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心肌生物力学和随之而来的左心房连接鸡肉胚胎模型的差异表达的基因。
雏鸡胚胎心脏的摘要左心房连接（LAL）是左心脏综合征（HLHS）的模型，其中使用纯粹的机械干预措施，而没有遗传或药理操纵来引发心脏畸形。因此，它是理解HLHS生物力学起源的关键模型。然而，其心肌力学和随后的基因表达并不理解。我们进行了有限元（Fe）建模和单细胞RNA测序来解决此问题。在HH25（ED 4.5）的LAL和对照中获得了鸡胚胎心脏（ED 4.5）的4D高频超声成像。进行运动跟踪以量化菌株。使用最小的应变特征向量作为收缩的方向，基于图像的Fe建模，Guccione主动张力模型和通过微型PIPETTES的真实性无源刚度模型横向横向同型被动刚度模型。对左心室（LV）心脏组织的单细胞RNA测序在HH30处进行正常和LAL胚胎（ED 6.5）（ED 6.5），并鉴定出差异表达的基因（DEG）。在LAL后，LAL，LV厚度增加了33％，肌纤维方向的菌株增加了42％，而肌纤维方向则增加了42％的压力，降低了肌纤维方向的压力减少了50％。这些可能与由于LAL引起的LV的室前载体减少和下载相关。RNA-SEQ数据显示肌细胞可能与机械感应基因（钙粘蛋白，Notch1等）相关的DEG。），肌球蛋白收缩性基因（MLCK，MLCP等。），钙信号基因（PI3K，PMCA等。），以及与纤维化和纤维弹性（TGF-β，BMP等）有关的基因。我们阐明了LAL带来的心肌生物力学的变化以及对心肌细胞基因表达的相应变化。这些数据可能有助于识别HLHS的机械生物学途径。
rboHF通过调节拟南芥中的活性氧和凋亡pH动力学来激活气孔免疫力
气孔防御对于防止病原体进入和进一步定植的植物很重要。质外塑性活性氧（ROS）在激活细菌后激活气孔闭合方面起着重要作用。然而，下游事件，尤其是对警卫细胞中胞质氢（H 2 O 2）的影响的因素，对警卫细胞中的特征很少了解。我们使用拟南芥在气孔免疫反应期间使用涉及倍增运动ROS爆发的拟南芥突变体来研究H 2 O 2传感器ROGFP2-ORP1和ROS特异性荧光素探针。出乎意料的是，NADPH氧化酶突变体RBOHF通过警卫细胞中与病原体相关的分子模式（PAMP）对ROGFP2-ORP1的过度氧化。但是，气孔闭合与高ROGFP2-ORP1氧化没有密切相关。相比之下，RBOHF对于通过基于荧光素的探针在后卫细胞中测得的PAMP介导的ROS产生是必需的。与以前的报道不同，RBOHF突变体（而不是RBOHD）在小型触发的气孔闭合中受到了损害，导致对细菌的气孔防御性缺陷。有趣的是，RBOHF还参与了PAMP诱导的凋亡碱化化。在H 2 O 2介导的气孔闭合100μm中，RBOHF突变体也部分受损，而较高的H 2 O 2浓度最高为1 m m，并未促进野生型植物中的气孔闭合。我们的结果提供了有关塑料和胞质ROS动力学之间相互作用的新见解，并突出了RBOHF在植物免疫中的重要性。
极地生长素转运的调节识别源碳关系的分子决定因素和杨树中的下沉强度
源对碳（C）分配是由水槽强度驱动的，即水槽器官进口C的能力，在组织生长和生物量生产率中起着核心作用。但是，在树木中尚未彻底表征水槽强度的分子驱动因素。生长素作为主要的植物植物激素，可调节源组织中光剂量的动员，并提高碳水化合物向水槽器官（包括根）的易位。在这项研究中，我们使用了“生长素刺激的碳汇”方法来了解杨树中长距离源 - 键C分配中涉及的分子过程。杨树碎屑被叶面喷涂，上面喷涂了极地生长素传输调节剂，包括生长素增强剂（AE）（即IBA和IAA）和生长素抑制剂（AI）（即NPA），然后全面使用生物量评估，均经材料来对叶片，茎和根组织进行全面的分析，均质和均质概况，均经均经材料，c isotope and coptope and coptope and coptoper nertem nertops和coptoper nertops nekotom and et necotom nerting nekoling，et negoling noursem。生长素调节剂改变了根部干重和分支模式，AE增加了光合固定的C从叶片到根组织。转录组分析在AE条件下确定了根组织中高度表达的基因，其中包括编码多半乳糖醛酸酶和β-淀粉酶的转录本，这些转录物可能会增加水槽的大小和活性。代谢分析表明，总代谢的变化，包括甲醇的相对丰度含量改变，在AE和AI条件下，根组织中柠檬酸盐水平的相反趋势。总而言之，我们假设一个模型表明，流动糖醇，淀粉代谢衍生的糖和TCA-Cycle中间体可以作为杨树中的源– sink C关系，作为水槽强度的关键分子驱动因素。
九月发育不良神经发育不全
■ Traditionally defined by 3 characteristic features, septo-optic dysplasia includes: a severe underdevelopment of the optic nerves (optic nerve hypoplasia) a abnormal formation of structures and underdevelopment along the midline of the brain a pituitary hypoplasia (abnormal underdeveloped pituitary gland).
