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lambda exoniclease
X8030测定SDS纯度特异性活性DS核酸内切核蛋白酶DNA污染单位测试了N/A N/A N/A 1500 1500规格> 99％80,000 U/mg NOCONCONION <10份蛋白质来源：从大肠杆菌中纯化的大肠杆菌菌株过表达外生核酸内核酸内核酸酶源于bactreperepteriperophage lambda。单位定义：1个单位定义为在37°C下30分钟内从双链底物中产生10 nmol的酸性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。分子量：25.9 kDa质量控制分析：使用2倍连续稀释法测量单位活动。稀释液，并将其添加到含有1.1 kb triTID的DNA片段的50 µL反应中，并加入1x lambda Exo反应缓冲液。在37°C下孵育10分钟，浸入冰上，并使用TCA-PECICTITITART方法进行分析。蛋白浓度（OD 280）由OD 280吸光度确定。物理纯度，然后进行银色染色检测。通过比较浓缩样品中污染物带的聚集质量与稀释样品中蛋白蛋白蛋白带的质量来评估纯度。双链核酸内切酶在50 µL反应中确定，该反应含有0.5 µg质粒DNA和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。大肠杆菌16S rDNA的污染是使用5 µL重复的酶溶液的重复样品，并在Taqman QPCR测定中筛选，以使用与16S RRNA locus相应的寡核苷酸引物，以存在污染的大肠杆菌基因组DNA。提供：25毫米Tris-HCl，50 mm NaCl，1 mm DTT，0.1 mm EDTA，50％甘油（25°C时pH 7.5）提供：10x lambda exo反应缓冲液（B8030）：670 mm glycine，25 mm mgcl 2（25 mm mgcl 2（pH 9.4）
NG247母婴营养
维生素D在怀孕期间和泌乳期间的需求增加。对孕妇人群的维生素D摄入量缺乏科学共识，而不管有助于低维生素D状况的其他危险因素，但目前在英国（英国）的建议是，在整个怀孕期间，在整个怀孕期间，在整个怀孕期间，对维生素d的参考摄入量是10μg/sace ancacn and sac sac n sac n sac n sac n sac n sac n sace n sac n sac sac sac。对于大多数人口（包括怀孕和母乳喂养的人群），这意味着在冬季暴露更加有限的冬季，建议使用10μg/天的补充剂。人口的风险增加，例如皮肤较深或皮肤较少暴露于阳光的人，全年都建议补充。观察性研究报告了低维生素D状态，预期出生和低出生体重之间的关系。有建议，低维生素D状态与妊娠糖尿病（GDM）和先兆子痫有关，尽管这些关系尚未建立。在婴儿中，有一些暗示与儿童期骨质低和呼吸功能差的相关性。虽然数量有限，但观察性研究表明，比BMI≤29Kg/m 2的孕妇具有体重指数（BMIS）的维生素D状态明显低于维生素D状态。新生儿的维生素D状态已被证明与母体25羟基维生素D（25（OH）D）浓度高度相关。有人建议在新生儿中循环25（OH）d，应保持至少25–30 nmol/l的循环。在脐带中没有25（OH）D浓度的已知阈值，这表明婴儿健康结果改善。这篇综述的目的是评估怀孕期间的维生素D补充剂量适合于医学上分类为超重或肥胖体重类别的妇女。
用于骨靶向输送的阿仑膦酸钠结合物...
