由Genewiz(中国苏州)合成了六个L-硫醇脱氢酶候选候选物,并通过NDE和Xhoi限制位点合成并连接到表达载体PET28A中。大肠杆菌BL21-GOLD(DE3)细胞将带有不同重组质粒的细胞接种到5 ml Lb液体培养基(50μg/ml卡纳米霉素)中,并在37°C下过夜,然后在37°C中培养过夜,然后将其转移到25 ml LB液体培养基(50μg/ml kananamycin)中,并与1:100:100:100:100:100:100:50μg/ml kananamycin)培养。在37°C下以220 rpm摇动所有烧瓶。当600 nm(OD 600)的光密度达到0.6-0.8时,使用0.1 mM异丙基β-D-1-硫代乙型甲酰胺糖苷(IPTG)在20°C下诱导基因表达24小时。随后,将2个mL细胞培养物以12000 rpm离心10分钟。收集细胞并将其重悬于500μl磷酸盐缓冲液(50 mM KPI,5 mM MGSO 4,pH 7.4)中,然后随后
12次在堪萨斯州在2021年在堪萨斯州抓住的12次实验室的甲基苯丙胺实验室事件的总数归类为一锅甲基苯丙胺实验室。使用硝酸铵,氢氧化钠,水,石油馏出物和金属矿物质的一锅生产方法将伪麻黄碱转化为甲基苯丙胺。这种制造方法通常在小型塑料瓶中完成,是便携式的,可以很容易地隐藏。在2021年抓住了使用红磷和氢碘酸产生甲基苯丙胺的一个红磷实验室。使用无水氨和锂或金属产生甲基苯丙胺的无水氨实验室。在2021年扣押的四个实验室是未知类型。执法机构向El Paso情报中心(EPIC)报告的信息表明,2021年在美国占领的大多数甲基苯丙胺实验室都是一锅实验室。2021年在堪萨斯州抓住的十二个实验室比2020年(大流行第一年)的历史最低点增加了。美国各地的实验室数量继续下降。基于报告给Epic的数据,国内甲基苯丙胺秘密的数量
以及基于碳的纳米电子和旋转型的潜在应用。除了可调节的边缘结构和宽度外,GNR中引入曲率是其化学物理特性修饰的强大结构特征。在这里,我们报告了第一个基于pyrene的GNR(PygNR)的有效溶液合成,该溶液通过一锅K区氧化和其相应良好可溶性四氢苯二酚基于多苯乙烯前体的曲线几何形状和曲面几何形状。有效的A 2 B 2型铃木聚合和随后的Scholl反应可提供高达〜35 nm长的弯曲GNR轴承和扶手椅。模型化合物(1)的构造是从四氢苯二酚基的寡苯基前体中的pygnr切割,证明了单锅K区域氧化和Scholl环化的概念和效率,这是由单晶X射线衍射分析清楚地揭示的。PYGNR的结构和光学性质由Raman,FT-IR,固态NMR和UV-VIS分析研究,并支持DFT计算。pygNR显示在680 nm处的吸收最大值,表现为〜1.4 eV的狭窄光带隙,作为低频带GNR的资格。此外,PYGNR上的THZ光谱估计其
。CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可证下可用(未经同行评审认证)是作者/资助者,他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是此预印本的版权持有者此版本于 2024 年 8 月 13 日发布。;https://doi.org/10.1101/2024.08.13.607299 doi:bioRxiv 预印本
更远的地方是太阳对流区,能量以湍流翻腾运动的形式传输,类似于一锅沸腾的汤。可见表面,即光球层,厚度只有约 400 公里。在光球层上方,我们发现了色球层,这是一层薄薄的热气体,延伸至几千公里。在色球层上方是日冕,即太阳大气的最外层。
