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阴离子交换和 Pendrin 小分子抑制的机理
Pendrin (SLC26A4) 是一种阴离子交换剂，可介导碳酸氢盐 (HCO 3 − ) 与氯化物 (Cl − ) 的交换，对于维持肾脏、肺和耳蜗的 pH 值和盐分稳态至关重要。Pendrin 还会将碘化物 (I − ) 输出到甲状腺中。人类的 Pendrin 突变会导致 Pendred 综合征，从而引起听力丧失和甲状腺肿。抑制 pendrin 是减轻哮喘气道高反应性和治疗高血压的一种有效方法。然而，阴离子交换的机制及其药物抑制作用仍然知之甚少。我们应用低温电子显微镜确定了 Sus scrofa 中 pendrin 在 Cl − 、I − 、HCO 3 − 或脱辅基状态下的结构。结构显示每个原体中都有两个阴离子结合位点，功能分析表明两个位点都参与阴离子交换。这些结构还显示了硫酸盐转运蛋白和抗西格玛因子拮抗剂 (STAS) 与跨膜结构域之间的相互作用，突变研究表明其具有调节作用。我们还确定了 pendrin 与镍氟酸 (NFA) 的复合物的结构，揭示了一种通过与阴离子结合竞争并阻碍阴离子交换所需的结构变化而实现的抑制机制。这些结果为理解阴离子选择性和交换机制及其受 STAS 结构域调控提供了方向。这项工作还为分析与 Pendred 综合征相关的突变的病理生理学奠定了基础。
CRISPR/Cas12a (Cpf1) 引导RNA序列的鉴定
CRISPR（成簇的规律间隔的短回文重复序列）或 CRISPR 相关（Cas）系统已成为一种主要的基因编辑工具。使用 CRISPR 进行基因编辑需要 Cas 蛋白和相应的向导 RNA（gRNA）。然而，低切割效率和脱靶效应会阻碍 CRISPR/Cas 系统的应用。因此，确定特定的 gRNA 至关重要。在生物传感器应用中，由于 Cas12a（Cpf1）的反式切割活性，CRISPR/Cas12a 可以增强识别靶基因的特异性和灵敏度。mtDNA D 环序列是 mtDNA 中最易变的部分，使其适合区分物种。因此，本研究的目的是通过计算机模拟确定野猪 mtDNA D 环的 gRNA 序列。在 GenBank 数据库的帮助下，使用 Benchling 应用程序预测候选 gRNA。随后，使用 BLAST 核苷酸对 gRNA 候选物进行同源性差异分析，并使用 Jalview 进行错配测试。在几个候选物中，候选物 1 被选为最佳选择，脱靶值为 99.8。与竞争对手的同源性差异分析和与 Sus 属的错配测试分别产生了较高的 E 值和较高的百分比值。这表明候选物不会识别其他物种，但可以检测 Sus scrofa 物种的成员。这些 gRNA 候选物可以选择性地且灵敏地应用于生物传感器，以检测肉类掺假。
使用定量聚合酶链反应（QPCR）方法
目前，使用猪污染的食物成分和或加工食品已成为当前的关注和加强问题。这种情况鼓励开发准确的方法，以特别检测猪污染的存在。本研究使用两种样品：（1）新鲜猪肉作为阳性内部控制和（2）用猪肉（碎肉，肉丸，咸牛肉和香肠）制成的加工肉类产品，这些产品使用DNA标记进行了测试。使用猪肉处理的样品是确定加工对DNA片段的影响，并在所使用的检测过程中测试提取方法的刚性。本研究旨在使用定量聚合酶链反应（QPCR）方法检测猪DNA片段。研究首先使用RNA提取试剂盒，DNA提取试剂盒和盐提取方法提取新鲜的猪肉和加工产品，然后使用分光光度计测量DNA/RNA的纯度和浓度。RNA提取物被转化为互补DNA（cDNA），并与使用QPCR分析的DNA提取物（SUS SCROFA）。结果表明，获得的RNA和DNA提取物的浓度为71.1-296,025 ng/ul，纯度不同。在CT 23-28 ng/ul范围内，所有加工产品和阳性内部的样品都是放大的对照，在这种情况下，肉的加工不会影响分析的加工产品的DNA，因此可以检测到DNA片段。关键字：beta aktin，循环阈值，新鲜猪肉，DNA猪肉，qpcrqPCR DNA在工作时间上比cDNA qPCR更有效，因为它不需要RNA的转录阶段。
自然策略Arauco 2023
气候变化：在过去的十年中，鱼类的风险一直是eCɵng生态系统的主要现象，目前有9,000多公顷的生态系统受到影响，目前正在Restoraɵon中。到目前为止，尚无与温度升高或沉淀物变化相关的主要害虫或疾病，但到目前为止，尚未证明存在与MulɵplePaper的不同技术和合作，但正在通过不同的技术和合作来评估一些Arauucaria araucanapopulaɵ和异常死亡率。正在监测有关水平衡，湿地和依赖水的生态系统，特别评估智利最北部地区的地下水水平。添加，我们与受威胁物种的PotenɵAl分布模型一起评估了气候变化的巨大影响，并且已经对智利领域中最大程度地影响的树种进行了辅助的辅助迁移实验。入侵物种：陆地生态系统的主要风险一直是松树后松树和相思物种的优势增加。我们的控制计划将重点放在高度保守的价值领域上，这是重中之重。我们还监测了由野猪（SUS SCROFA）引起的犀牛darwinii的栖息地损害，这些野猪已成为美国的野生动物，并监测了其他可能导致生态系统发生重大变化的入侵物种，尽管到目前为止没有重大影响。自然资源的过度开发：使用快速生长的森林作物减少了Naɵve森林的木材压力，这有助于遏制他们一个多世纪以来遭受的毁灭。Polluɵon：Arauco具有有关空气，水和土壤Polluɵon的严格严格的纤维纤维标准。添加，我们在Arauco的保护区中跟踪非木林森林产品的collecton和访客的携带能力，未检测到nega的影响。以及相关的监测，未检测到Naɵve物种和生态系统的影响。同样适用于工厂，在空气和水中都对Mulɵple化合物进行监测及其在我们运营的生态系统上的影响。