方法 • 开发了生物信息学流程来识别和确定全基因组基因间整合位点的优先顺序,并筛选了引导 RNA(gRNA)切割效率、基因盒整合效率、由此产生的细胞适应性和 GFP 表达水平的位点,• 构建了着陆垫系统以实现在一轮转化中多个基因或基因的多拷贝的整合,• 通过整合多个拷贝的 5-氨基乙酰丙酸合酶来产生 5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)和使用单个 gRNA 产生琥珀酸的生物合成途径,在 I. orientalis 中展示了该系统。
非传统酵母东方伊萨酵母 (Issatchenkia orientalis) 的强健特性使其能够在高酸性条件下生长,因此,人们对使用多种碳源生产有机酸的兴趣日益浓厚。最近,东方伊萨酵母的遗传工具箱的开发,包括附加型质粒、多个启动子和终止子的特征以及 CRISPR-Cas9 工具,简化了东方伊萨酵母的代谢工程工作。然而,由于缺乏有效的多拷贝整合工具,多重工程仍然受到阻碍。为了促进通过多重 CRISPR-Cas9 介导的基因组编辑构建大型复杂代谢途径,我们开发了一条生物信息学流程来识别和确定全基因组基因间位点的优先级,并表征了位于 21 个基因间区域的 47 个 gRNA。对这些位点进行了向导 RNA 切割效率、基因盒的整合效率、由此产生的细胞适应度和 GFP 表达水平的筛选。我们进一步利用来自这些已充分表征的基因座的组件开发了一种着陆垫系统,该系统可帮助利用单个引导 RNA 和用户选择的多个修复模板整合多个基因。我们已经证明了利用着陆垫同时将 2、3、4 或 5 个基因整合到目标基因座中,效率超过 80%。作为概念验证,我们展示了如何通过一步整合多个位点的五个基因拷贝来提高 5-氨基乙酰丙酸的产量。我们进一步证明了该工具的效率,即利用单个引导 RNA 和五个不同的修复模板整合五个基因表达盒,构建了琥珀酸生产代谢途径,从而在批量发酵中生产出 9 g/L 的琥珀酸。这项研究证明了单个 gRNA 介导的 CRISPR 平台在非传统酵母中构建复杂代谢途径的有效性。该着陆垫系统将成为 I. orientalis 代谢工程的宝贵工具。
动物学是基础科学的主要主题之一,涉及动物生物学的各个方面。B.Sc.的基于学习成果的课程框架动物学学位是结构化的,牢记学生的愿望,改变了学科的性质,以及结合了最新进步的学习环境,即提高学习者技能的技术。新结构有望提高学生之间的理解水平,并维护动物学的标准程序。该框架为教学大纲设计以及用于教学过程和学习评估所采用的方法提供了灵活性和创新。主要目标是提高学生的学科知识,使他们成为关键的思想家,并能够解决与动物学有关的问题,逻辑上有效地与动物学有关,以使我们的学生在确保学术界,行业,研发领域的职业方面具有竞争优势。根据《东方学院科学与艺术》(自治)的本科课程法令形成了课程结构。
• 2022 年 8 月 30 日:BOE 批准聘请 JSC Consulting 的 Jerry Covey 和阿拉斯加督学协会的 Sean Dusek 来促进战略规划 • 2 月 21 日:委员会成员资格申请开放 • 3 月 7 日至 14 日:面向社区的战略规划调查 • 3 月 24、25、26 日和 4 月 13、14 日:战略规划委员会会议
P2012 STOL 是一款全金属结构飞机,配备双涡轮增压活塞发动机、上单翼、非增压,并配备固定三轮起落架,是唯一一款符合最新认证修正案的双活塞短距起降飞机。它提供 1284 公斤(2831 磅)的有效载荷,最大起飞重量为 3680 公斤(8113 磅),同时保证了现代设计、舒适的客舱和九个单人乘客座位。
提示-结果关联可以通过认知和情感领域的消退、反条件作用和新奇促进消退来减弱。对于目标 CS-中性结果关联,这些治疗同样容易更新。但对于目标 CS-欲望结果关联,具有厌恶或中性结果的反条件作用更难以更新。此外,发现具有厌恶结果的反条件作用会改变目标提示的效价。因此,干扰结果的情感效价在认知和情感领域都很重要。
摘要:东方山羊豆是豆科植物,具有重要的生态和经济价值,因其抗逆性强、蛋白质含量高而被广泛栽培。然而,东方山羊豆的基因组信息尚未见报道,限制了其进化分析。由于基因组较小,叶绿体相对容易获得基因组序列以进行系统发育研究和分子标记开发。本文对东方山羊豆叶绿体基因组进行了测序和注释。结果表明,东方山羊豆叶绿体基因组长度为125,280 bp,GC含量为34.11%。共鉴定出107个基因,包括74个蛋白质编码基因,29个tRNA和4个rRNA。东方山羊豆叶绿体基因组中丢失了一个反向重复(IR)区。此外,与其近缘种G. officinalis的叶绿体基因组相比,有5个基因( rpl22 、 ycf2 、 rps16 、 trnE-UUC 和 pbf1 )丢失。共检测到84个长重复序列和68个简单序列重复序列,可作为G. orientalis及其近缘种遗传研究的潜在标记。我们发现,在G. officinalis与其他3个Galegeae物种( Calophaca sinica 、 Caragana jubata 、 Caragana korshinskii )的两两比较中,petL 、 rpl20 和 ycf4 3个基因的Ka/Ks值大于1,表明这3个基因受到了正向选择。 15个Galegeae物种的比较基因组分析表明,大多数保守的非编码序列区域和两个基因区域(ycf1和clpP)分化程度较高,可作为DNA条形码用于快速准确的物种鉴定。基于ycf1和clpP基因构建的系统发育树证实了Galegeae物种间的进化关系。此外,在所分析的15个Galegeae物种中,Galega orientalis在ycf1基因中有一个独特的30 bp内含子,而Tibetan liangshanensis在clpP基因中缺少两个内含子,这与现有只有IR缺失支(IRLC)中的甘草属物种缺少两个内含子的结论相反。总之,首次确定并注释了G. orientalis的完整叶绿体基因组,这可以为Galegeae属内尚未解决的进化关系提供见解。
1 青岛大学威海创新研究院电气工程学院,青岛 266000,中国 2 西安交通工程学院,西安 710300,中国 3 青岛海尔洗衣机有限公司,青岛 26000,中国 * 电子邮件:wkwj888@163.com 收稿日期:2022 年 9 月 13 日 / 接受日期:2022 年 11 月 13 日 / 发表日期:2022 年 11 月 30 日 塑料制品产量不断增加和回收利用不足,导致白色污染问题困扰全球,严重影响了生态环境、海洋生物和排水系统。此外,低功耗电子设备的广泛应用使功耗成为不可忽视的因素。因此,回收废弃的塑料袋作为摩擦纳米发电机(TENG)的摩擦材料,收集日常生活中的机械能并将其转化为持续稳定的电能,可以同时缓解白色污染和能耗两大问题。此外,利用TENG构建的自供电系统在驱动低功耗电子产品、环境监测、可穿戴设备等方面有着巨大的潜力。据此,本文概述了白色污染的概况、TENG的理论起源、工作原理和理论模型,分析了利用废旧塑料袋制造TENG的可行性,以及该自供电传感系统的应用进展,并对未来进行了展望。关键词:摩擦纳米发电机;自供电系统;废旧塑料袋;TENGs 1.引言