基于 PCR 的密克罗尼西亚苏铁 (苏铁科) 性别鉴定方法 * M ICHAEL A NGELO P. F ERNANDEZ 1、B LAIZE S AN N ICOLAS 2、J AMES MCC ONNELL 3 和 M ARI M ARUTANI 4,† 1 夏威夷大学马诺阿分校太平洋生物科学研究中心,1993 East-West Road,檀香山,HI,96822 2 Proferre,Inc./太平洋联邦管理局。 202 Hilton Road Unit #10 Tumon Bay, Guam 96931 3 关岛植物灭绝预防计划,关岛大学自然与应用科学学院,UOG Station,Mangilao,关岛 96923 4 关岛大学自然与应用科学学院农业与生命科学部,UOG Station,Mangilao,关岛 96923 摘要 — 密克罗尼西亚苏铁是一种原产于密克罗尼西亚的乔木性雌雄异株苏铁。密克罗尼西亚苏铁曾是关岛最丰富的树种,但由于入侵昆虫的捕食,岛上的本土种群急剧减少。虽然保护工作的重点是通过离地繁殖植物恢复原地种群,但由于缺乏性别二态性状,在移栽时进行性别鉴定仍然具有挑战性。尽管存在这些限制,但可靠的性别鉴定方法对于确保种群的生殖功能和物种保护仍然至关重要。最近,有报道称,一种基于 PCR 的攀枝花苏铁性别鉴定方法使用引物扩增雄性特异性 MADSY/CYCAS_034085 基因及其最近的常染色体同源物 CYCAS_010388 作为内部对照。然而,由于缺乏 C. micronesica 的遗传信息,该性别鉴定引物组与 C. micronesica 的兼容性尚不清楚。本研究评估了这些基于 PCR 的方法在雄性(n = 17)和雌性(n = 13)C. micronesica 个体中的性别鉴定,发现扩增不一致性表明引物与 C. micronesica 不兼容。根据我们的研究结果,我们开发了一套改进的引物组,重新设计的雄性特异性引物 CYCmic_MADSY (F/R) 证明了其在正确鉴定所有 C. micronesica 个体性别方面的提高的准确性和可靠性。我们改进的基于 PCR 的方法为 C. micronesica 性别鉴定提供了一种快速、可靠的协议。通过这种方法获得的信息有可能指导保护研究和旨在重新建立这种本地物种的可行种子生产种群的努力。
比利时Javier P. Gisbert P. Gisbert Gastroenterology系鲁汶大学医院胃肠病学和肝病学系。 公主卫生研究所(IIS-PRINCESA),马德里大学(IIS-princesa) ngelo医院,LOURES胃肠病学部,轻型医院,里斯本葡萄牙皮埃尔·埃洛尔(Pierre Pierre Ellul)胃肠病学部,马耳他Alaa alaa alaa el-hussuna opensourceresearch组织(OSRC.NETWORK)比利时Javier P. Gisbert P. Gisbert Gastroenterology系鲁汶大学医院胃肠病学和肝病学系。公主卫生研究所(IIS-PRINCESA),马德里大学(IIS-princesa) ngelo医院,LOURES胃肠病学部,轻型医院,里斯本葡萄牙皮埃尔·埃洛尔(Pierre Pierre Ellul)胃肠病学部,马耳他Alaa alaa alaa el-hussuna opensourceresearch组织(OSRC.NETWORK)公主卫生研究所(IIS-PRINCESA),马德里大学(IIS-princesa) ngelo医院,LOURES胃肠病学部,轻型医院,里斯本葡萄牙皮埃尔·埃洛尔(Pierre Pierre Ellul)胃肠病学部,马耳他Alaa alaa alaa el-hussuna opensourceresearch组织(OSRC.NETWORK)
对比较分析。 1, Marina de Araújo Leite 1, Guilherme de Barros Costa 1, Iasmim Camila Chaves Pessoa 1, Cecilia Avellar Diniz Rebêlo Távora 1, Lara Casimiro Britto 1, Camilla Baldin Novaes Lima 1, Leonardo Barroso de Moraes Santos 1, Arnóbio Ângelo de Mariz Neto 1, Sylvia Ferreira Grisi Paiva 1,Simone Zanetti Freire 2,Carla Naiara Amorim Vieira de Souza 2,Ana Ingrid Riva Sampaio Mota 2,Mariêscortegagnachiavini 3,Paloma Raissa raissa raissa raissa raiSa dailcha de Silva delan acaciir bartera prera prera prera prera prera prera prera prera finlix fellixfélixfélixféllixféllixféllix5 6,LuísaLeitecarvalho 7,YuriEulálioRaposoLacerda 8,LourdesbeltrãoFirminoNeta的Rose 9
