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建立科罗拉多tick壁虱发烧病毒的反向遗传学系统
具有12个分割的双链RNA基因组的Colorado Tick热病毒（CTFV）是一种致病性arbovirus，可引起人类严重疾病。然而，在分析复制机制和致病性的分析中几乎没有取得进展。这种病毒学约束是由于缺乏CTFV的反向遗传学系统。因此，我们旨在建立系统。最初，在各种细胞系中研究了CTFV复制的功效。CTFV在许多来自不同宿主和器官的细胞类型中生长。随后，用编码编码12个CTFV基因段中每个链的质粒，编码所有CTFV蛋白的表达质粒和vercinia vercinia病毒RNA-RNA粘贴酶转染了稳定表达T7 RNA聚酶的BHK-T7细胞。转染后，将细胞与Vero或HeLa细胞共培养。使用该系统，我们营救了带有肽标记的病毒蛋白的单种植体和重组病毒。此外，还建立了使用表达T7 RNA聚合酶的Expi293F细胞的改进系统，从而使重组报告基因CTFV的产生。总而言之，这些用于CTFV的反向遗传学系统将极大地归因于了解病毒复制机制，发病机理和传染性，最终促进了有理处理和候选疫苗的发展。
为旅客接种登革热疫苗
登革热的当前流行病学状况和免疫学特异性 登革热是由黄病毒科节肢动物传播的病毒（虫媒病毒）引起的，在大多数热带和亚热带国家都有发现。它通过埃及伊蚊雌蚊叮咬传播，在较小程度上也通过白纹伊蚊传播。过去几十年来，全球发病率逐渐上升，2023 年报告病例数为 500 万例。（1）血清流行率随年龄不同而不同，也随世界不同地区不同而不同，甚至在同一个国家内也存在差异。大多数病例发生在南亚、东南亚和拉丁美洲。然而，由于潜在病媒物种的传播（瑞士也有）、人口流动以及全球变暖的影响，流行病学正在发生变化，非洲登革热病例增加，北美和南欧出现本土登革热病例。（2,3）除了发病率的社会经济影响外，登革热还被认为是亚洲儿童死亡的主要原因之一。前往流行地区的旅行者感染登革热的负担很低，但并非微不足道，因为它是从撒哈拉以南非洲以外（亚）热带地区旅行回来后发烧的主要原因。（4）
大学免疫
是什么？西尼罗河病毒是一种节肢动物传播的病毒（arbovirus），最常见于感染的蚊子。西尼罗河病毒会引起发热疾病，脑炎（脑部炎症）或脑膜炎（大脑和脊髓衬里的炎症）。人们如何感染西尼罗河病毒？大多数人被感染蚊子的咬伤感染了西尼罗河病毒。蚊子以感染的鸟类为食时被感染。被感染的蚊子可以将病毒传播到人类和其他动物。在非常少量的病例中，西尼罗河病毒通过输血，器官移植以及在怀孕，分娩或母乳喂养期间从母亲到婴儿传播。谁有受到西尼罗河病毒感染的风险？居住在西尼罗河病毒存在于蚊子中的任何人都会被感染。在所有低48个州（不是在夏威夷和阿拉斯加）中发现了西尼罗河病毒。自1999年以来每年夏天都发生爆发。由于蚊子的暴露更多，在外面工作或参加户外活动的人来说，感染的风险最高。人们多久被感染的蚊子咬伤了多久？孵化期通常为两到6天，但范围为两到14天。在影响免疫系统的某些医疗状况的人中，这个时期可能更长。西尼罗河病毒疾病的症状是什么？
在蚊子-老鼠传播模型中对寨卡病毒样颗粒候选疫苗进行评估
摘要 寨卡病毒 (ZIKV) 传播的主要途径是通过被感染的埃及伊蚊叮咬，当蚊子在吸血期间叮咬脊椎动物宿主的皮肤时就会叮咬宿主。病毒颗粒与蚊子唾液和其他成分的复杂混合物一起注入叮咬部位。其中一些病毒已知在增强宿主的虫媒病毒感染方面起着关键作用，导致病毒血症和/或发病率增加。在临床前动物模型中测试候选疫苗时，通常不会考虑这种媒介衍生的感染贡献。在本研究中，我们使用亚洲和非洲寨卡病毒谱系在蚊子-小鼠传播模型中对一种有希望的寨卡病毒候选疫苗进行了临床前验证。小鼠接种了经过工程改造的寨卡病毒样颗粒，随后通过感染寨卡病毒的埃及伊蚊叮咬进行感染。尽管与通过传统针头注射感染的小鼠相比，蚊子感染的小鼠病毒血症略有增加，但疫苗保护了动物免于患病，并大大降低了病毒血症。此外，在病毒血症高峰期，允许幼稚蚊子以受感染的接种和未接种疫苗的小鼠为食。我们对蚊子病毒滴度的分析表明，疫苗能够抑制病毒从宿主传播到媒介。
