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供应链管理白皮书
在开发电源和相关的电力解决方案方面，这种压力最终可能会被汇入电力电子工程师或类似的团队利益相关者，具有一阶责任以交付系统电力基础设施。他们必须在面对这种压力下保持强大，并保持警惕，坚持系统建筑师和其他设计合作伙伴坐下来，进行必要的讨论，除了太多的“ TBD”（待定的）占位符之外的占位符。这并不是说应该在项目发作时对最终质量文档有期望，随着发展的进展，该文件肯定应该进行调整和优化，但是即使是规格草案也不应该如此广泛和/或模糊，以抑制（高质量，及时）的发展。许多功能要求和认证都不在电源解决方案设计师/所有者的手中，即使他们对成功提供解决方案负有最终责任。示例包括衍生指南（即- IPC-9592，内部设计指南等。），专业认证（即- EN51055，80plus，EMC类A/B，DOE级别VI，NEB等。），具有系统SW/FW的数字接口以及完整的环境操作场景（Inc。兼容高程和污染/恶劣环境）。其中许多不仅是贴纸或橡皮图章，可以在组装时完成美学，而且会对操作参数产生重大影响（即- 最低效率要求，更宽的工作温度，更健壮的冲击/氛围/电气承受等等）可以决定从第1天开始设计的设计。关键要点是与其他利益相关者不情愿，而这些利益相关者缺乏对他们要求的理解/欣赏，并认为这些问题可以在开发过程中得到很长时间，因为当事情出错时，任何人都记得所有人的“权力人”是“权力人”对任何损害成功运输和现场部署的事物负责。
癌症
1 利物浦眼科肿瘤研究组，利物浦大学分子与临床癌症医学系，利物浦 L7 8TX，英国；antonio.eleuteri@gmail.com（AE）；hkalirai@liverpool.ac.uk（HK）；heinrich.heimann@gmail.com（HH）；rumanahussain@hotmail.com（RH）；bs0u81b1@student.liverpool.ac.uk（CJH）；secoupland@liverpool.ac.uk（SEC）2 皇家利物浦与布罗德格林大学医院 NHS 信托医学物理与临床工程系，利物浦 L69 3GA，英国 3 利物浦大学生物统计学系，利物浦 L69 3GL，英国；ljbcmshe@liverpool.ac.uk 4 利物浦大学利物浦生物创新中心生物库，利物浦 L7 8TX，英国； mtraynor@liverpool.ac.uk 5 莱顿大学医学中心眼科系，2333 ZA 莱顿，荷兰；mjjager@lumc.nl（MJJ）；M.Marinkovic@lumc.nl（MM）；GPMLuyten@lumc.nl（GPML）；M.Dogrusoez@lumc.nl（MD） 6 鹿特丹眼部黑色素瘤研究组，伊拉斯姆斯大学医学中心，3008 AE 鹿特丹，荷兰；e.kilic@erasmusmc.nl（EK）；a.deklein@erasmusmc.nl（AdK）；knsmit@erasmusmc.nl（KS）；n.vanpoppelen@erasmusmc.nl（NMvP） 7 加利福尼亚大学眼部肿瘤学、玻璃体视网膜疾病和外科，旧金山，CA 94143，美国； bertil.damato@gmail.com (BED); Armin.Afshar@ucsf.edu (AA) 8 牛津眼科医院，牛津大学纽菲尔德临床神经科学系，牛津约翰·拉德克利医院，牛津 OX3 9DU，英国 9 罗斯托克大学眼科系，D-18057 罗斯托克，德国；rudolf.gutho@med.uni-rostock.de (RFG)；b_scheef@gmx.de (BOS)；vinodh.kakkassery@uni-luebeck.de (VK) 10 吕贝克大学眼科系，D-23538 吕贝克，德国 11 亥姆霍兹莫斯科眼病研究所眼部肿瘤科，105062 莫斯科，俄罗斯；svsaakyan@yandex.ru (SS); alextsygankov1986@yandex.ru （奥地利） 12 SC Oculistica Oncologica – 眼科肿瘤服务，Ente ospedaliero Ospedali Galliera，16128 热那亚，意大利；carlo.mosci@galliera.it（CM）；paololigorio.82@gmail.com（波兰） 