摘要 骨细胞在骨骼中起着指挥官的核心作用,可以调节骨重塑过程。虽然已知骨细胞是从成骨细胞分化而来的,但对骨细胞分化机制的了解仍然很少。本研究的目的是利用三维 (3D) 细胞培养技术阐明骨细胞的分化能力。我们首先通过调整圆底孔中传代培养细胞的数量,制作了一个由小鼠成骨细胞样细胞重建的自组织球体。与传统的二维 (2D) 单层模型相比,3D 球体在 2 天内在体外表现出更高的骨细胞基因表达。作为尺寸依赖性实验的结果,成骨细胞样细胞可能存在适当的细胞-细胞和细胞-ECM 相互作用,以 3D 球体培养的形式诱导骨细胞生成。此外,本模型表明,在经过 7 天的长时间培养后,球体仍能发挥出长期的骨细胞分化能力。总之,我们描述了由成骨细胞样细胞重建的自组织骨细胞球体,并进一步提出了该球体作为一种新的体外组织工程骨细胞模型的潜在应用。
汽车修理厂的废物管理不当对环境污染造成了重大影响。这些修理厂附近的区域暴露于大量废机油和其他碳氢化合物废物中。生物修复可能是一种实用的解决方案,因为它具有更好的成本效益和高完全矿化概率,不会造成二次污染。因此,本研究旨在分离、表征和鉴定能够利用和降解碳氢化合物的真菌。这项研究是通过收集马来西亚半岛北部地区受石油污染的场所(包括车间、家庭和污水处理厂)的土壤和水样本进行的。通过在含有废机油(碳氢化合物)作为唯一碳源的选择性琼脂上培养真菌来筛选碳氢化合物降解能力。在选择性琼脂上生长的真菌菌落被划线并传代培养到马铃薯葡萄糖琼脂上,直到获得纯分离物。通过 2,6-二氯苯酚靛酚 (DCPIP) 测定进行进一步筛选,以确认所有真菌分离物利用碳氢化合物的能力。根据形态学特征和显微镜观察对分离的真菌进行了鉴定。从石油污染环境中分离出的四种真菌被鉴定为 Aspergillus sydowii USM-FH1、Aspergillus westerdijkiae USM-FH3、Curvularia lunata USM-FH6 和 Chaetomium globusum USM-FH8。这些真菌分离物在烃类污染场地的生物修复中表现出良好的应用潜力。
脑心浸液琼脂、胰蛋白酶大豆肉汤、巯基乙酸盐肉汤和血琼脂。对于支原体检测,样品分别在胸膜肺炎样生物肉汤和琼脂(支原体培养和维持的选择性培养基)中培养和传代培养(10)。在开始和每次应激情况后进行物理化学测试,包括稳定剂含量(MgCl 2 )、气密性、外观、标签、pH 值和可提取量。测试时考虑外观、稠度、颜色、透明度和任何可见颗粒。检查标签的稳定性和管的气密性。通过络合滴定法测试 MgCl 2 含量,通过评估氢离子含量确定样品的 pH 值。最后,通过滴数估算每个小瓶的容量(8)。所有样品均在暴露于冻融循环和-20、2-8、22-25 和 35-37 ºC 的温度 2、4、7、10、14、21、30 和 60 天后检测效力(11):制备 HeLa 细胞(ATCC CCL-2)(12)后,稀释疫苗并加入微量滴定板(Nunc)。然后,将细胞悬液(2× 10 5 细胞/毫升)加入到板中。4-7 天后,观察细胞的细胞病变作用。疫苗的 CCID50 是通过采用 Spearman-Karber 方法估算每剂 50% 终点来确定的(13)。然后,重复测定三次几何平均滴度。根据 WHO 的要求,二价疫苗的滴度必须超过 10 6 CCID50/剂,这是最低保护滴度(14)。 VVM 的分类如下:0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%