10,17,E Figueroa-Feliciano 25,J Formaggio 26,J Formaggio 26,A Franceschi 27 ,L Gironi 8,9,A Giuliani 14,P Gorla 12,C Gotti 8,P Gras 1,M Gros 1,TD Gutierrez 29,K Han 30,EV Hansen 13,KM Heeger 31, DL Helis 1 , HZ Huang 28, 32 , RG Huang 13, 24 , L Imbert 18 , J Johnston 26 , A Juillard 3 , G Karapetrov 33 , G Keppel 5 , H Khalife 14 , VV Kobychev 23 , J Kotila 31, 44 , Yu G Kolomensky 13, 24 , S Konovalov 6 , Y Liu 34 , P Loaiza 14 , L Ma 28 , M Madhukuttan 18 , F Mancarella 7, 15 , R Mariam 14 , L Marini 12, 13, 24 , S Marnieros 14 , M Martinez 35, 36 , RH Maruyama 31 , B Mauri 1 , D Mayer 26 , Y Mei 24 , S Milana 10 , D Misiak 3 , T Napolitano 27 , M Nastasi 8 , 9 , XF Navick 1 , J Nikkel 31 , R Nipoti 7 , 15 , S Nisi 12 , C Nones 1 , EB Norman 13 , V Novosad 2 , I Nutini 8 , 9 , T O'Donnell 16 , E Olivieri 14 , C Oriol 14 , JL Ouellet 26 , S Pagan 31 , C Pagliarone 12 , L Pagnanini 12 , 17 , P Pari 19 , L Pattavina 12 , 37 , B Paul 1 , M Pavan 8 , 9 , H Peng 38 , G Pessina 8 , V佩蒂纳奇 10 , C 皮拉 5 , S 皮罗 12 , DV 波达 14 , T 波拉科维奇 2 , OG 波利舒克 23 , S 波齐 8 , 9 , E 普雷维塔利 8 , 9 , A 普尤 12 , 17 , S 奎塔达莫 12 , 17 , A 雷萨 10 , 11 , R 里佐利 7 , 15 , C 罗森菲尔德 4 , C 鲁斯科尼 12 , V 桑格拉德 3 , J 斯卡帕奇 14 , B 施密特 24 , 25 , V 夏尔马 16 , V 施莱格尔 39 , V 辛格 13 , M 西斯蒂 8 , D 斯佩勒 31 , PT 苏鲁库奇 31 , L 塔↵阿雷洛 41 , O 特利尔1 , C 托梅 10 , VI 特雷季亚克 23 , A 茨姆巴留克 5 , M 维拉斯奎兹 42 , KJ 维特尔 13 , SL 瓦加拉奇 13 , G 王 2 , L 王 34 , B 韦利弗 24 , J 威尔逊 4 , K 威尔逊 4 , LA 温斯洛 26 , M 薛 38 , L 严 28 , J 杨 38 , V 叶夫列缅科 2 , V 尤马托夫 6 , MM 扎里茨基 23 , J 张 2 , A 佐洛塔罗娃 14 , S 祖切利 7 , 43