搜索与tick相关的，像bronnoya一样的病毒溢出到绵羊
摘要：tick传播疾病是欧洲许多媒介传播疾病的原因。最近，在许多壁虱物种中发现了属于Bunyavirales的新病毒家族的新型病毒。在这项研究中，我们使用元文字组学来检测与从罗马尼亚和法国收集的ixodes相关的新病毒，包括新的病毒。在这些区域第一次鉴定出与野马病毒相关的类似Bunyavirus的病毒。它提供了高水平的氨基酸保护，并在挪威和克罗地亚的I. ricinus tick中鉴定出与野马相关的病毒以及2014年从日本的tick细胞系中分离出的ixodes capapularis bunyvarus。系统发育分析表明，Bronnoya病毒的子层与几个Bunyavirales家族不同，这表明它可以在该顺序内构成一个新的家族。为了确定Bronnoya病毒是否可以构成新型的tick传播arboviruse，这是一种用于检测罗马尼亚野马病毒病毒糖蛋白中抗体的荧光素酶免疫沉淀测定法，用于从暴露于滴答滴答的小反刍动物中筛选出血清中的血清。未检测到阳性血清，表明该病毒可能无法感染小型反刍动物。这项研究代表了对哺乳动物感染的首次血清学研究，这是bronnoya样病毒的第一步，也是鉴定出tick传播arbovirus的潜在新出现的第一步。
链霉菌属的杀虫潜力。反对登革热...
艾德斯·埃及林恩。（Diptera：culicidae）是登革热和基孔肯尼亚等最常见的引起疾病的arbovirus的载体之一。缺乏这些疾病的疫苗以及当前增加杀虫剂耐药性的问题加剧了寻找控制载体种群的新颖和有效方法的需求。因此，本文旨在研究菲律宾链霉菌与AE的生物学活性。埃及作为管理这些蚊子种群的潜在生物学剂。在测试生物学活性之前，使用其16S rRNA序列根据形态，文化和分子表征确定了八个放线菌分离株。生成的核苷酸序列的BLASTN结果显示出98–100％与不同链霉菌物种的相似性，并用GenBank登录号MZ317443 – MZ317450分配。在八个分离株中，针对3至5天的雌性艾迪斯埃及埃及成年人的CDC瓶生物测定法显示，CGS C13（92.68％），DK 5-10（85.53％）（85.53％）和CGS B11（81.91％）表现出最高的成人活性对照（均表现出较高的成人活动）。LC 50通过剂量反应生物测定测定表明，CGS B11的活性最高（2.838 ppm），其次是DK 5-10（6.083 ppm）和CGS C13（519.281 ppm）。这是关于这些链霉菌物种对AE的杀虫活性的第一份报告。埃及。
尽管有蚊子特异性病毒素
摘要在节肢动物相关的微生物群落中，昆虫特异性病毒（ISV）普遍存在，但由于其自然宿主以外的有限感染性而受到了研究。但是，ISV可能在调节蚊子种群和影响节肢动物传播病毒传播方面起着至关重要的作用。一些研究表明，大多数ISV组成的蚊子中的核心病毒素。采用单个蚊子元素IC，我们全面介绍了比利时本地和侵入性蚊子的病毒素。这种方法允许准确的宿主物种确定，病毒和沃尔巴氏菌的流行评估以及新型病毒的鉴定。与我们的期望相反，在比利时的Culex蚊子中未观察到大量的核心病毒素。在这方面，我们警告严格地定义蚊子核心病毒，并鼓励对其他研究的细微解释。尽管如此，我们的研究确定了45种病毒，其中28个是新颖的病毒，丰富了我们对蚊子病毒瘤和ISV的理解。我们表明，这项研究中的蚊子病毒蛋白是特定物种的，并且较少依赖于来自同一物种的蚊子的位置。此外，由于以前已经观察到沃尔巴奇（Wolbachia）会影响丁香病毒的传播，因此我们报告了比利时蚊子中沃尔巴基亚（Wolbachia）的普遍性，并检测了几种沃尔巴奇（Wolbachia）移动遗传元素。观察到的患病率在Culex Pipiens复合体的成员中为83％至92％。
蛋白质二硫键异构酶抑制剂 3-甲基毒黄素可抑制基孔肯雅病毒
