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伏立诺他通过上调 PTEN 诱导乳腺癌细胞 G2/M 细胞周期停滞
摘要。– 目的：乳腺癌 (BC) 是全世界女性中最常见的癌症类型。人们提出了各种方法来治疗这种疾病，但没有一种单一的药物被证明是有效的。因此，了解不同药物的分子机制变得势在必行。本研究旨在评估厄洛替尼 (ERL) 和伏立诺他 (SAHA) 在诱导乳腺癌细胞凋亡中的作用。还根据一些癌症相关基因的表达谱评估了这些药物的作用；PTEN、P21、TGF 和 CDH1。材料和方法：在本研究中，乳腺癌细胞 (MCF-7) 和 MDA-MB-231 以及人羊膜细胞 (WISH) 用两种浓度 (50 和 100 µM) 的厄洛替尼 (ERL) 和伏立诺他 (又名 SAHA) 处理 24 小时。收获细胞用于下游分析。通过流式细胞仪分析DNA含量和细胞凋亡，并进行qPCR以评估不同癌症相关基因的表达。结果：结果表明，与正常细胞和对照相比，ERL和SAHA在24小时后将两种乳腺癌细胞都抑制在G2/M期。对于细胞凋亡，随着两种所用药物的浓度增加，BC细胞显示出升高的总细胞凋亡水平（早期和晚期），在24小时处理中，ERL的最有效浓度为100µM。在对照细胞中，SAHA被证明是在100µM浓度下最有效的药物，在24小时处理中细胞凋亡百分比范围为1.7-12％。在所使用的两种乳腺癌细胞系中，坏死也呈剂量依赖性。我们进一步评估了 PTEN 、 P21 、 TGF- β 和 CDH1 的表达谱。在 MCF-7 中，数据表明对于 TGF- β 、 PTEN 和 P21 ，最有效的治疗是浓度为 100 µM 的 SAHA，而对于 CDH1 ，最有效的浓度是 100 µM 的 ERL。在 MDA-MB-232 中也观察到了类似的情况，其中对于 TGF- β 、 PTEN 和 P21 ，最有效的治疗是浓度为 100 µM 的 SAHA，而对于 CDH1 ，最有效的浓度是 50 µM 的 SAHA。结论：我们的结果揭示了 ERL 和 SAHA 在调节癌症相关基因表达中的作用，尽管这些数据需要进一步研究。
雌激素 α 和孕激素受体在三阴性乳腺癌细胞系中的调节：伏立诺他和吲哚-3-甲醇的体外作用
摘要。背景/目的：三阴性乳腺癌 (TNBC) 是一种乳腺癌亚型，具有高度侵袭性，预后不良，对治疗的反应不同。本研究调查了伏立诺他和吲哚-3-甲醇 (I3C) 在调节 TNBC 中通常不表达的关键受体方面的作用。材料和方法：使用实时 PCR、免疫染色和蛋白质印迹，在四种不同的 TNBC 细胞类型中检查了雌激素受体 α (ER)、孕激素受体 (PR) 和人表皮生长因子受体 2 (HER2) 受体的重新表达。结果：使用伏立诺他和 I3C 在三种亚型中重新表达 ERα。还检测到伏立诺他重新表达 PR。伏立诺他和 I3C 均未导致 HER2 受体重新表达。还注意到生长和对他莫昔芬的敏感性显着下降。结论：本研究结果表明，伏立诺他和 I3C 通过多种途径调节某些 TNBC 亚型中关键受体的重新表达，并且这些影响可受到 TNBC 分子特征的影响。
组蛋白去乙酰化酶抑制剂（伏立诺他）
• 方法 2（亲和纯化） 1. 洗涤 4 o C（冰上）用洗涤缓冲液洗涤珠子 3 次。 2. 添加样品溶液 将 1000ul HeLa 细胞提取物添加到珠子中。 3. 反应 4 o C 孵育 240 分钟。 4. 洗涤 除去样品溶液。4 o C（冰上）用洗涤缓冲液洗涤珠子 3 次。 5. 洗脱 伏立诺他洗脱： - 添加 40ul 洗脱缓冲液并重新悬浮珠子。在 98 o C 下煮沸 5 分钟并除去珠子。 伏立诺他洗脱： + 在洗涤缓冲液中加入 30ul 25mM 伏立诺他并重新悬浮珠子。将管放在冰上一小时，通过间歇轻拍使结合的蛋白质洗脱。旋转后，磁性分离。将上清液转移到新的干净管中98 o C 煮沸 5 分钟。 6. 通过 SDS-PAGE 和银染分析样品