a 中国科学院心理研究所大脑与心智终身发展研究中心,北京 100101,中国 b 北京师范大学认知神经科学与学习国家重点实验室,北京 100875,中国 c 纽约大学医学院儿童与青少年精神病学系,纽约,NY 10016,美国 d 内森克莱恩精神病学研究所,纽约,NY 10962,美国 e 中国科学院大学心理学系,北京 100049,中国 f 印第安纳大学心理与脑科学系,布卢明顿,IN 47405,美国 g 儿童心智研究所,纽约,NY 10022,美国 h 耶鲁大学心理学系,纽黑文,CT 06511,美国 i 电气与计算机工程系,临床影像研究中心,N.1 健康与记忆网络项目研究所,美国国立卫生研究院新加坡 117574,新加坡 j 浙江大学物理系,杭州 310058,中国 k 滨州医学院,烟台 264100,中国 l 荷兰拉德堡德大学医学中心 Donders 研究所,奈梅亨 6525 EN,荷兰 m 荷兰鹿特丹伊拉斯姆斯大学儿童和青少年精神病学系,鹿特丹 3000 CB,荷兰 n 荷兰鹿特丹伊拉斯姆斯大学医学中心放射科,鹿特丹 3000 CA,荷兰 o 西南大学心理学院,重庆 400715,中国 p 华南师范大学脑研究与康复研究所,广州 510631,中国 q 常州市儿童医院儿童保健研究所,常州 213003,中国 r 南宁师范大学教育科学学院脑与教育重点实验室,南宁 530001,中国 s 中国科学院行为科学重点实验室,北京师范大学心理学系,北京 100101 t 北京师范大学 IDG/麦戈文脑研究中心,北京 100875
摘要:无细胞系统的最新进展已从遗传回路的快速原型和代谢途径到便携式诊断和生物制造开辟了合成生物学的新功能。当前无细胞系统中的瓶颈,尤其是那些使用非大肠杆菌种类物种的瓶颈,是质粒DNA所需的使用,可以用力地构建,克隆和验证。线性DNA模板为许多无细胞应用提供了更快,更直接的途径,但通常会在无细胞反应中迅速降解。在这项研究中,我们从λphage,含有卡位点的DNA片段和来自结核分枝杆菌的KU评估了GAM,以保护它们在无细菌无细胞的系统中保护线性DNA模板的能力。我们表明,这些核酸酶抑制剂在五个不同的无细胞裂解液中表现出针对内源性外切酶的不同保护活性,突出了它们对各种细菌种类的效用。我们预计这些线性DNA保护策略将加速无细胞合成生物学的高通量方法。关键字:无细胞表达系统,线性DNA,RECBCD,gams,chi,ku
1 罗格斯大学机械与航空航天工程系,新泽西州 08854 2 罗格斯大学生物医学工程系,新泽西州 08854 * jonathan.singer@rutgers.edu
摘要 — 轻型机器人操纵器可用于恢复运动障碍人士的操纵能力。然而,操纵环境是一项复杂的任务,尤其是当控制接口带宽较低时,对于有障碍的用户来说可能就是这种情况。因此,我们提出了一种基于约束的共享控制方案来定义在任务执行期间提供支持的技能。这是通过将技能表示为一系列状态来实现的,每个状态都应用特定的用户命令映射和不同的约束集。新技能是通过将不同类型的约束和状态转换条件组合在一起,以人类可读的格式来定义的。我们在一项针对三项日常生活活动的试点实验中展示了它的多功能性。结果表明,即使是复杂的高维任务也可以使用我们的共享控制方法通过低维界面执行。
显示指数衰减拟合 y = 846.9 nm*e (-x/1174.83nm) ,R 2 = 0.96。(b)1 wt% PVP 以 0.1 mL/hr 喷涂在不同厚度的 Parylene C-on-Si 基板上 60 分钟。由于气相沉积的保形特性,水平误差线不可见。蓝色轨迹是指数衰减拟合 y= 815.6 nm*e (-x/567.4 nm) ,R 2 = 0.98。(c)1 wt% PVP 以 0.1 mL/hr 喷涂在不同厚度的 SU-8-on-Si 基板上 60 分钟。黑色轨迹是指数衰减拟合 y = 804.4 nm*e (-x/348.8 nm) ,R 2 = 0.51。
专业工程师和持牌设计专业人员................................................................................19 注册印章....................................................................................................................19 北美认证能源从业人员安装人员委员会........................................................................19 专业服务的协调...............................................................................................................19 分包商资质的协调.......................................................................................................19 政府财产的修改和变更....................................................................................................20 结构工程....................................................................................................................20 产品、材料和服务要求....................................................................................................21 太阳能光伏系统要求....................................................................................................23 