摘要 SARS-CoV-2 非结构蛋白 1 (Nsp1) 包含一个 N 端结构域和由短连接区连接的 C 端螺旋。SARS-CoV-2 的 Nsp1 (Nsp1-C-ter) 的 C 端螺旋与 40S 核糖体亚基的 mRNA 进入通道结合并阻止 mRNA 进入,从而关闭宿主蛋白质合成。Nsp1 抑制宿主免疫功能,对病毒复制至关重要。因此,Nsp1 似乎是治疗的一个有吸引力的靶点。在本研究中,我们对美国食品药品监督管理局 (FDA) 批准的针对 Nsp1-C-ter 的药物进行了计算机筛选。在获得的最佳匹配中,孟鲁司特钠水合物与 Nsp1 结合的体外结合亲和力 (KD ) 为 10.8 ± 0.2 µM。在模拟运行中,它与 Nsp1-C-ter 形成稳定的复合物,结合能为 –95.8 ± 13.3 kJ/mol。孟鲁司特钠水合物还挽救了 Nsp1 在宿主蛋白质合成中的抑制作用,这通过萤火虫荧光素酶报告基因在细胞中的表达得到证明。重要的是,它显示出对 SARS-CoV-2 的抗病毒活性,并在表达 ACE2 的 HEK 细胞和 Vero-E6 细胞中降低了病毒复制。因此,我们建议以孟鲁司特钠水合物为先导分子,设计有效的抑制剂来帮助对抗 SARS-CoV-2 感染。
2生物学系,约翰·霍普金斯大学(Johns Hopkins University),3400 N. Charles St.,235 Mudd Hall,Baltimore,MD 21218 6美国马里兰州巴尔的摩市7 8 *应向其通信。 peter.sarin@helsinki.fi, +358-2941-59533 92生物学系,约翰·霍普金斯大学(Johns Hopkins University),3400 N. Charles St.,235 Mudd Hall,Baltimore,MD 21218 6美国马里兰州巴尔的摩市7 8 *应向其通信。peter.sarin@helsinki.fi, +358-2941-59533 9
核糖体 DNA (rDNA) 基因座含有数百个串联重复的核糖体 RNA 基因拷贝,这些基因是维持细胞生存所必需的。这种重复性使其极易因 rDNA 拷贝之间的染色单体内重组而导致拷贝数 (CN) 丢失,从而威胁到 rDNA 的多代维持。如何抵消这种威胁以避免谱系灭绝仍不清楚。在这里,我们表明 rDNA 特异性逆转录转座子 R2 对于恢复性 rDNA CN 扩增以维持果蝇雄性生殖系中的 rDNA 基因座至关重要。R2 的消耗导致 rDNA CN 维持缺陷,导致繁殖力在几代内下降并最终灭绝。我们发现,R2 核酸内切酶造成的双链 DNA 断裂(R2 的 rDNA 特异性逆转座的一个特征)会启动 rDNA CN 恢复过程,该过程依赖于 rDNA 拷贝处 DNA 断裂的同源性依赖性修复。这项研究表明,活性逆转座子为其宿主提供了必不可少的功能,这与转座因子完全自私的名声相反。这些发现表明,有利于宿主适应性可能是转座因子抵消其对宿主威胁的有效选择优势,这可能有助于逆转座子在整个分类群中广泛成功。
核型是指基因组构成一组染色体的结构。物种间的核型差异预计会阻碍各种生物过程,如染色体分离和减数分裂染色体配对,从而可能导致不相容性。核型可以在近缘物种之间甚至同一物种的不同种群之间迅速变化。然而,人们对驱动核型进化的力量了解甚少。在这里,我们描述了从塞舌尔群岛分离出来的果蝇品系的独特核型。该品系丢失了 X 染色体上的核糖体 DNA (rDNA) 位点。由于 Y 染色体是唯一其他携带 rDNA 的染色体,所以所有雌性都携带至少一条 Y 染色体作为 rDNA 的来源。有趣的是,我们发现该品系还携带一条截短的 Y 染色体 (YS ),尽管它无法支持男性生育能力,但它在种群中稳定维持。我们的建模和细胞学分析表明,Y 染色体对雌性适应度的负面影响大于 YS 染色体。此外,我们生成了一个独立的菌株,该菌株缺乏 X rDNA,其核型为 XXY 雌性和 XY 雄性。该菌株迅速进化出多种核型:两个新的截短 Y 染色体(类似于 YS ),以及两个独立的 X 染色体融合,其中包含 Y 衍生的 rDNA 片段,从而消除了雌性对 Y 染色体的依赖。考虑到罗伯逊融合经常发生在人类的 rDNA 基因座上,我们提出 rDNA 基因座不稳定性可能是核型进化的驱动力之一。
1 阿尔伯塔大学物理系,艾伯塔省埃德蒙顿 T6G 2E1,加拿大;munshi1@ualberta.ca (SM);kneupane@ualberta.ca (KN);ileperum@ualberta.ca (SMI);mhalma@ualberta.ca (MTJH) 2 马里兰大学细胞生物学和分子遗传学系,马里兰州帕克分校 20742,美国;jkelly22@umd.edu (JAK);chalpern@terpmail.umd.edu (CFH) 3 霍华德休斯医学研究所珍莉莉亚研究园区,弗吉尼亚州阿什本 20147,美国 4 阿尔伯塔大学李嘉诚病毒学研究所,艾伯塔省埃德蒙顿 T6G 2E1,加拿大* 通讯地址:dinman@umd.edu (JDD);sloerch@ucsc.edu (SL); michael.woodside@ualberta.ca (MTW) † 这些作者对这项工作做出了同等贡献。‡ 当前地址:美国加利福尼亚州圣克鲁斯市加利福尼亚大学化学与生物化学系,邮编 95064。
1。1.3.1 Sterile medications ...................................................................... 14 2.1.3.2无菌测试........................................................................................................................................................................................................1.3.3聚合酶链反应(PCR)............................................................................................................................................................................................................................................... 17 4。1.3.4哥伦比亚的PCR研究..........................................................................................................................................................................................................................目标................................................................................................................................................................................................................................................................................
。CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可证(未经同行评审认证)是作者/资助者,他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。
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尽管核糖体 DNA 和转座因子都是基因组的显著特征,但乍一看,它们都是没有太多共同点的遗传因子:核糖体 DNA 主要被视为管家基因,支持所有主要基因组功能,而转座因子通常被描绘成自私和破坏性的。这些对立的特征也反映在其他属性中:串联组织(核糖体 DNA)与分散组织(转座因子);协同进化(核糖体 DNA)与多样化进化(转座因子);延长基因组稳定性的活动(核糖体 DNA)与缩短基因组稳定性的活动(转座因子)。回顾已报道的核糖体 DNA-转座因子相互作用的相关实例,我们注意到两种重复类型至少具有四个结构和功能特征:(1)它们是在进化时间尺度上塑造基因组的重复 DNA,(2)它们交换结构基序并可以进入共同进化过程,(3)它们是严格控制的基因组应激传感器,在衰老/老化中发挥关键作用,以及(4)它们具有共同的表观遗传标记,例如 DNA 甲基化和组蛋白修饰。在这里,我们概述了核糖体 DNA 和转座因子的结构、功能和进化特征,讨论了它们的作用和相互作用,并强调了我们在理解核糖体 DNA-转座因子关联方面的趋势和未来方向。
引言钻石黑芬贫血(DBA,OMIM#105650)是一种骨髓衰竭(BMF)综合征,其为原始的,其特征在于红细胞内多症(1)。此外,据报道DBA患者的骨髓增生性合成剂,急性髓样白血病和实体瘤的发生率增加(2)。DBA的估计患病率为每百万活产7例(1)。大多数情况与6个核糖体蛋白(RP)基因中的任何一个(RPS19,RPL5,RPS26,RPL11,RPL11,RPL35A和RPS24)有关。实际上,编码RP的80个基因中的任何一个中的任何一个,以及编码小核糖体亚基的11个基因中的任何一个或编码大型亚基的13个基因中的突变(3)(3)。最常见的RP基因是RPS19(所有DBA病例的25%)(1)。此外,最近的报告