13 DISTAV-热那亚大学地球、环境与生命科学系，16132 热那亚，意大利；silviaviaggi@gaslini.org 14 人类遗传学实验室，IRCCS Istituto G. Gaslini，16147 热那亚，意大利 15 埃森大学医院眼科系，杜伊斯堡-埃森大学，45147 埃森，德国；Claudia.LeGuin@uk-essen.de（CHDLG）；Bornfeld@uni-essen.de（NB）； Nikolaos.Bechrakis@uk-essen.de（NEB）16 利物浦临床实验室，皇家利物浦大学医院，利物浦 L69 3GA，英国* 通信地址：A.Rola@liverpool.ac.uk（ACR）；afgt@liverpool.ac.uk（AT）† 这两位作者贡献相同，并且是共同第一作者。
限制摘要和琼脂糖凝胶电泳
T ECHNIQUES I N M OLECULAR B IOLOGY – R ESTRICTION D IGEST AND A GAROSE G EL E LECTROPHORESIS This lab will introduce you to DNA modification by restriction enzymes using the purified plasmids you prepared from your transformation.我们还将使用水平凝胶电泳对纯化的质粒和消化进行分析。您将对限制酶进行切割之前和之后对纯化的质粒进行凝胶分析。您将执行质粒的模拟（控制）摘要，一种具有两种不同限制酶和双重摘要的单个摘要。从中，您应该能够确定Qiagen微型制备质粒DNA的纯度，以及在PQE60载体中的WGMDH插入物。一定要阅读有关限制摘要（教科书读数）和琼脂糖凝胶（教科书和讲义）的信息，以了解每个概念的理论，并了解执行成功实验所需的细节。必需的视频 - 新英格兰Biolabs准备的网页上的限制酶链接。观看所需的最小视频是（具有限制性酶的消化，限制酶消化的标准协议和NEB限制酶Double Digigest协议视频）。在进行实验之前，您还应该查看其他几个。https://www.neb.com/applications/cloning-‐and-‐synthetic-‐ biology/dna-‐preparation/restriction-‐enzyme-‐digestion Practical notes on Restriction Endonucleases (RE) and Their Use Enzymatic Unit definition: 1 Unit = amount of enzyme necessary to digest 1 µg DNA in 1 hr (37°C, with适当的缓冲区）。glycerol Re Digests。确保您使用的是正确的缓冲液，酶与底物的正确比率（DNA和正确消化的条件）。Rextion缓冲每个限制酶具有一个缓冲液，其中最高活性（通常为10倍浓缩物）。某些酶具有共同的缓冲液，而其他酶则需要与独特的缓冲液一起使用以进行最佳活动。几家公司（以新英格兰的Biolabs为例）具有与多种酶合作的共同缓冲液。您的网站上有一个链接 - 探索几家公司以了解缓冲液和酶。存储条件RE通过反复暴露于较高的温度来对活动丧失敏感；使用库存以长期存储保持在-20°C，在使用时在〜0°C（在冰上）处于〜0°C（在冰上）。进行消化时，温育几个小时后，某些酶的活性就会损失。由于RE昂贵，因此必须谨慎处理库存。酶应在-20°C时不断存储在非冻结冰箱中。（无霜的冰柜定期在冰点上加热以限制冰的积累。）也最好将酶放在冰箱中的绝缘容器中，该酶在打开冰柜时会限制温度变化（如果存储在霜冻的冰柜中，这一点尤其重要）。为防止在-20°C下冻结，RE库存在含有50％甘油的溶液中。由于在存在> 5％甘油的情况下可以抑制或改变RE活性，因此应库存不超过10％的最终RE消化反应混合物。[A 1:10 RE的稀释度将50％的甘油含量为5％。]在不正确的缓冲液条件下或在存在> 5％甘油的情况下，RE的恒星（*）活性可以显示出改变的DNA裂解特异性，称为“恒星活性”。在这种情况下，酶可以识别出其正常6 bp识别位点的4个基对子集，因此将在比预期的更多位点上切割DNA。例如，熟悉的酶EcoRI因其在低离子强度溶液中的恒星活性而臭名昭著。