左心脏综合征是什么？
摘要：到目前为止，对于所谓的“低塑性左心综合症”尚无商定的定义。甚至其起源仍然有争议。Noonan和Nadas据我们迄今为止可以将第一个组成的患者组成的患者在1958年属于“综合征”，并建议LEV命名了该实体。lev在1952年写作时，描述了“主动脉流出流动综合体的发育不全”。在他的最初描述中，就像Noonan和Nadas一样，他的病例包括心室间隔缺陷。在随后的帐户中，他建议只有那些具有完整心室隔膜的人才包括在综合征中。有很多值得称赞的方法。根据心室隔膜的完整性进行评估时，要包括的心脏可以解释为显示出胎儿生命的疾病。对这一事实的认识对于那些寻求建立左心室发育不全的遗传背景的人很重要。流也很重要，然后具有间隔完整性，然后会影响其对低塑性心室结构的影响。在我们的综述中，我们总结了支持完整心室隔膜现在应该成为降型左心脏综合征定义的一部分的证据。
利用 CRISPR-Cas9 同时进行 HDR 过表达和 NHEJ 抑制，在杨树中进行精确的外源插入和序列替换
CRISPR 介导的基因组编辑已成为生物性状遗传修饰的有力工具。然而，开发基于同源定向 DNA 修复 (HDR) 的高效、位点特异性基因敲入系统仍然是植物面临的重大挑战，尤其是在杨树等木本植物中。本文表明，同时抑制非同源末端连接 (NHEJ) 重组辅因子 XRCC4 和过度表达 HDR 增强因子 CtIP 和 MRE11 可以提高基因敲入的 HDR 效率。使用这种方法，BleoR 基因被整合到 MKK2 MAP 激酶基因的 3' 端以产生 BleoR-MKK2 融合蛋白。根据 TaqMan 实时 PCR 评估的完全编辑核苷酸，与没有 HDR 增强或 NHEJ 沉默相比，当使用 XRCC4 沉默结合 CtIP 和 MRE11 过度表达时，HDR 介导的敲入效率高达 48%。此外，HDR 增强子过表达和 NHEJ 抑制的组合还提高了基因组靶向效率，使 CRISPR 诱导的插入和缺失 (InDels) 减少了 7 倍，从而对杨树中基于 MKK2 的盐胁迫反应没有功能性影响。因此，这种方法不仅适用于杨树和植物或农作物，也适用于哺乳动物，以提高 CRISPR 介导的基因敲入效率。
有证据表明 SARS-CoV-2 疫苗诱发的中风可能不仅仅是由于 ASIA 或 VITT 综合征引起的'，垂体中风和 COVID-19 疫苗接种评论：病例报告和文献综述
本评论旨在讨论 Aliberti 等人 (2022) ( 1 ) 报告的病例中垂体卒中的某些诊断和病理生理学方面。报告指出，在接种第三剂 Moderna 疫苗后发生了垂体卒中。这是迄今为止报告此类不良事件的第四例 ( 2 – 4 )，是第二例在患有垂体腺瘤的患者中报告此类不良事件的病例 ( 4 )，也是第一例通过垂体活检的组织病理学检查确认持续存在 SARS-CoV-2 感染痕迹的病例。作为对第一篇最近发表的针对 SARS-CoV-2 疫苗引起的垂体疾病的试点研究结果的补充 ( 5 )，我们将简要讨论本报告将重点介绍的有关该实体的其他有趣元素。
糖尿病性肾病研究的进展，第II卷