安全、质量和可靠性(2015 年 12 月更新).............................................................23 阵列电弧和接地故障检测和预防................................................................................23 阵列眩光和闪烁预防分析................................................................................................24 网络安全....................................................................................................................24 雷电保护....................................................................................................................25 模块质量和安全..............................................................................................................25 防止故意破坏和盗窃................................................................................................27 电力计量和数据采集系统:测量和验证 (M&V)......................................................................................27 计量规格....................................................................................................................29 数据轮询和记录频率.................................................................................................29 设置系统大小的最小值和最大值以及性能保证....................................31
简洁并使用有效的动词。在可能的范围内,用数字、百分比和时间段来量化。• 在六个月内,大幅减少了 25% 的库存。• 通过将私人车队容量扩大 20%,显著改善了客户服务。同时,还降低了上一年的成本 8%(40,000 美元)。• 通过启动生产力改进战略获得杰出成就奖,同时在 1 年内节省了 900,000 美元。• 在一年内,举办了 25 多个会议和特别项目,总出席人数超过 2,500 人。始终如一地满足所有期限和预算目标。• 开发了一个关于内部培训的计算机数据库,显著减少了(从三天减少到四小时)处理部门信息请求所需的响应时间。• 在 18 个月内缩短了账单处理时间,从六天减少到两天。 • 实施了新的管理数据库,为超过 400 万美元的业务提供了更高效的客户服务,在第一年就将客户保留率提高了 12%。 • 建立/管理了公司第一个全国质量控制培训计划,使制造成本降低了 8%。 • 实施了即时订购程序,将生产供应库存减少了 200,000 美元。 • 聘请并培训了三名系统分析师,他们在不到四个月的时间内成功减少了一项重大计划开发支持。 • 与主要办公用品分销商谈判达成全国帐户协议,从而节省了 136,000 美元的成本。
CRISPR/CAS技术的常见应用涉及工程基因敲击素,其中DNA序列被取代或插入特定的基因组基因座。In contrast with CRISPR-mediated indels, which result from the error-prone non-homologous end joining (NHEJ) pathway, gene knockins are often engineered via homology-directed repair (HDR), typically through the use of CRISPR reagents (Cas enzyme and guide RNA) in tandem with a DNA template that shares homology with the target site and encodes for the desired modification (Hsu et al., 2014;图1,下面)。用于HDR的模板可以是双链DNA(DSDNA,线性或质粒)或单链DNA(SSDNA),并且最近的发现表明,修复机制取决于使用的模板类型而变化。 dsDNA触发了一种反映减数分裂同源重组(HR)的RAD51依赖性机制,而HDR涉及ssDNA(称为单链模板修复或SSTR)是Rad51独立的,并且需要多个组件,并且需要多个组成部分的Fanconi Anemia Anemia(FA)维修路径(RICHARDARDSON ERATHEWAY(RICHARDARSEN)等。
(ssDNA) 是优于 dsDNA 的 HDR 模板。在此,我们报告了一项系统研究,比较了 HEK293 细胞中的 dsDNA HDR 模板和 IDT Ultramer® 寡核苷酸 ssDNA HDR 模板。测试了链选择和同源臂长度,以确定 HDR 在 Cas9 dsDNA 断裂点创建新的限制位点(6 个碱基插入)的效率。使用较长 ssDNA HDR 模板的初步实验表明,与较短 ssDNA 模板具有类似的优势和行为。具有不对称同源臂的模板的 HDR 插入。使用具有不对称同源臂的 HDR 模板导致 EcoRI 插入率与对称同源臂的插入率相似。使用靶向链模板获得了高 HDR 效率,其中