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抽象的支原体物种是能够自我复制的最小原核生物。在体外感染模型中使用了哺乳动物细胞,支原体牛(M. bovis)和牛乳腺上皮细胞(BMEC)的支原体诱导的自噬。最初,细胞内牛乳杆菌被封闭在BMEC中的膜状结构中,如透射电子显微镜所看。在受感染的BMEC中,通过蛋白质印迹,RT-PCR和激光共聚焦显微镜证实了LC3II的增加,并在感染后1、3和6 h时确认自噬,并在6 hpi处峰值。然而,随后阻塞了牛肉菌诱导的自噬通量。p62降解。beclin1表达在12和24 hpi时降低。此外,自噬体成熟被Bovis颠覆。自噬体酸化。 LAMP-2a蛋白质水平的降低表明溶酶体受到感染的损害。相比之下,自噬(带雷帕霉素或HBSS)激活通过增加牛乳杆菌向溶酶体的递送,克服了牛肉杆菌诱导的吞噬型封锁,并同时降低了细胞内牛bovis的bovis重复。总而言之,尽管牛乳杆菌感染在BMEC中诱导了自噬,但随后抑制自噬 - 某些成熟的自噬通量受到了损害。因此,我们得出的结论是,牛乳杆菌颠覆了自噬以促进其在BMEC中的细胞内复制。这些发现是未来研究的动力,以进一步表征Bovis和哺乳动物宿主细胞之间的相互作用。关键字:支原体牛,牛乳腺上皮细胞,自噬,溶酶体,细胞内复制
基础层的另一个关键成分是黑色素,它会产生黑色素,保护人体免受紫外线的侵害,并给皮肤和/或其附属物(头发,羽毛,鳞片)的色素沉着。在人类中,黑素细胞位于基础层的干细胞之间,它们通常小于基础干细胞,但具有广泛的细胞质树突,延伸到颗粒层。每平方英尺的皮肤有大约1500个黑素细胞,与基础层干细胞的比例为1:10。人们可能认为皮肤色素沉着与黑素密度有关,但实际上与黑素细胞活性有关4,5。黑色素细胞的主要作用是黑色素或黑色素发生的产生,黑色素生成是eumelanin是人类中最丰富成员的色素蛋白家族。黑色素发生发生在黑色素体中,黑色素细胞的高度专业细胞器具有酸性内部。它始于氨基酸酪氨酸,该氨基酸酪氨酸被黑素细胞特异性酶转化为多季季酮:酪氨酸酶6。一旦Eumelanin成熟,它就会包装在黑色素体内。它们通过黑色素细胞细胞质扩展向上传播,直到它们被颗粒层7的角质形成细胞释放并占据。
Laetitia Gerossier 1†,AnaëlleDubois1†,Alexia Paturel 1,Nadim Fares 1 **,Damien Cohen 1,Phillippe Merle 1,2,Joel Lachuer 1,3,Joel Lachuer 1,3,Anne Wierinckx 1,3,Anne Wierinckx 1,3,Pierre Saintigny 1,4,Brigits Brigite Bande Bancel 5 BérengèreOuine 8,AurélieCartier 8,Leanne de Koning 8,Vincent Puard 8,Ivan Bieche 7,Hector Hernandez-Vargas 1,Janet Hall 1,Isabelle Chemin 1*。1。Lyon,Claude Bernard Lyon 1 University,Inserm,CNRS,CenterLéonBérard,里昂里昂癌症研究中心,里昂,69008,法国。 2。 北部医院集团肝病学系,里昂里昂的民用临时医院,69000法国3。 profefxpert,sfr-est,CNRS UMR-S3453,Inserm US7,Lyon Cedex 08,F-69373,法国4。Lyon,Claude Bernard Lyon 1 University,Inserm,CNRS,CenterLéonBérard,里昂里昂癌症研究中心,里昂,69008,法国。2。北部医院集团肝病学系,里昂里昂的民用临时医院,69000法国3。profefxpert,sfr-est,CNRS UMR-S3453,Inserm US7,Lyon Cedex 08,F-69373,法国4。法国里昂中心莱昂·贝拉德(CenterLéonBérard)医学肿瘤学系5.解剖学服务,东医院集团,里昂里昂的民用临终关怀医院,69000,法国6。解剖学和病理细胞学极点IUC肿瘤CHU大学图卢兹癌研究所 - 肿瘤,图卢兹,F -31059,法国7。遗传学系,库里研究院,PSL研究大学,巴黎,F-75005,法国8。法国PSL研究大学的转化研究系,法国F-75005
