大豆突变体 lox3 具有 Lox3 基因座中的突变等位基因,是利用 CRISPR/Cas9 系统通过定点诱变生成的。为了评估种子中 LOX3 活性降低的影响,检测了 lox3 在温度胁迫下的发芽能力。在所有温度条件下,lox3 种子都比野生型种子发芽更早。随着温度的升高,这种差异变得更加明显。随后,为了模拟种子的长期储存,通过将种子暴露在高温高湿条件下进行老化处理。虽然大多数野生型种子在老化处理后没有发芽,但大约 80% 的 lox3 种子发芽了。这表明 LOX3 活性的降低导致种子对长期储存的耐受性增强。为了阐明生理机制,对老化处理后的种子进行了测量,测量了通常用于评估脂质过氧化的丙二醛 (MDA) 含量。lox3 样品中的 MDA 含量低于野生型样品。这一结果表明 lox3 种子中的脂质过氧化降低了。为了评估基因表达水平,对 lox3 和野生型样本进行了转录组分析。转录组分析显示,野生型种子中应激反应基因的表达增加。这表明野生型种子比 lox3 种子受到的应激更严重。因此,我们证明种子中 LOX 活性的降低可能即使在高温胁迫或种子长期储存下也能保持发芽能力。日本大豆蛋白研究 23,35-40,2020。
1 Instituto Agronômico (IAC), Centro de Grão e Fibra, Campinas, SP, Brasil 2 Embrapa Trigo, Passo Fundo, RS, Brasil 3 Syngenta Proteção de Cultivos LTDA, São Paulo, SP, Brasil 4 Embrapa Soja, Londrina, PR, Brasil Corresponding author: V. Carpentieri-Pipolo电子邮件:valeria.carpentieri-pipolo@embrapa.br genet。mol。res。22(3):GMR19145于2023年3月8日收到2023年6月29日,于2023年8月24日发表doi http://dx.doi.org/10.4238/gmr19145摘要。kunitz胰蛋白酶抑制剂(KTI)影响蛋白质的消化率和脂氧合酶同工酶(负责与大豆基食品相关的异味)是大豆种子中存在的两个不良因素。这些不愉快的因素通常被热处理灭活。但是,热处理并不能完全消除这些因素。此外,它可能会降低蛋白质溶解度,并可能产生额外的能源成本。遗传消除这些因素可能是热处理的替代方法。这项研究旨在选择种子中没有KTI和Lipoxygoganase同工酶的大豆线。通过越过BRS 213品种,该品种显示出低脂氧合酶活性,而BRS 155(KTI缺乏品种),获得了研究中的种群。f 2:3杂种种群被选择并使用DNA标记来分析,以鉴定编码KTI和三种脂氧合酶(LOX1,LOX2和LOX3)的隐性等位基因。f 2:3隔离人群通过KTI特异性标记成功识别,效率为100%。但是,