基孔肯雅病毒 (CHIKV) 是基孔肯雅热的病原体，基孔肯雅热是一种（重新）出现的虫媒病毒感染，可导致严重且通常持续性的关节炎，同时也是全球范围内严重的健康问题，目前尚无抗病毒药物。尽管过去十年来一直致力于识别和优化新的抑制剂或重新定位现有药物，但没有一种化合物进入 CHIKV 的临床试验，目前的预防措施是基于媒介控制，但在控制病毒方面效果有限。我们为纠正这种情况而做出的努力始于使用复制子系统筛选 36 种化合物，最终通过基于细胞的测定法确定了具有抗 CHIKV 活性的天然产物衍生物 3-甲基毒黄素（在 Huh-7 细胞中 EC 50 200 nM，SI = 17）。我们还对 17 种病毒进行了 3-甲基毒黄素的筛选，结果表明它仅对黄热病病毒具有额外的抑制作用（在 Huh-7 细胞中 EC 50 370 nM，SI = 3.2）。我们还表明 3-甲基毒黄素在体外具有出色的人体和小鼠微粒体代谢稳定性、良好的溶解性和高 Caco-2 通透性，并且不太可能是 P-糖蛋白底物。总之，我们证明 3-甲基毒黄素具有抗 CHIKV 活性、良好的体外吸收、分布、代谢和排泄 (ADME) 特性以及良好的计算物理化学特性，可能代表未来优化开发这种病毒和其他相关病毒抑制剂的宝贵起点。
vYF 下一代黄热病疫苗不会在蚊子中传播
最有效的虫媒病毒疫苗之一是 1937 年研发的针对黄热病 (YF) 的 YFV-17D 减毒活疫苗。这种疫苗在蚊子体内复制能力较差，因此不会通过媒介传播。疫苗短缺主要是由于基于无病原体胚胎卵的生产受限，这促使赛诺菲转向基于生物反应器中连续细胞系培养的最先进工艺的替代方法。vYF-247 是基于 17D 的下一代减毒活疫苗候选物，适合在无血清 Vero 细胞中生长。对于新疫苗的开发，世卫组织建议记录蚊子的传染性和复制能力。我们用 vYF-247 疫苗感染埃及伊蚊和白纹伊蚊，首先与 YF-17D-204 参考赛诺菲疫苗（Stamaril 和 YF-VAX）和临床人分离株 S-79 进行比较，后者以 6.5 Log ffu/mL 的滴度提供在血粉中，其次与临床分离株进行比较，滴度增加至 7.5 Log ffu/mL。在感染后的不同天数，通过分别量化蚊子腹部、头部和胸部或唾液中的病毒颗粒来评估病毒的复制、传播和传播。虽然无法将 vYF-247 与参考疫苗进行比较以得出显著结果，但我们发现，与最高接种剂量的临床菌株 S-79 相比，vYF-247 并未通过两种伊蚊物种（无论是实验室菌株还是现场收集的种群）传播。再加上接种疫苗者体内检测到的病毒血症水平低于或等于低水平，因此，蚊子传播 vYF-247 疫苗的可能性极小。
具有双片段基因组的裂谷热病毒候选减毒活疫苗的免疫原性
裂谷热病毒 (RVFV) 是一种新出现的虫媒病毒，可影响反刍动物和人类。裂谷热病毒在非洲和阿拉伯半岛引起严重且反复的疫情，并且很有可能在新的地区出现。尽管有多种 RVFV 兽用疫苗可用于流行地区，但目前尚无获准用于人类的疫苗；因此，需要开发和评估新疫苗。在此，我们报告了一种 RVFV 减毒活重组疫苗候选物，该疫苗基于先前描述的有条件许可的 MP12 疫苗的基因组重组。开发减毒活 RVFV 疫苗有两种通用策略，一种是连续传代野生型 RVFV 菌株以选择减毒突变体，例如 Smithburn、Clone 13 和 MP12 疫苗株。第二种策略是利用反向遗传学通过在病毒基因组中引入缺失或插入来减毒 RVFV 菌株。本报告中描述的新型候选疫苗包含一个双片段基因组，该基因组缺少病毒中片段 (M) 和两个毒力基因（非结构性小片段和非结构性中片段）。该候选疫苗名为 r2segMP12，在杂交 CD-1 小鼠中评估了其产生 RVFV 中和抗体的能力。将 r2segMP12 候选疫苗诱导的免疫反应与 rMP12 亲本株疫苗诱导的免疫反应直接进行比较。我们的研究表明，在相同疫苗接种滴度下，使用 10 5 个空斑形成单位的 r2segMP12 候选疫苗单次免疫可引发比 rMP12 疫苗更高的中和抗体反应，且无需加强。