存活率 前列腺癌骨转移的独特之处在于，它会诱发骨质异常生长，这是由于肿瘤分泌的骨形态发生蛋白 4 (BMP4) 会诱发成骨细胞增多。将药物与靶向转移性肿瘤病灶内肿瘤诱导骨区域的物质结合是一种很有前途的药物输送策略。为了制定这样的策略，我们将近红外 (NIR) 荧光探针 Cy5.5 染料与靶向骨的阿仑膦酸钠结合，以作为药物的替代物。红外光谱等表征证实了 Cy5.5-ALN 结合物的合成。游离 Cy5.5 的最大吸光度在 675 nm 处，结合后没有变化。阿仑膦酸钠以剂量依赖性方式靶向骨成分羟基磷灰石，最高浓度为 2.5 μM，其中 Cy5.5-ALN 最多可与羟基磷灰石结合 85%，而单独的游离 Cy5.5 结合率为 6%。在体外细胞结合研究中，Cy5.5-ALN 特异性地与分化的 MC3T3-E1 细胞或 2H11 内皮细胞的矿化骨基质结合，这些细胞通过内皮细胞向成骨细胞的转变被诱导成为成骨细胞，这是前列腺癌诱导骨形成的潜在机制。Cy5.5- ALN 和游离 Cy5.5 均不与未分化的 MC3T3-E1 或 2H11 细胞结合。在非肿瘤小鼠中进行的骨靶向效率研究表明，注射 Cy5.5-ALN 后，脊柱、下颌、膝盖和爪子会随时间推移而积累，定量分析显示，在长达 28 天内，股骨中的积累高于肌肉中的积累，而游离 Cy5.5 染料在循环中没有优先积累，并且随着时间的推移而减少。当注射的 Cy5.5-ALN 浓度在 0.313 至 1.25 nmol/27 g 小鼠之间时，与荧光呈线性关系，在体内和体外对小鼠股骨进行量化。裸鼠体外骨靶向效率评估显示，骨形成 C4-2b-BMP4 肿瘤比非骨形成 C4-2b 肿瘤高 3 倍（p 值 < 0.001）。肿瘤的荧光显微镜成像显示，Cy5.5-ALN 与肿瘤诱导骨周围的骨基质共定位，但不与活肿瘤细胞共定位。总之，这些结果表明，药物-ALN 结合物是一种很有前途的方法，可以向前列腺癌转移灶中的肿瘤诱导骨区域靶向输送药物。
末端脱氧核苷酸转移酶（TDT）
大肠杆菌DNA污染单位测试了N/A N/A 200 200 200 200 200个规范> 99％27,400 U/mg <5.0％释放<1.0％<1.0％释放no conversion <10拷贝蛋白质的来源：大肠杆菌菌株，一种带有来自calf thymus的calf thymus的大肠杆菌菌株，该菌株具有N-Calf thymus，该基因具有N-Calf Thymus，该基因具有N-末端式纤维质质质质质量。单位定义：1个单位定义为在37°C下1小时内将1 nmol DTTPS转换为酸不溶性材料所需的聚合酶量。分子量：82.6 KDA质量控制分析：使用2倍连续稀释方法测量单位活动。在1X反应缓冲液中制成酶的稀释液，并将其添加到50 µL含有寡做DT 20 MER DNA，1X反应缓冲液，0.25 mM COCL 2 3 H-DTTP和100 µM DTTP的反应中。在37°C下孵育10分钟，浸入冰上，并使用Sambrook和Russell的方法进行分析（3）。蛋白浓度（OD 280）由OD 280吸光度确定。物理纯度，然后进行银色染色检测。通过比较浓缩样品中污染物带的聚集质量与稀释样品中蛋白蛋白蛋白带的质量来评估纯度。单链核酸酶在含有放射性标记的单链DNA底物的50 µL反应中确定，在37°C下孵育4小时4小时。双链外切核酸酶在50 µL反应中确定，该反应含有放射性标记的双链DNA底物和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。双链核酸内切酶在50 µL反应中确定，该反应含有0.5 µg质粒DNA和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。大肠杆菌16S rDNA的污染是使用5 µL重复的酶溶液的重复样品，并在Taqman QPCR测定中筛选，以使用与16S RRNA locus相应的寡核苷酸引物，以存在污染的大肠杆菌基因组DNA。
T7 DNA聚合酶 Qiagen验证报告 b'' T7 DNA连接酶 Qiagen®多路复用PCR加套件 T4基因32蛋白