背景：患有左心心脏综合征（HLHS）的患者经历了palliation缩，直到Fontan手术面临神经发育（ND）结果受损的风险。与双侧肺动脉带，导管支架和气球置术的混合过程相比，与避免早期新生儿心脏肺旁通（CPB）手术的Norwood I期手术相比，与Norwood I期相比，可能会提供不太侵入性的I阶段I程序。尽管胎儿脑血液动力学改变了，但I期手术的类型可能是协方差的影响，并且由于推迟新生儿CPB手术，也可能会改变功能结果。在这篇综述中，我们分析了混合程序后的结果和功能结果作为I阶段程序。方法：审查分析了2022年3月15日之前发表的原始出版物（OPS），由Cochrane，Embase，Ovid，Scopus和Web of Science确定。如果分析了HLHS患者的短期至长期神经发育结果，脑发育，体细胞和心脏结局，并分析了通过混合程序治疗的变体，则包括OP。除了数据库搜索外，我们还审查了分析的OP的所有参考文献，以获取可用研究的全面列表。总结了作者，出版年份，研究人群的人口特征，研究设计（前瞻性或回顾性），研究评估和主要发现。结果：ND结局和功能性心脏预后患者的数据包括21个OP。总体而言，作为HLHS的I阶段I，中期和杂种手术患者的中期结局受损。在两项比较研究中，仅确定了I阶段程序（混合与诺伍德）之间的略有差异，从而影响右心室重塑，短期和中期ND结局，降低了脑的生长直到两岁，寿命的质量降低了，血液动力学的脑动力学质量变化，并改变了脑部脑力和脑部的脑部灌注模式。结论：尽管HLHS患者的中期随访和比较杂交程序与诺伍德程序的中期随访有一些较小的差异，但其对ND结果的影响似乎很低。这可以通过大量的协变量以及小型研究人群以及接受混合或诺伍德手术为I阶段的患者的不同选择标准来解释。
利用 CRISPR-Cas9 同时进行 HDR 过表达和 NHEJ 抑制，在杨树中进行精确的外源插入和序列替换
CRISPR 介导的基因组编辑已成为生物性状遗传修饰的有力工具。然而，开发基于同源定向 DNA 修复 (HDR) 的高效、位点特异性基因敲入系统仍然是植物面临的重大挑战，尤其是在杨树等木本植物中。本文表明，同时抑制非同源末端连接 (NHEJ) 重组辅因子 XRCC4 和过度表达 HDR 增强因子 CtIP 和 MRE11 可以提高基因敲入的 HDR 效率。使用这种方法，BleoR 基因被整合到 MKK2 MAP 激酶基因的 3' 端以产生 BleoR-MKK2 融合蛋白。根据 TaqMan 实时 PCR 评估的完全编辑核苷酸，与没有 HDR 增强或 NHEJ 沉默相比，当使用 XRCC4 沉默结合 CtIP 和 MRE11 过度表达时，HDR 介导的敲入效率高达 48%。此外，HDR 增强子过表达和 NHEJ 抑制的组合还提高了基因组靶向效率，使 CRISPR 诱导的插入和缺失 (InDels) 减少了 7 倍，从而对杨树中基于 MKK2 的盐胁迫反应没有功能性影响。因此，这种方法不仅适用于杨树和植物或农作物，也适用于哺乳动物，以提高 CRISPR 介导的基因敲入效率。
一种测定桦树和杨树中CRISPR/Cas系统切割效率的方法
摘要 测定Cas9对靶位点的切割效率对于基因组编辑非常重要。然而，这种测定只能通过体外方法进行，因为需要纯化Cas蛋白和合成gRNA。在这里，我们开发了一种体内方法，称为植物瞬时CRISPR/Cas编辑（TCEP）来测定Cas9的切割效率。按常规方法构建农杆菌介导的植物转化CRISPR/Cas载体。利用我们建立的瞬时转化方法，Cas9蛋白和gRNA瞬时表达并形成复合物以切割其靶位，从而导致动态DNA断裂。使用qPCR定量断裂的DNA以测量Cas9的切割效率。我们利用TCEP和体外方法研究了白桦和山杨×波利纳植物中Cas9对不同靶位点的切割效率。 TCEP法测定结果与体外法一致，说明TCEP法测定切割效率可靠。另外，利用TCEP法，我们发现热处理和超声处理均能显著提高CRISPR/Cas效率。因此，TCEP法具有广泛的应用价值，不仅可用于分析CRISPR/Cas效率，还可用于确定Cas9切割中涉及的因素。