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组蛋白去乙酰化酶抑制剂（伏立诺他）

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组蛋白去乙酰化酶抑制剂（伏立诺他）

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• 方法 2（亲和纯化） 1. 洗涤 4 o C（冰上）用洗涤缓冲液洗涤珠子 3 次。 2. 添加样品溶液将 1000ul HeLa 细胞提取物添加到珠子中。 3. 反应 4 o C 孵育 240 分钟。 4. 洗涤除去样品溶液。4 o C（冰上）用洗涤缓冲液洗涤珠子 3 次。 5. 洗脱伏立诺他洗脱： - 添加 40ul 洗脱缓冲液并重新悬浮珠子。在 98 o C 下煮沸 5 分钟并除去珠子。伏立诺他洗脱： + 在洗涤缓冲液中加入 30ul 25mM 伏立诺他并重新悬浮珠子。将管放在冰上一小时，通过间歇轻拍使结合的蛋白质洗脱。旋转后，磁性分离。将上清液转移到新的干净管中98 o C 煮沸 5 分钟。 6. 通过 SDS-PAGE 和银染分析样品

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