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栽培番茄（Solanum lycopersicum）无DNA基因组编辑及原生质体再生方法的建立
摘要 关键信息 我们建立了一种基于核糖核蛋白的CRISPR/Cas9无DNA基因组编辑方法在栽培番茄中应用，并获得了高突变率的转染原生质体再生突变植株。 摘要 近年来，基因组编辑作为一种研究和育种方法的应用为许多作物的性状改良提供了许多可能性。在栽培番茄（Solanum lycopersicum）中，迄今为止只建立了携带CRISPR/Cas9试剂的稳定的农杆菌介导转化方法。转染原生质体芽再生是基于核糖核蛋白的CRISPR/Cas9无DNA基因组编辑方法在栽培番茄中应用的主要瓶颈。在本研究中，我们报道了利用CRISPR/Cas9技术实现栽培番茄的无转基因育种方法，包括优化原生质体分离和克服转染原生质体芽再生障碍。结果表明，含0.1 mg/L IAA和0.75 mg/L玉米素的芽再生培养基为最佳激素组合，再生率可达21.3%。原生质体分离转染4个月后，成功获得高突变率的再生植株。获得的110株再生M 0 植株中，有35株（31.8%）同时发生SP和SP5G基因突变，SP或SP5G基因中至少一个等位基因的编辑效率高达60%。
从培养皿到汉堡菜单 - 栽培肉类和乳制品的平台过程设计
预计食品需求会增加，我们需要同时减少气候足迹，因此必须更有效地利用当前资源。细胞农业（CA）通过生产动物来源的蛋白质和成分而不涉及动物，从而提供了解决方案，从而解决了环境问题并改善动物福利。该博士学位项目是荷兰国家增长基金（NGF）CA核心研究计划的一部分，该计划由荷兰蜂窝农业（CAN）基金会和荷兰农业部协调。它专注于设计栽培肉类（CM）和培养的乳制品（CD）平台工艺。通过在受控环境中培养哺乳动物细胞而产生的栽培肉有望与传统肉相比会减少环境影响。同样，通过精确发酵产生的培养乳制品可以从重组蛋白质中产生乳制品。通过将这些产品的生产方法标准化为平台流程，开发和制造是简化和加速的。
长期培养的口服粘膜上皮移植，用于慢性囊肿疾病中的前虫重建
抽象背景/旨在研究培养的口腔粘膜上皮移植（彗星）的长期结局，以在患有慢性囊肿性疾病的眼睛中进行延伸。方法这项回顾性队列研究涉及16例接受Symblepharon彗星释放和FORNIX重建的患者的眼睛，2002年6月至2008年12月之间。平均术后随访期为102.1±46.0个月（范围：32–183个月）。The treated cicatrising disorders included ocular cicatricial pemphigoid (OCP, five eyes), thermal/chemical injury (three eyes) and other chronic diseases (seven eyes; including recurrent pterygium (two eyes), Stevens-Johnson syndrome (one eye) and graft-versus-host disease (one eye)).在手术前，术后1、4、12和24周评估了眼表面的外观，然后根据先前报道的评分系统每年评估。主要结局指标包括通过Kaplan-Meier生存曲线分析的整体和疾病特异性的FORNIX重建成功概率。SymblePharon/Fornix缩短了术后24周的复发及其与长期手术成功的关系。术后5年的结果，平均值±SD总结恢复成功概率为79.6％±10.7％，热/化学损伤的成功概率分别为100％和53.3％±24.8％（p = 0.53，对数范围测试）。在术后24周（13眼）的无疾病复发组中，3年的成功概率明显高于疾病反应组（三只眼睛）（分别为100％和33.3％和33.3％和33.3％±27.2％）（P = 0.0073，对数范围测试）。结论彗星被发现对于慢性囊化的眼睛中的象征性释放和长期洞缩式重建是安全有效的。尽管5年的成功概率差异取决于潜在疾病，但术后24周的眼表面出现是预测长期结局的一个因素。
Bos Taurus（Angus）细胞培养的栽培“小牛排”的分类为一种新食物
FSVO检查了提交的文件，并确定了Bos Taurus（Angus）细胞培养的栽培“小牛排”的新食物状况。这些文件显示，在瑞士或欧盟成员国1997年5月15日之前，该食品不用于人类消费，并根据第15条第15款。第1条关于食品和公用事业条款的条例（Fuao; SR 817.02），因此属于新食物的定义，尤其是在类别中：
脱细胞植物支架促进猪骨骼肌组织工程培养的肉类生物制造
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通过编辑非编码区域提高两种常规栽培水稻品种的白叶枯病抗性
