由Genewiz（中国苏州）合成了六个L-硫醇脱氢酶候选候选物，并通过NDE和Xhoi限制位点合成并连接到表达载体PET28A中。大肠杆菌BL21-GOLD（DE3）细胞将带有不同重组质粒的细胞接种到5 ml Lb液体培养基（50μg/ml卡纳米霉素）中，并在37°C下过夜，然后在37°C中培养过夜，然后将其转移到25 ml LB液体培养基（50μg/ml kananamycin）中，并与1：100：100：100：100：100：100：50μg/ml kananamycin）培养。在37°C下以220 rpm摇动所有烧瓶。当600 nm（OD 600）的光密度达到0.6-0.8时，使用0.1 mM异丙基β-D-1-硫代乙型甲酰胺糖苷（IPTG）在20°C下诱导基因表达24小时。随后，将2个mL细胞培养物以12000 rpm离心10分钟。收集细胞并将其重悬于500μl磷酸盐缓冲液（50 mM KPI，5 mM MGSO 4，pH 7.4）中，然后随后