大肠杆菌DNA污染单元测试了N/A N/A 100 100 100规格> 99％13,333 U/mg功能性功能性NO conversion <10份蛋白质来源：重组大肠杆菌菌株，携带毒液T7基因5和E. coli trxa基因。单位定义：1个单位定义为将10 nmol的总DNTPS转换为酸不溶性材料所需的聚合酶量，在37°C下30分钟内。分子量：92.1 KDA质量控制分析：使用2倍连续稀释方法测量单位活动。稀释酶，并将其添加到含有小腿胸腺DNA，1x T7 DNA聚合酶单位表征缓冲液（20 mM Tris-HCl，100 mm KCl，6 mM MGCL，6 mM MGCL 2，6mmmmmgcl 2，0.1 mm EDTA，5 mmβ-MMβ-MERCAPTOETOETHANANOL），3 H-DTT的反应中，3 H-DTT，在37°C下孵育10分钟，浸入冰上，并使用Sambrook和Russell的方法进行分析（6）。蛋白浓度（OD 280）由OD 280吸光度确定。物理纯度，然后进行银色染色检测。通过比较浓缩样品中污染物带的聚集质量与稀释样品中蛋白蛋白蛋白带的质量来评估纯度。单链核酸酶在含有放射性标记的单链DNA底物的50 µL反应中确定，在37°C下孵育4小时4小时。双链外切核酸酶在50 µL反应中确定，该反应含有放射性标记的双链DNA底物和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。双链核酸内切酶在50 µL反应中确定，该反应含有0.5 µg质粒DNA和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。大肠杆菌16S rDNA的污染是使用5 µL r菌酸溶液的样品变性的样品，并在Taqman QPCR分析中筛选，以使用与16S rRNA locus相应的寡核苷酸引物，使用污染的大肠杆菌Genomic DNA。
18 F-SynVesT-2 的首次人体研究：具有快速脑动力学和高特异性结合的 SV2A PET 成像探针
突触囊泡糖蛋白 2A 的 PET 成像可以对突触进行非侵入性量化。这项首次在人体上进行的研究旨在评估最近开发的突触囊泡糖蛋白 2A PET 配体 (R)-4-(3-(18F-氟)苯基)-1-((3-甲基吡啶-4-基)甲基)-吡咯烷-2-酮 (18F-SynVesT-2) 的动力学、重测可重复性和特异性结合程度，具有快速脑动力学。方法：九名健康志愿者参加了这项研究，并在高分辨率研究断层扫描仪上用 18F-SynVesT-2 进行了扫描。五名志愿者在两天内接受了两次扫描。五名志愿者在注射左乙拉西坦（20mg/kg，静脉注射）后重新进行扫描。采集动脉血以计算血浆游离分数并生成动脉输入函数。将各个 MRI 图像与脑图谱配准以确定生成时间 - 活动曲线的感兴趣区域，这些曲线与 1 和 2 组织区室（1TC 和 2TC）模型拟合以得出区域分布容积（VT）。使用半卵圆中心（CS）作为参考区域，从 1TC VT 计算区域不可置换结合电位（BP ND）。结果：合成了 18 F-SynVesT-2，具有高摩尔活性（187 6 69 MBq/nmol，n 5 19）。注射后 30 分钟，血浆中 18 F-SynVesT-2 的母体分数为 28% ± 8%，血浆中游离分数较高（0.29 ± 0.04）。18 F-SynVesT-2 迅速进入脑部，注射后 10 分钟内 SUV 达到峰值 8。局部时间 - 活动曲线与 1TC 和 2TC 模型均能很好地拟合；但使用 1TC 模型估算 VT 更可靠。1TC VT 范围从 CS 中的 1.9 ± 0.2mL/cm 3 到壳核中的 7.6 ± 0.8mL/cm 3，绝对重测变异性较低（6.0% ± 3.6%）。局部 BP ND 范围从海马中的 1.76 ± 0.21 到壳核中的 3.06 ± 0.29。 20 分钟的扫描足以提供可靠的 VT 和 BP ND。结论：18 F-SynVesT-2 在脑中具有快速动力学、高特异性摄取和低非特异性摄取。与非人类灵长类动物的结果一致，18 F-SynVesT-2 在人脑中的动力学比 11 C-UCB-J 和 18 F-SynVesT-1 的动力学更快，并且能够在更短的动态扫描中获取有关脑血流和突触密度的生理信息。