f 阿联酋迪拜 Fakeeh 大学医院胃肠病学系 g 德国汉诺威西罗亚圣特鲁珀特医院和汉诺威医学院内科 I h 德国明斯特大学医院 B 部医学系 - 胃肠病学和肝病学 i 西班牙马德里自治大学 [UAM] CIBEREHD IIS-IP 胃肠病学科 j 英国伦敦国王学院,弗洛伦斯·南丁格尔护理、助产和姑息治疗学院 k 波兰波兹南医科大学和 Heliodor Ś wi ę cicki 大学医院胃肠病学、营养学和内科 l 马耳他姆西达 Mater Dei 医院医学部胃肠病学分部 m 葡萄牙洛里什 Beatriz Ângelo 医院胃肠病学分部 n 生物医学系意大利米兰 Humanitas 大学科学系和 Humanitas 临床与研究中心 IBD 中心 o 意大利博洛尼亚大学 IRCCS Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna DIMEC IBD 部门 p 英国伦敦皇家伦敦医院巴兹健康 NHS 信托胃肠病学系 q 瑞典斯德哥尔摩卡罗琳斯卡医学院索尔纳医学系和卡罗琳斯卡大学医院胃肠病学、皮肤性病学和风湿病学系 r 美国俄亥俄州克利夫兰克利夫兰诊所结肠和直肠外科系 s 英国伯明翰大学免疫学和免疫治疗研究所和伯明翰大学医院 NHS 信托胃肠病学分部 t 希腊伊拉克利翁 Venizeleio 综合医院胃肠病学系 u希腊约阿尼纳大学及医学院 v 拉马特甘 Tel-HaShomer Sheba 医疗中心胃肠病学系和以色列特拉维夫萨克勒医学院 w 加拿大魁北克省蒙特利尔麦吉尔大学健康中心胃肠病学分部和匈牙利布达佩斯塞梅维斯大学医学第一系 x 塞浦路斯尼科西亚欧洲大学医学院 y 保加利亚索非亚医科大学“Tsaritsa Yoanna - ISUL”大学医院胃肠病学系 z 英国剑桥大学医院 NHS 信托基金阿登布鲁克医院胃肠病学系 aa 塞浦路斯大学高级医学和外科科学系
西里尔和Methodius大学,位于北马其顿共和国斯科普里的斯科普里; 35大学临床医院莫斯塔尔,莫斯塔尔,波斯尼亚和黑塞哥维那精神病学诊所; 36社区心理健康中心,卫生中心Prijedor,Prijedor,Bosnia和Herzegovina; 37 Campania大学精神病学系“ L. Vanvitelli”,意大利那不勒斯; 38 Cagliari大学和精神病学院,精神病学部分,医学科学与公共卫生系,大学医院,意大利卡利亚里大学; 39拉脱维亚里加,里加精神病学和纳学中心,里加·斯特拉迪大学的精神病学和纳学系; 40 Abarbanel心理健康中心,以色列特拉维夫; 41心理健康,医学心理学和心理治疗系,摩尔多瓦共和国摩尔多瓦共和国医学院医学院医学院,摩尔多瓦,摩尔多瓦; 42罗马尼亚克鲁伊·纳波卡(Cluj-Napoca)的Iuliu Hatieganu医学与药房大学; 43捷克西亚克莱卡尼国家心理健康研究所临床部;捷克共和国布拉格查尔斯大学第三校医学院44;匈牙利布达佩斯的45塞梅尔威大学; 46斯洛文尼亚卢布尔雅那大学精神病学诊所; 47立陶宛健康科学大学Kaunas医院的精神病诊所,立陶宛Kaunas; 48特殊精神病医院科托尔,西里尔和Methodius大学,位于北马其顿共和国斯科普里的斯科普里; 35大学临床医院莫斯塔尔,莫斯塔尔,波斯尼亚和黑塞哥维那精神病学诊所; 36社区心理健康中心,卫生中心Prijedor,Prijedor,Bosnia和Herzegovina; 37 Campania大学精神病学系“ L. Vanvitelli”,意大利那不勒斯; 38 Cagliari大学和精神病学院,精神病学部分,医学科学与公共卫生系,大学医院,意大利卡利亚里大学; 39拉脱维亚里加,里加精神病学和纳学中心,里加·斯特拉迪大学的精神病学和纳学系; 40 Abarbanel心理健康中心,以色列特拉维夫; 41心理健康,医学心理学和心理治疗系,摩尔多瓦共和国摩尔多瓦共和国医学院医学院医学院,摩尔多瓦,摩尔多瓦; 42罗马尼亚克鲁伊·纳波卡(Cluj-Napoca)的Iuliu Hatieganu医学与药房大学; 43捷克西亚克莱卡尼国家心理健康研究所临床部;捷克共和国布拉格查尔斯大学第三校医学院44;匈牙利布达佩斯的45塞梅尔威大学; 46斯洛文尼亚卢布尔雅那大学精神病学诊所; 47立陶宛健康科学大学Kaunas医院的精神病诊所,立陶宛Kaunas; 48特殊精神病医院科托尔,