hal是一个多学科的开放访问档案,用于存款和传播科学研究文件,无论它们是否已发表。这些文件可能来自法国或国外的教学和研究机构,也可能来自公共或私人研究中心。
1 悉尼大学悉尼传染病研究所,澳大利亚悉尼 2 韦斯特米德医学研究所,澳大利亚悉尼 3 悉尼大学药学院,澳大利亚悉尼 4 韦斯特米德医院药学系,澳大利亚悉尼 5 国家真菌学参考中心,SA Pathology,澳大利亚阿德莱德 6 卡洛斯三世健康研究所,西班牙马德里 7 维罗纳大学,意大利维罗纳 8 医学教育与研究研究生院医学微生物学系,印度昌迪加尔 9 伦敦大学圣乔治感染与免疫研究所,英国伦敦,埃克塞特大学 MRC 医学真菌学中心 10 古卢大学医学院医学微生物学与免疫学系,乌干达古卢 11 世界卫生组织抗菌素耐药性司全球协调与伙伴关系部影响力倡议与研究协调组,瑞士日内瓦 12抗菌素耐药性特别规划,传染病和环境健康决定因素,泛美卫生组织,美国华盛顿特区 13 世界卫生组织,东南亚区域办事处,印度新德里 14 世界卫生组织被忽视的热带病控制司,瑞士日内瓦 15 世界卫生组织非传染性疾病司,瑞士日内瓦 16 莫纳什大学阿尔弗雷德健康/传染病系,澳大利亚墨尔本 *通讯作者。Justin Beardsley,MBChB,FRACP,PhD,悉尼大学,悉尼传染病研究所,Westmead 2145,澳大利亚。电话。:+ 61 2 9351 2222;电子邮件:justin.beardsley@sydney.edu.au † 共同最后作者。
转染的 Bge 细胞以评估 Cas9 的表达(图 1b)。使用两对引物进行 PCR,以对照或 pCas-BgAIFx4 转染的 Bge 细胞的 cDNA 作为模板,一对引物针对 Cas9,另一对针对 BgActin,后者是 B. glabrata 的肌动蛋白基因,用作参考基因(图 1b、c)。转染后 24 小时检测到瞬时 pCas-BgAIFx4 转染的 Bge 细胞中编码 Cas9 的转录本,并在测定的 9 天内保持表达。在 pCas-BgAIFx4 转染的细胞中观察到 Cas9 mRNA(277 bp)的特异性扩增子,但在未转染的细胞中没有观察到(图 1c)。我们的研究结果支持了先前的研究结果,即揭示了 Bge 细胞中由荧光素酶驱动的 CMV 启动子 [60]。对照参考 BgActin 的表达在 214