Cu-PSMA靶向前列腺癌的宠物
针对靶向前列腺特异性膜抗原（PSMA）的宠物示踪剂的需求继续增加。以批准的68个GA-和18个标记的PSMA示踪剂满足这一需求，这在主要城市中心以外挑战。这是因为这些放射性核素的短期半衰期使得有必要在其使用部位附近生产它们。为了克服这一挑战，我们提议产生61 CU的cu来标记PSMA宠物示踪剂。61 Cu可以大规模生产，其3.33小时的半衰期允许在68 GA和18 F的距离上运输。使用61 Cu和B 2-Emitter 67 Cu生产真正的溶液双胞胎。方法：PSMA-I＆T（Dotaga-（l-Y）FK（sub-Kue））及其衍生物，其中Dotaga螯合剂被Nodaga（Nodaga-（l-Y）FK（Sub-Kue）取代），在这里报道了Dotaga-psma-i＆tasme＆taiga and nodaga＆tail and nodaga＆tasty and nodaga＆t and nodaga＆t and nodaga＆t and nodaga＆t。与[68 Ga] Ga-Dotaga-PSMA-I＆T，[68 Ga] Ga-Nodaga-PSMA-I＆T，[68 GA] GA-PSMA-11和[18 F] PSMA-1007。在LNCAP细胞和异种移植物中进行了体外（亲脂性，亲属性，细胞摄取和分布）和体内（PET/CT，生物分布和稳定性）研究。人类剂量法估计。对[61 Cu] Cu-Nodaga-PSMA-I＆T进行了最初的人类成像，在转移性前列腺癌患者中进行。结果：[61 Cu] Cu-Dotaga-PSMA-I-I＆T和[61 Cu] Cu-Nodaga-PSMA-I-I＆T与射线纯度合成超过97％的射线纯度，明显的摩尔活性在24 MBQ/NMOL的明显摩尔活性后，没有标记后没有纯化。肿瘤吸收也更高在体外，天然Cu（Nat Cu）-Dotaga-dotaga-pSMA-I-I＆T和Nat Cu-Nodaga-pSMA-I-I＆T显示出高度高的pSMA（抑制浓度分别为50％，11.2 6 2.3和9.3 6 6 6 1 1.8nm），尽管低于Nat Ga-psma-nat ga-psma-n 0.4％（in Anat Ga-psma-n 0.4％）。它们的细胞摄取和分布与[68 Ga] Ga-PSMA-11的分布相当。体内，[61 cu] cu-nodaga-psma-i＆t在非目标组织中的摄取量明显低于[61 cu] cu-dotaga-psma-i＆t和较高的肿瘤摄取（14.0 6 5.0 6 5.0 6 5.0 6 5.0均比注入的活性（比每千iia/g]） Cu] Cu-Dotaga-PSMA-I-I＆T（6.06 6 0.25％IA/G，P 5 0.0059），[68 GA] GA-PSMA-11（10.2 6 1.5％IA/G，P 5 0.0972）和[18 f] PSMA-1007（9.70 6 2.70 6 2.57％IA/G，P 5 0.00.00 HER）。
18F-SynVesT-2 的首次人体研究：具有快速脑动力学和高特异性结合的 SV2A PET 成像探针
突触囊泡糖蛋白 2A 的 PET 成像可以对突触进行非侵入性量化。这项首次在人体上进行的研究旨在评估最近开发的突触囊泡糖蛋白 2A PET 配体 (R)-4-(3-(18F-氟)苯基)-1-((3-甲基吡啶-4-基)甲基)-吡咯烷-2-酮 (18F-SynVesT-2) 的动力学、重测可重复性和特异性结合程度，具有快速脑动力学。方法：九名健康志愿者参加了这项研究，并在高分辨率研究断层扫描仪上用 18F-SynVesT-2 进行了扫描。五名志愿者在两天内接受了两次扫描。五名志愿者在注射左乙拉西坦（20mg/kg，静脉注射）后重新进行扫描。采集动脉血以计算血浆游离分数并生成动脉输入函数。