Joyce KS Poon、c、d 和 Michael L. Roukes a、b、∗ a 加州理工学院,物理、数学和天文学分部,美国加利福尼亚州帕萨迪纳市 b 加州理工学院 Kavli 纳米科学研究所,美国加利福尼亚州帕萨迪纳市 c 多伦多大学,电气与计算机工程系,加拿大安大略省多伦多市 d 马克斯普朗克微结构物理研究所,德国哈雷市 e 大学健康网络,Krembil 研究所,临床和计算神经科学分部,加拿大安大略省多伦多市 f 先进微铸造有限公司,新加坡 g 新加坡科技研究局(A*STAR),微电子研究所,新加坡 h 多伦多大学,多伦多西部医院,神经外科分部,外科部,加拿大安大略省多伦多市 i 多伦多大学,生物材料与生物医学工程研究所,加拿大安大略省多伦多市
在活细胞中基因组基因局的标签为研究基因组空间组织和基因相互作用提供了视觉证据。CRISPR/DCAS9(群集定期间隔短的短倾向重复序列/停用CAS9)通过DCAS9/SGRNA/荧光蛋白复合物与靶基因组基因座中重复序列的结合来标记基因基因。但是,核中存在许多荧光蛋白通常会引起高背景荧光读数。本研究旨在通过重新设计由DCAS9-Suntag-NLS(目标模块)和SCFV-SFGFP-NLS(信号模块)组成的当前CRISPR/DCAS9- SUNTAG标签系统来限制进入核的荧光模块的数量。我们删除了信号模块的核位置序列(NLS),并将EGFP的两个副本插入信号模块中。核的荧光强度与细胞质的荧光强度(N/C比)降低了71%,信号与背景(S/B比)的比率增加了1.6倍。该系统可以稳定地标记随机选择的基因组基因局基因局基因组基因座,少于9个重复序列。
抽象的广场荧光显微镜用于监测大脑神经元种群的峰值。广场荧光可以起源于皮质中所有深度的指标分子,而索马塔,树突和轴突的相对贡献通常是未知的。在这里,我模拟了广场照明和荧光收集,并确定几种GCAMP小鼠系的荧光的主要来源。散射强烈影响照明和收集。一个结果是,照明强度最大〜300-400 m以下,而不是在大脑表面。另一个是从皮质深处的荧光可能延伸到脑表面3–4 mm的直径,严重限制了横向分辨率。在许多小鼠线中,有助于荧光的组织体积延伸到大多数表面位置的整个皮层和荧光深度是多个皮质柱的加权平均值,通常是一个以上的皮质区域。
透明样品的荧光量子产率C.Würth#,M。Grabolle#,J。Pauli,M。Spieles和U. Resch-Genger BamBundesanstaltfür物质FORSCHUNG UND - PRüfung,Richard-Willstaetter-Str。11,D-12489德国柏林#:两位作者同样贡献了MS通讯作者Ute Resch-Genger博士Ute Resch-Genger博士,联邦材料研究与测试研究所(BAM),第1.10级生物探测器,Richard-Willstaetter-STR。11,D-12489柏林,德国,电话:0049-(0)30-8104 1134,传真:0049-30-30-8104 1157,电子邮件:ute.resch@bam.de摘要 - 发光技术是生活和材料史上最广泛使用的检测方法。这些方法的核心是多种荧光报道,即简单染料,荧光标签,探针,传感器以及来自不同荧光团类别的开关,范围从小有机染料和金属离子复合物,量子点和量子点和上的纳米晶体,到不同尺寸的荧光量或实验室的液体 - 型号或实验室。荧光团比较的关键参数是荧光量子产率(φF):直接度量吸收光转化为发射光的效率。在此协议中,我们描述了使用光学方法对透明溶液中荧光团相对和绝对确定的相对和绝对确定的程序,并解决了不确定性和荧光团类别特定挑战的典型来源。对于φF的相对确定,使用常规荧光光谱仪分析样品。为了绝对确定φF,使用了校准的独立集成球体设置。为了减少针对相对测量的标准相关不确定性,我们引入了CA波长区域的八个候选量子产量标准标准。350 nm至950 nm由我们评估的商业和定制设计的仪器。使用这些方案和标准,可以在2小时内实现5%至10%的不确定性。简介
