网络生产:例如Dyne和Al。 (2015);马格曼和al。 (2016);布鲁米特和al。 (2017); Baqaee(2018);代理(2018); Acemoglu和Azar(2020),Carvalho和Al。 (2021),Copytov和Al。 (2021),Di Giovanni和Al。 (2022);伯纳德和艾尔。 (2022),Elliott和Al。 (2022),bui和al。 (2022),k̈onig和al。 (2022),长话和塔巴兹 - 萨利希(2023),格罗斯曼和al。 (State,2023a,b)网络生产:例如Dyne和Al。(2015);马格曼和al。(2016);布鲁米特和al。(2017); Baqaee(2018);代理(2018); Acemoglu和Azar(2020),Carvalho和Al。(2021),Copytov和Al。(2021),Di Giovanni和Al。(2022);伯纳德和艾尔。(2022),Elliott和Al。(2022),bui和al。(2022),k̈onig和al。(2022),长话和塔巴兹 - 萨利希(2023),格罗斯曼和al。(State,2023a,b)
将每个细胞悬浮液添加到包含0.5 mM玻璃珠的2 mL管中(CAT#19-622)。然后以3、4和5的速度在Omni珠子破裂4(CAT#25-010)中均匀地均匀,持续45秒。加工后,将裂解物转移到清洁2毫升试管中,并以10,000 x g离心1分钟,以弥补任何细胞碎屑。使用Quick-DNA™真菌/细菌微型REIPREP试剂盒(Zymo,Cat#D6005)1 µL DNA洗脱器在纳米光谱表(Thermo Fisher)上量化1 µL DNA洗脱器,以确定DNA浓度和纯度。
• Colin Byers,忧思科学家联盟 • Kelly Lynch,顾问 • Maggie Schuppert,CURE 明尼苏达州 • Yvonne Cappel-Vickery,平价能源联盟 • Colette Pichon Battle,Taproot Earth • Bridget Vial,密歇根州环境正义联盟 • James Gignac,忧思科学家联盟 • Olivia Nedd,Vote Solar • Timothy DenHerder-Thomas,合作能源期货 • Sam Gomberg,忧思科学家联盟 • Albert Pollard,Clear RTO Path • Tanmay Shukla,环境法律和政策中心 • Edyta Sitko,忧思科学家联盟 • Shimekia Nichols,Soulardarity • Sheila Tahir,路易斯安那州 Bucket Brigade • Carolina Ortiz,组织拉丁裔力量和行动社区 • Ryan Perez,组织拉丁裔力量和行动社区 • Mike Jacobs,忧思科学家联盟 • Bette Billiot,霍马族,部落成员 • Clarice Friloux,Taproot Earth,Houma Nation,部落成员 • Leo Alicante,Quioveo Energy • Sage Michael Pellet,Healthy Gulf • Ansha Zaman,地球、能源和民主中心
网络生产:例如Dyne和Al。 (2015);马格曼和al。 (2016);布鲁米特和al。 (2017); Baqaee(2018);代理(2018); Acemoglu和Azar(2020),Copytov和Al。 (2021),Di Giovanni和Al。 (2022);伯纳德和艾尔。 (2022),Elliott和Al。 (2022),bui和al。 (2022),k̈onig和al。 (2022),长话和塔巴兹 - 萨利希(2023),格罗斯曼和al。 (Stourth),Grossman和其他。 (2023a),Grossman和Al。 (2023b)网络生产:例如Dyne和Al。(2015);马格曼和al。(2016);布鲁米特和al。(2017); Baqaee(2018);代理(2018); Acemoglu和Azar(2020),Copytov和Al。(2021),Di Giovanni和Al。(2022);伯纳德和艾尔。(2022),Elliott和Al。(2022),bui和al。(2022),k̈onig和al。(2022),长话和塔巴兹 - 萨利希(2023),格罗斯曼和al。(Stourth),Grossman和其他。(2023a),Grossman和Al。(2023b)
从果蝇中的基因组DNA制备该方案可以从40-100 mg的成年蝇(蝇重约1 mg)中分离出高度纯的基因组DNA。首先,在核保持完整的条件下,蝇是在缓冲液中磨碎的,然后使用SDS将DNA从断裂的组织中释放出来。接下来,进行常规的苯酚提取(去除蛋白质)和氯仿提取(去除苯酚),并用乙醇沉淀核酸。离心后(去除脂质和小细胞分子),将核酸沉淀溶解并用rnasea(降解RNA)和蛋白酶K(降解rNASEA和其他蛋白质)串行消化。其他苯酚/氯仿沉淀和乙醇沉淀产生高度纯化的基因组DNA。我们的目标是完整的基因组DNA - 避免通过过度的移液和涡旋剪切DNA。1。将50个成年果蝇放入装有微型植物的1.5 mL微管中,并在500 µl的缓冲液中彻底磨碎A。用500 µl的缓冲液B冲洗杵,将冲洗液加入匀浆中;通过反转微管轻轻混合。在37°C下孵育1小时2。切断P1000微量移动尖端的尖端,然后使用它将匀浆(500 µL)的一半转移到第二个微管中。苯酚通过在每个管,帽和混合物中添加相等的体积(500 µL)Te饱和苯酚来提取样品。离心5分钟。3。使用截止P200尖端将透明顶层(水相)绘制为两个新的微管(每个微管)。避免绘制接口材料。离心5分钟。4。5。通过在每个管,帽和混合物中添加等体积(500 µl)苯酚的苯酚来重新提取样品。使用截止P200尖端将透明顶层(水相)绘制为两个新的微管(每个微管)。避免绘制接口材料。氯仿通过在每个管,帽和混合物中添加等体积(500 µl)的氯仿提取样品。离心1分钟。使用截止尖端将透明顶层(水相)绘制为两个新的微管(每个微管)。将NaCl添加到0.1m的最终浓度。乙醇通过在每个微管中添加2卷(〜850 µl)的EtOH来沉淀您的样品;轻轻混合。观察核酸的沉淀。将微管放在-20°C过夜以鼓励沉淀。6。离心10分钟。丢弃上清液;短暂地干燥SpeedVac中的颗粒(将显示使用)。7。如下,将样品组合到单个微管中。然后,使用截止P200尖端将500 µl TE缓冲液加到一个管中
项目成就GPR 151激动剂治疗阿片类药物使用障碍GPR151的特征,铅鉴定出对Kratom及其衍生物的评估,用于处理OUD KRATOM的处理。IND研究正在进行的Olani:6个月的Naltrexone植入物可预防已获得的OUD IND。人类研究正在进行的用于治疗的OUD豁免中的睡眠障碍。明显的睡眠改善Lyn-014:获得了一次每周一次的口服美沙酮,用于OUD治疗。FDA快速轨道名称SBS-1000:芳烃:新的有效,更安全的镇痛药IND将于10/2021 BICX104:3个月的Naltrexone的可植入式仓库颗粒,用于OUD IND。正在进行的人类研究
添加到1.5毫升管中。血液:在13,000rpm处离心血液样本约1分钟(到颗粒样品)。用牙签从乙醇中取出样品,然后将其印迹到组织中。几乎干燥后,将牙签转移到1.5ml管中,然后摇晃以脱落血液。取出牙签并放入消毒剂中。拭子:乙醇干燥并放入1.5毫升管中。从交换的末端扣下来,以便盖子可以关闭。羽毛:将1-3羽羽毛的鱿鱼切成小块,在无菌玻璃板上用无菌剃刀刀片切成小块,然后再添加到管中。如果羽毛很小并且尖端上存在血斑,则可以添加羽毛。