将各个 MRI 图像与脑图谱配准以确定生成时间 - 活动曲线的感兴趣区域，这些曲线与 1 和 2 组织区室（1TC 和 2TC）模型拟合以得出区域分布容积（VT）。使用半卵圆中心（CS）作为参考区域，从 1TC VT 计算区域不可置换结合电位（BP ND）。结果：合成了 18 F-SynVesT-2，具有高摩尔活性（187 6 69 MBq/nmol，n 5 19）。注射后 30 分钟，血浆中 18 F-SynVesT-2 的母体分数为 28% ± 8%，血浆中游离分数较高（0.29 ± 0.04）。18 F-SynVesT-2 迅速进入脑部，注射后 10 分钟内 SUV 达到峰值 8。局部时间 - 活动曲线与 1TC 和 2TC 模型均能很好地拟合；但使用 1TC 模型估算 VT 更可靠。1TC VT 范围从 CS 中的 1.9 ± 0.2mL/cm 3 到壳核中的 7.6 ± 0.8mL/cm 3，绝对重测变异性较低（6.0% ± 3.6%）。局部 BP ND 范围从海马中的 1.76 ± 0.21 到壳核中的 3.06 ± 0.29。 20 分钟的扫描足以提供可靠的 VT 和 BP ND。结论：18 F-SynVesT-2 在脑中具有快速动力学、高特异性摄取和低非特异性摄取。与非人类灵长类动物的结果一致，18 F-SynVesT-2 在人脑中的动力学比 11 C-UCB-J 和 18 F-SynVesT-1 的动力学更快，并且能够在更短的动态扫描中获取有关脑血流和突触密度的生理信息。
丹麦前瞻性病例队列研究中 CYP2R1 和 GC 常见多态性、维生素 D 摄入量与结直肠癌风险之间的关联
维生素 D 与结直肠癌发病率之间的关联已得到深入研究，观察性研究一致表明，维生素 D 代谢物 25-羟基胆钙化醇 (25(OH) D) 的血液水平与结直肠癌发病率之间存在显著的反比关系 [1-3]。有令人信服的证据表明，炎症既是结直肠癌的诱发因素，也是促进因素 [4,5]。维生素 D 3 的活性代谢物 1,25 (OH) 2 D 3（也称为骨化三醇）的产生始于皮肤，在 UVB 辐射介导下，7-脱氢胆固醇在皮肤中转化为胆钙化醇（维生素 D 3）。维生素 D 3 需要进一步逐步羟基化——首先在肝脏中由 CYP2R1 转化为 25(OH)D——然后在肾脏中生成 1,25(OH) 2 D 3 。已知骨化三醇具有多种抗炎作用 [6]。因此，维生素 D 3 已在三项随机对照试验 (RCT) 中被用作健康人群的化学预防剂，尽管并未取得令人信服的成功，大概是因为随访时间短、研究人群选择、不依从性和样本量小[7-9]。因此，其他类型的研究可能有助于阐明这个问题。当 RCT 尚无定论或由于伦理或经济原因不是一种选择时，功能多态性可用作研究致癌分子机制的工具。已证明，CYP2R1（编码 CYP2R1）和 GC（编码血浆中主要维生素 D 载体蛋白，GC）的遗传变异会改变丹麦人接受 UVB 辐射和食用强化维生素 D3 的面包和牛奶后的 25(OH)D 血液浓度（维生素 D 浓度的最佳生物标志物）[10]。丹麦 VitGen 研究表明，CYP2R1/rs10741657 和 GC/rs4588 多态性的四种风险等位基因携带者在接受 UVB 辐射后，其平均浓度比无风险等位基因携带者低 20.9 nmol/L（~50%）[10]。同样，在丹麦的 VitmaD 研究 [ 10 – 12 ] 中，观察到 25 (OH)D 浓度的基线差异，因此，与非携带者相比，所有四种风险等位基因的携带者在夏末的 25(OH)D 浓度明显较低。在冬季食用强化维生素 D 3 的面包和牛奶 6 个月后，这种差异仍然存在，而且，所有四种风险等位基因的携带者的 25(OH)D 浓度百分比下降幅度最大，25(OH)D 浓度下降约 20%，而非携带者的 25(OH)D 浓度实际上增加了约 5%。因此，影响维生素 D 运输和/或代谢的蛋白质和酶的遗传决定差异可能会影响循环维生素 D 水平，从而影响结直肠癌的风险。然而，我们摄入的维生素 D 量可能会与这些遗传差异相互作用，因此也会影响结直肠癌的风险。因此，我们的目的是调查这两种功能多态性是否能预测 25(OH)D