多个组件部分的长DNA序列的一锅组装是现代合成生物学构建的迅速产生的关键。的一锅组装方法的方法是由短悬垂链接的多个片段(例如金门)取决于准确和公正的连接。迄今为止的连接设计很大程度上取决于使用经验法则和经验成功的使用,而不是有关连接酶保真度和偏见的详细数据。在这项研究中,我们应用了太平洋生物科学单分子实时测序技术来直接测量单个实验中每个可能的5'基础悬垂配对的连接频率。使用IIS类型限制酶BSAI,已应用此综合数据集来预测金门组装(GGA)的准确性。基于连接数据设计的十个片段组件,其连接数据预计会导致高或低的保真度组件。实验结果不仅证实了总体准确性,还确认了观察到的特定不匹配连接误差及其相对频率。数据进一步用于设计LAC操纵子的12-或24-片段组件,这些组件被证明以高忠诚度和效率组装。因此,连接酶保真度数据允许预测高准确的悬垂对套件的设计比经验法则更大的灵活性,即使在定义的编码区域内,也可以在没有天然DNA序列修改的情况下,在高准确的连接点上安装> 20个片段。
一锅法组装来自多个组成部分的长 DNA 序列是快速生成现代合成生物学构建体的关键。一锅法组装由短悬垂结构(例如 Golden Gate)连接的多个片段的方法取决于准确和无偏的连接。迄今为止,连接点的设计很大程度上取决于经验法则和经验成功,而不是连接酶保真度和偏向性的详细数据。在本研究中,我们应用 Pacific Biosciences 单分子实时测序技术在一次实验中直接测量每个可能的 5′-四碱基悬垂结构配对的连接频率。该综合数据集已用于预测使用 IIS 型限制性酶 BsaI 的 Golden Gate 组装 (GGA) 的准确性。根据连接数据设计了十个片段组装,其中连接点预测会导致高或低保真度组装。实验结果不仅证实了总体准确性,还证实了观察到的特定错配连接错误及其相对频率。这些数据还用于设计 12 或 24 个片段的乳糖操纵子组装体,结果表明组装体具有高保真度和高效率。因此,连接酶保真度数据可以预测高精度突出端对集,设计灵活性比经验法则更高,即使在定义的编码区域内也可以在高精度连接点组装 20 多个片段,而无需修改天然 DNA 序列。
多个组件部分的长DNA序列的一锅组装是现代合成生物学构建的迅速产生的关键。的一锅组装方法的方法是由短悬垂链接的多个片段(例如金门)取决于准确和公正的连接。迄今为止的连接设计很大程度上取决于使用经验法则和经验成功的使用,而不是有关连接酶保真度和偏见的详细数据。在这项研究中,我们应用了太平洋生物科学单分子实时测序技术来直接测量单个实验中每个可能的5'基础悬垂配对的连接频率。使用IIS类型限制酶BSAI,已应用此综合数据集来预测金门组装(GGA)的准确性。基于连接数据设计的十个片段组件,其连接数据预计会导致高或低的保真度组件。实验结果不仅证实了总体准确性,还确认了观察到的特定不匹配连接误差及其相对频率。数据进一步用于设计LAC操纵子的12-或24-片段组件,这些组件被证明以高忠诚度和效率组装。因此,连接酶保真度数据允许预测高准确的悬垂对套件的设计比经验法则更大的灵活性,即使在定义的编码区域内,也可以在没有天然DNA序列修改的情况下,在高准确的连接点上安装> 20个片段。
多个组件部分的长DNA序列的一锅组装是现代合成生物学构建的迅速产生的关键。的一锅组装方法的方法是由短悬垂链接的多个片段(例如金门)取决于准确和公正的连接。迄今为止的连接设计很大程度上取决于使用经验法则和经验成功的使用,而不是有关连接酶保真度和偏见的详细数据。在这项研究中,我们应用了太平洋生物科学单分子实时测序技术来直接测量单个实验中每个可能的5'基础悬垂配对的连接频率。使用IIS类型限制酶BSAI,已应用此综合数据集来预测金门组装(GGA)的准确性。基于连接数据设计的十个片段组件,其连接数据预计会导致高或低的保真度组件。实验结果不仅证实了总体准确性,还确认了观察到的特定不匹配连接误差及其相对频率。数据进一步用于设计LAC操纵子的12-或24-片段组件,这些组件被证明以高忠诚度和效率组装。因此,连接酶保真度数据允许预测高准确的悬垂对套件的设计比经验法则更大的灵活性,即使在定义的编码区域内,也可以在没有天然DNA序列修改的情况下,在高准确的连接点上安装> 20个片段。