引用这篇文章:Rahul K. Suryawanshi,Taha Y. Taha,Maria McCavitt-Malvido,Ines Silva,Mir M. Khalid,Abdullah M. Syed,Irene P. Chen,Prachi Saldhi OR-GONZALEZ,威尼斯·塞维利塔,阿米莉亚·格里瓦,珍妮·恩格扬,诺亚·库吉玛,特雷莎·阿雷拉诺,阿利亚·巴斯萨尼奇,维多利亚·赫斯,玛丽亚·赫克斯,玛丽亚·谢克拉,劳伦·洛佩兹NA,Lee Spraggon,Charles Y. Chiu&Melanie Ott(2023)。
1 型单纯疱疹病毒 (HSV-1) 可导致严重的眼部感染和失明。我们之前已证明 HSV-1 VC2 疫苗株在小鼠和豚鼠受到 HSV-1 或 HSV-2 阴道攻击后可保护它们免受生殖器疱疹感染。在本研究中,我们评估了小鼠在受到致命人类临床菌株 HSV-1(McKrae) 眼部攻击后,肌肉内接种 VC2 疫苗对疱疹性角膜炎的疗效。与亲本菌株 HSV-1(F) 相比,小鼠接种 VC2 疫苗可产生更好的保护作用和发病率控制。具体而言,在受到 HSV-1(McKrae) 眼部攻击后,所有接种 VC2 疫苗的小鼠均存活,而接种 HSV-1(F) 疫苗的小鼠中有 30% 和模拟接种疫苗的小鼠中有 100% 在攻击后死亡。接种 VC2 的小鼠没有表现出任何眼部感染症状,并且完全从最初的结膜炎中恢复。相反,接种 HSV-1(F) 的小鼠患上了时间依赖性的进行性角膜炎,其特征是角膜混浊,而模拟接种的动物表现出更严重的基质性角膜炎,其特征是免疫细胞浸润和角膜基质中的新生血管形成,并伴有角膜混浊。与模拟或 HSV-1(F) 接种组相比,VC2 免疫小鼠的角膜表现出 CD3 + T 淋巴细胞浸润显著增加,Iba1+ 巨噬细胞浸润减少。攻击后,VC2 免疫产生的病毒中和滴度高于 HSV-1(F)。此外,在眼部 HSV-1 (McKrae) 攻击后,VC 疫苗接种显著增加了引流淋巴结中的 CD4 T 中枢记忆 (TCM) 亚群和 CD8 T 效应记忆 (TEM) 亚群,随后是模拟或 HSV-1(F) 疫苗接种。这些结果表明 VC2 疫苗接种在攻击部位产生保护性免疫反应,以防止 HSV-1 引起的眼部发病。
1 萨萨里大学生物医学科学系, 07100 萨萨里, 意大利; c.locci3@phd.uniss.it (CL); iazzena@uniss.it (IA); oripl@uniss.it (PLF); darsanna@uniss.it (DS) 2 萨萨里大学兽医学系,07100 萨萨里,意大利; marcasu@uniss.it 3 Azienza Ospedaliera Universitaria (AOU) 萨萨里,07100 萨萨里,意大利 4 罗马生物医学大学校园医学统计和分子流行病学部,00128 罗马,意大利; ale_ciccozzi97@icloud.com (AC); m.ciccozzi@unicampus.it(MC) 5 可持续发展和同一个健康科学与技术,罗马生物医学大学,00128 罗马,意大利;giovanetti.marta@gmail.com 6 Rene Rachou,Oswaldo Cruz 基金会,贝洛奥里藏特 30190-009,米纳斯吉拉斯,巴西 7 罗马第一大学生物化学科学系“A. Rossi Fanelli”,00185 罗马,意大利;quaranta.1952503@studenti.uniroma1.it(MQ);stefano.pascarella@uniroma1.it(SP) 8 公共卫生和传染病系,罗马第一大学 Umberto I 综合医院,00161 罗马,意大利; giancarlo.ceccarelli@uniroma1.it 9 Campus Bio-Medico, Fondazione Policlinico Universitario, 00128 Rome, Italy * 通讯作者:fscarpa@uniss.it † 这些作者对这项工作做出了同等贡献。
图 1 hiPSC-NSC 的生成和核型分析。A、在 Matrigel 上生长的 R-iPSC4-hiPSC 菌落。B、用胶原酶 IV 消化 hiPSC 后形成的胚状体 (EB)。C、用 TGF β 抑制剂 SB421543 和 BMP 抑制剂 dorsomorphin 处理的 EB 接种到聚-l-鸟氨酸和层粘连蛋白包被的板上后 7-10 天出现玫瑰花结状结构。D、通过解离玫瑰花结状结构并接种到聚-l-鸟氨酸和层粘连蛋白包被的板上获得神经外胚层细胞。E、F、这些细胞表达 NSC 标记物 Nestin (E) 并在分化第 30 天分化为表达微管相关蛋白 2 (MAP2) 的神经元 (F)。细胞核用 Hoechst 33342 (蓝色) 染色。比例尺:100 µ m。G、H、基于全基因组 SNP 阵列的 hiPSC-NSC 核型分析。针对位于该区域的阵列上所有 SNP,绘制了每条染色体的 B 等位基因频率(上图)和 log 2 R 比率(下图)。每个点都是一个 SNP。虽然第 10 代(p10)的细胞没有显示任何主要核型异常(G),但 p16 的 hiPSC-NSC 表现出 1 号染色体整个长臂的重复,dup(1)q(H)
酵母基因组删除项目 (SGDP) 使用五株源自酿酒酵母 S288C 的 Dharmacon 酵母敲除 YKO 亲本菌株,生成了一套几乎完整的酵母开放阅读框 (ORF) 敲除。1 使用基于 PCR 的策略将每个 ORF 替换为 KanMX 盒,该盒包含每个删除的独特标签“条形码”。生成了四个不同的突变体集合:交配类型 MATa 和 MATalpha 的单倍体、非必需基因的纯合二倍体和包含必需和非必需 ORF 的杂合二倍体。存储: