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DNA指导的哺乳动物RNA聚合酶II
。cc-by 4.0未经同行评审获得的未获得的国际许可证是作者/筹款人，他已授予Biorxiv的许可证，以永久显示预印本。它是此预印本的版权持有人（该版本发布于2024年6月1日。; https：//doi.org/10.1101/2024.06.01.596947 doi：biorxiv Preprint
K2981 Rapidout DNA去除套件
由Thermo Fisher Scientific Baltics UAB制造的ISO认证，符合ISO 9001和ISO 13485认证质量管理系统。
Biozym B7高保真DNA聚合酶
5.1。反应缓冲液5x B7反应缓冲液包含：15 mM MGCL 2，5 mm DNTPS，增强剂和稳定器。我们不建议添加进一步的单独的PCR增强剂（例外请参见5.3）或MGCL 2。5.2。引物引物应使用默认引物3设置（https://bioinfo.ut.ee/primer3/）具有预测的熔点约为60°C。反应中的最终引物浓度应在0.2μm和0.6μm之间。5.3。10倍增强子长模板，富含GC的模板或具有复杂二级结构的模板：如果没有或弱扩增的添加10x B7增强子可以提高产量。5.4。退火使用的退火温度等于下TM引物的TM。如果存在非特异性产品，则以2°C的增量增加。或者使用温度梯度在实验中找到最佳的退火温度。5.5。扩展E Xtension应在72°C下进行。最佳延长时间取决于模板的扩增子长度和复杂性。我们建议大多数模板的延长时间为30秒（KB）。在2步协议的情况下，68至75°C可以用作结合退火/延长温度。5.6。多路复用PCR首次执行多重PCR时，建议在计算出的退火温度周围运行温度梯度。在随后的实验中应使用代表最佳特异性的退火温度。不应使用快速循环条件。最初建议使用最长片段的延长时间。
使用 ThermoPol II 进行 Taq DNA 聚合酶的 PCR 协议 (...
聚合酶链式反应 (PCR) 是一种功能强大且灵敏的 DNA 扩增技术 (1)。Taq DNA 聚合酶是一种广泛用于 PCR 的酶 (2)。以下指南旨在确保使用新英格兰
M0273 - Taq DNA 聚合酶与标准 Taq 缓冲液
编制 SDS 所用数据的主要参考文献和来源：美国有毒物质与疾病登记署 (ATSDR) 美国环境保护署 ChemView 数据库 欧洲食品安全局 (EFSA) 美国环境保护署急性接触指导水平 (AEGL) 美国环境保护署联邦杀虫剂、杀菌剂和灭鼠剂法案 美国环境保护署高产量化学品 食品研究杂志危险物质数据库 国际统一化学信息数据库 (IUCLID) 国家技术与评估研究所 (NITE) 澳大利亚国家工业化学品通报与评估计划 (NICNAS) 澳大利亚工业化学品引进计划 (AICIS) NIOSH（国家职业安全与健康研究所） 美国国家医学图书馆的 ChemID Plus (NLM CIP) 美国国家医学图书馆的 PubMed 数据库 (NLM PUBMED) 美国国家毒理学计划 (NTP) 新西兰化学品分类和信息数据库 (CCID) 经济合作与发展组织环境、卫生与安全出版物经济合作与发展组织高产量化学品计划经济合作与发展组织筛查信息数据集世界卫生组织
聚合酶θ缺陷型拟南芥的基因靶向
几十年来，农杆菌介导的转化一直是生成转基因植物的首选工具。在此过程中，携带转基因的 T-DNA 从细菌转移到植物细胞中，在那里它通过聚合酶θ (Pol h ) 介导的末端连接 (TMEJ) 随机整合到基因组中。通过同源重组 (HR) 将 T-DNA 靶向到特定基因组位点也是可能的，但此类基因靶向 (GT) 事件发生的频率很低，并且几乎总是伴随着随机整合事件。另一个复杂因素是，T-DNA 和目标位点重组的产物可能不仅映射到目标位点 (真正的 GT)，还可能映射到基因组中的随机位置 (异位 GT)。在本研究中，我们通过使用突变了 TEBICHI 基因（该基因编码 Pol h ）的拟南芥，研究了 TMEJ 功能如何影响植物中 GT 的生物学。在 TMEJ 功能强大的植物中，我们主要发现 GT 事件伴随着随机的 T-DNA 整合，而在 teb 突变体背景下获得的 GT 事件缺乏额外的 T-DNA 拷贝，证实了 Pol h 在 T-DNA 整合中的重要作用。Pol h 缺乏也会阻止异位 GT 事件，这表明导致此结果的事件序列需要 TMEJ。我们的研究结果提供了可用于制定在农作物中获得高质量 GT 事件的策略的见解。
基因靶向聚合物theta缺乏拟南芥
tumefaciens介导的转化一直是生成转基因植物的首选工具。在此过程中，携带转基因的T-DNA从细菌转移到植物细胞，在该细菌中，它通过聚合酶theta（Pol H）介导的末端连接（TMEJ）随机地整合到基因组中。通过同源重组（HR）将T-DNA靶向特定的基因组基因座（HR），但这种基因靶向（GT）事件以低频发生，几乎总是伴随着随机整合事件。另一个复杂性是，T-DNA和目标基因座之间的重组的乘积不仅可以映射到目标基因座（TRUE GT），还可以映射到基因组中的随机位置（异位GT）。在这项研究中，我们通过使用用于Tebichi基因的Tebichi Gene突变的拟南芥，研究了TMEJ功能如何影响植物中GT的生物学，该基因编码为polH。虽然在TMEJ-Profientient植物中，我们主要发现GT事件伴随着随机T-DNA整合，而在TEB突变体背景中获得的GT事件缺乏其他T-DNA拷贝，从而证实了POL H在T-DNA整合中的基本作用。pol H的表现也阻止了异位GT事件，这表明导致此结果的事件顺序需要TMEJ。我们的发现提供了见解，可用于制定策略以获得农作物中的高质量GT事件。
SARS-COV-2 RNA依赖性RNA聚合酶作为COVID-19的治疗靶标
摘要简介：当前的SARS-COV-2大流行迫切需要预防和治疗策略。RNA依赖性RNA聚合酶（RDRP）在人类细胞中没有对应物，是药物发育的绝佳靶标。鉴于药物开发的耗时过程，重新利用用于其他适应症的药物或至少在安全性和耐受性方面成功测试的药物是一种有吸引力的策略，可以快速为严重的Covid-19病例提供有效的药物。涵盖的区域：当前可用的数据和即将进行的关于RDRP的研究，可以重新使用以停止SARS-COV-2复制。专家意见：新颖化合物的药物重新利用和设计正常进行，分别提供快速反应和新的特定药物。值得注意的是，校对SARS-COV-2外切核酸酶活性可能会限制设计为直接链终止剂的药物的潜力，并有利于通过延迟终止作用的化合物的发展。虽然等待疫苗接种以遏制SARS-COV-2流行病，但即使是重新利用策略的部分有效的药物也可能有助于治疗严重的疾病病例。考虑到冠状病毒中RDRP的高度保存，对其在体外活动的改进知识可以为药物开发或重新利用提供有用的信息，以与SARS-COV-2和未来的大流行有关。
Molnupiravir 临床试验模拟表明聚合酶链 1
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