背景:切除的完整性是卵巢癌患者的关键预后指标,而肿瘤靶向荧光图像引导手术 (FIGS) 的应用提高了细胞减灭术中腹膜转移的检测率。CD24 在卵巢癌中高表达,已被证明是肿瘤靶向成像的合适生物标志物。方法:研究了高级别浆液性卵巢癌 (HGSOC) 的细胞系和异质患者来源的异种移植 (PDX) 肿瘤样本中的 CD24 表达。将单克隆抗体 CD24 与 NIR 染料 Alexa Fluor 750 结合并评估最佳药理参数 (OV-90,n = 21) 后,对原位 HGSOC 转移性异种移植 (OV-90,n = 16) 进行了实时反馈的细胞减灭术。将术中 CD24 靶向荧光引导的影响与单独的白光和触诊进行了比较,并在术后监测疾病复发(OV-90,n = 12)。在四种临床注释的转移性 HGSOC 原位 PDX 模型中进一步评估了 CD24-AF750,以验证术中引导的转化潜力。结果:与原位 HGSOC 异种移植中的标准白光手术相比,CD24 靶向术中 NIR FIG 显着(47.3%)改善了肿瘤检测和切除,并减轻了术后肿瘤负担。CD24-AF750 允许识别四种 HGSOC PDX 中肉眼无法检测到的微小肿瘤病变。解读:CD24 靶向 FIG 具有转化潜力,可作为改善卵巢癌减瘤手术的辅助手段。资金:本研究由 H2020 计划 MSCA-ITN [675743]、Helse Vest RHF 和 Helse Bergen HF [911809、911852、912171、240222、911974、HV1269] 以及挪威癌症协会 [182735] 和挪威研究理事会通过其卓越中心资助计划 [223250、262652] 资助。© 2020 作者。由 Elsevier BV 出版 这是一篇根据 CC BY-NC-ND 许可协议开放获取的文章。(http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)
摘要:提出并评估了一种超低水平光检测模块——时间相关光子计数器,用于荧光分析。时间相关光子计数器采用硅光电倍增管作为光子计数传感器,结合泊松统计算法和双时间窗技术,可以准确计数光子数。时间相关光子计数器与时间相关单光子计数技术兼容,可以记录非常微弱的光信号的到达时间。利用这种低成本、紧凑的仪器分析了异硫氰酸荧光素的强度和寿命,获得了16 pg/ml的检测限,线性动态范围从2.86 pg/ml到0.5 µ g/ml,测得异硫氰酸荧光素的寿命为3.758 ns,与先进的商用荧光分析仪的结果一致。时间相关的光子计数器可能在即时诊断等应用中很有用。
西伯利亚野黑麦 (Elymus sibiricus L.) 是一种异源四倍体物种,是一种原产于温带地区的潜在优质多年生牧草作物。我们利用代表 10 个重复序列的荧光结合寡核苷酸,包括 6 个微卫星重复序列、2 个卫星重复序列和 2 个核糖体 DNA,通过连续荧光原位杂交和基因组原位杂交分析来表征 E . sibiricus 染色体。我们的结果表明,微卫星重复序列 ( AAG ) 10 或 ( AGG ) 10 、卫星重复序列 pAs1 和 pSc119.2 以及核糖体 5S rDNA 和 45S rDNA 是唯一染色体的特异性标记。通过进一步的多态性筛选,在不同 E .西伯利亚小麦品种的基因组多态性分析采用 (AAG) 10、Oligo-pAs1 和 Oligo-pSc119.2 探针混合物。不同基因组和不同个体染色体之间的染色体多态性各不相同。特别是在种群内和种群间鉴定出 H 基因组中两种不同形式的 E 染色体。本文讨论了这些结果对西伯利亚小麦基因组研究和育种的意义,以及改进基于荧光原位杂交的核型分析的新方法。
随着人们认识到龋齿的发生发展依赖于病理因素和保护因素之间的平衡,当病理因素占主导地位时龋齿就会发展,而当保护因素占主导地位时龋齿则可以被阻止或逆转,龋齿病变的治疗原则逐渐转向对牙釉质病变进行预防性治疗,这样病变才有机会逆转。1–3 为了实施预防性治疗,需要在早期发现龋齿病变。然而,由于龋齿的解剖位置,早期发现龋齿可能很困难,尤其是邻面龋齿。研究发现,75% 的邻面病变位于接触区,25% 位于接触区下方,这使得视觉检测变得复杂。4 因此,当弱化的边缘脊破裂并形成空洞时,通常会检测到邻面病变。5 因此,仅通过目视检查可能会低估邻面龋病的数量。射线检查是另一种检测邻面病变的常用方法,但众所周知,射线检查通常会在晚期阶段检测到龋病,而这些龋病已经超出了再矿化干预的范围。此外,使用电离辐射会使患者面临风险,因此需要考虑替代方法来检测邻面病变。由于目视检查在检测早期邻面龋病方面的表现不够,因此已经开发了增强的视觉评分系统。其中之一是国际龋齿检测和评估系统 (ICDAS),大量研究报告称,该系统是一种准确且可重复的方法,可以检测早期病变,也可以检测病变的纵向变化。6–8