摘要：xa13是一个隐性多效基因，对水稻抗病性起正向调控作用，对水稻育性起负向调控作用，严重制约了其在水稻育性中的应用。本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术删除Xa13基因启动子部分序列，包括病原菌诱导表达元件，使编辑后的启动子区水稻失去病原菌诱导基因表达能力，但不影响叶片和花药中背景基因的表达，从而获得抗病性和正常产量。研究还筛选出一株删除目的序列、分离T 1 代（无转基因株系）外源转基因片段的抗病、育性正常植株家系，并对T 2 代水稻的重要农艺性状进行了研究。结果表明，添加/不添加外源DNA的T 2 代水稻在抽穗期、株高、单株穗数、穗长和田间结实率等方面与野生型均无统计学差异。成功转化2个重要常规水稻品种空育131（KY131，耿/粳稻）和黄华占（HHZ，鲜/籼稻），并获得抗病、丰产材料，是目前我国2个经过改良后可直接用于生产的重要常规水稻品种。转基因水稻（KY-PD和HHZ-PD）叶片中Xa13基因在病原菌侵染后没有被诱导表达，表明此方法可普遍有效应用，有利于推动xa13这一隐性抗病多效基因在水稻抗白叶枯病方面的实际应用。通过编辑基因非编码区调控基因表达的研究，为今后开展分子设计育种提供了新思路。
野生和栽培葡萄树之间的表观遗传差异凸显了 DNA 甲基化在作物驯化过程中的贡献
摘要 12 葡萄的驯化过程促进了所需性状的固定。与有性生殖相比，通过扦插进行葡萄的无性繁殖更容易保存这些基因型。尽管如此，即使是无性繁殖，由于基因组中潜在的遗传体细胞突变，同一葡萄园内也常常会出现不同的表型。然而，这些突变并不是影响表型的唯一因素。除了体细胞变异外，表观遗传变异也被认为是调节驯化过程中获得的表型变异的关键因素。这些表观等位基因的出现可能对葡萄的驯化产生了显著影响。本研究旨在调查驯化过程对栽培葡萄甲基化模式的影响。对栽培和野生种质进行了低代表性亚硫酸盐测序。结果显示，栽培葡萄 24 的甲基化水平高于野生葡萄。野生和栽培葡萄之间的差异甲基化分析共鉴定出 9955 26 个差异甲基化胞嘧啶，其中 78% 在栽培葡萄中高甲基化。功能分析表明，核心甲基化基因（在野生和栽培种质中持续甲基化的基因）与应激反应和萜类/异戊二烯类代谢过程有关。而呈现差异甲基化的基因与靶向过氧化物酶体的蛋白质、乙烯 31 调节、组蛋白修饰和防御反应有关。此外，我们的研究结果 32 表明，环境诱导的 DNA 甲基化模式至少部分受野生葡萄种质的原产地引导。总的来说，我们的研究结果 34 揭示了表观等位基因在葡萄驯化历史中可能发挥的关键作用。36
考虑耕地肉类的考虑：潜在的细胞来源，潜在的分化和永生策略以及甲壳类动物和其他动物模型的经验教训
抽象栽培的甲壳类肉（CCM）是一种直接从干细胞中创建高价值的虾，龙虾和螃蟹产品的手段，从而消除了养殖或捕捞活动物的需求。传统的甲壳类企业在管理过度捕捞，污染和变暖气候方面面临的压力增加，因此CCM可以提供一种方法，以确保随着全球对这些产品的需求的增长，CCM可以提供足够的供应。为了支持CCM的发展，本评论简要详细介绍了迄今为止的甲壳类细胞培养工作，然后再解决目前对甲壳类肌肉发育的了解，尤其是所涉及的分子机制，以及这可能与最近在脊椎动物物种中耕种肉类生产的作品有关。认识到目前缺乏可用于建立CCM培养物的细胞系，我们还考虑了可以非属于非属于的原发性干细胞来源，包括易于释放和重新生成的四肢组织，以及在循环血淋巴中推定的干细胞。分子方法诱导了肌源性分化和推定干细胞的永生化。最后，我们评估了CCM研究人员，尤其是抗体的工具的当前状态，并提出了解决现有短缺的途径，以查看现场的进展。
评估从açai（euterpe oleracea）单一文化中种植的无吻蜜蜂（Scaptotrigonaaff。postica）蜂蜜分离的细菌的抗菌能力
摘要：许多抗菌化合物一直在寻求保护人体免受致病性微生物感染的影响。最近，由于不当使用抗生素，病原体对现有药物的抗性具有相当大的增长。在本研究中，从亚马逊本地的无刺蜜蜂蜂蜜中分离出的细菌，称为Scaptotrigona Aff。后ica和apis mellifera用于确定其潜在的抗菌特性，并表征了用分离细菌培养的培养基。结果表明抑制了九种分离株。在这些分离株中，SCA12，SCA13和SCA15显示出与万古霉素相似的抑制活性，该活性被用作阳性对照。SCA13菌株用针对已测试病原体的抗菌提取物获得了最佳结果。该物种被鉴定为粪肠球菌，其冻干提取物的特征是温度，pH和胰蛋白酶，其中它们表现出抗菌活性。这项工作表明，从无刺的蜜蜂蜂蜜（Scaptotrigona Aff）中分离出来的细菌。postica，有可能产生抗菌物质。
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