C9ORF72基因中的GGGGCC 24+六核苷酸重复膨胀(HRE)是肌萎缩性侧向硬化症(ALS)和额颞痴呆(FTD)最常见的遗传学原因(ALS),致命的神经退行性疾病,没有治疗或不接受疾病的疾病疾病的疾病降低或不得已。神经元死亡的机械基础包括C9orf72单倍依耐酸,核中RNA结合蛋白的隔离以及二肽重复蛋白的产生。在这里,我们使用了腺相关的病毒载体系统来提供CRISPR/CAS9基因编辑机构,以实现从C9ORF72基因组基因座中移除HRE。我们证明了三种含有膨胀的小鼠模型(500 - 600重复)以及患者来源的IPSC运动神经元和脑类动物(450重复)的三种小鼠模型(450个重复)中HRE的成功切除。这导致了RNA焦点,多二肽和单倍耐酸的降低,这是C9-ALS/FTD的主要标志,这使得这是这些疾病的有前途的治疗方法。
在这项研究中,14个植物生长促进性根瘤菌菌株(PGPR)对植物性疾病生长物种的拮抗作用。和泥浆。获得的结果表明,在直接接触和间接生物测定中,14个PGPR菌株对曲霉的抑制作用显着,具有显着变化。双重体外培养试验显示,曲霉菌菌株的生长率很大,范围从25±5.41%(koreensis o3rr25)到71.87±3.12%(Megillus Megallus megaterium fr1.11)。间接拮抗测试表明,由14种测试的PGPR菌株产生的挥发性有机化合物显着抑制了甲状腺菌甲甲氧曲霉的生长,其变化范围为36.61±0.94%(P. brassicacearum o3RR24)至67.75.75±0.94%(B. b. segem.n.94%)(b. segem.n.94%)。暴露于挥发性化合物后对Terricola的微观检查显示出明显的结构损害,包括抑制分生孢子发芽,变形,薄或裂变的结构,不规则的长度以及空片段的形成。B. egaterium fr1.11的体内应用导致脱落叶子和番茄幼苗的真菌发育减少。与对照相比,这种治疗方法在受感染的番茄幼苗中叶绿素A,B和总,类胡萝卜素,多酚和脯氨酸的水平显着增加。将这种PGPR菌株应用于感染的番茄植物中,可以将可比较的丙二醛水平作为对照。B. Megaterium fr1.11在体外和体内抗真菌活性中显示出相当大的体外和体内抗真菌活性,并且可以作为针对替代属植物性疾病的生物控制策略的有前途的候选者。
临床级矢量批次的效力评估对于支持与腺相关病毒(AAV)媒介的释放至关重要,这对于将来的营销授权是必需的。我们已经开发并验证了基于细胞的定量效力测定法,该测定法检测了AAV8-H-H UGT1A1载体的转基因表达和活性,该载体目前正在临床评估中,用于治疗Crigler-Najjar综合征。在体外评估了AAV8-H UGT1A1的效力。在人肝癌7(HUH7)细胞转导后,通过通过胆红素共结合测定法对转基因阳性细胞进行了转基因阳性细胞。将各种AAV8-HUGT1A1批次的体外效力与体内的效力进行了比较。在AAV8-H UGT1A1转导后,表达UGT1A1的细胞的定量显示了线性剂量响应的相对(r 2 = 0.98),具有足够的内内和日期可重复的可重复性(coviation of Variation [CV] = 11.0%和22.0%和22.0%和22.6%,按照一致,胆红素的偶联显示了线性剂量反应关系(r 2 = 0.99),在低剂量范围内具有足够的日期内和日期可重复性(CV = 15.7%和19.7%)。两者在体外效能分析都可靠地转化为AAV8-H UGT1A1矢量批次的体内效率。对AAV8-H UGT1A1的基于细胞的效力分析充分确定了转基因UGT1A1的表达和活性,这与体内效率一致。这种新颖的方法适合确定载体的效力以支持临床级载体释放。
摘要:在体内,细胞居住在3D多孔和动态的微环境中。它提供了在生理和病理过程中调节细胞行为的生化和生物物理提示。在基本细胞生物学研究,组织工程和基于细胞的药物筛查系统的背景下,挑战是开发相关的体外模型,以整合细胞微环境的动态特性。利用有希望的高内相乳液模板,我们在这里设计了一个具有广泛互连的孔隙率的Polyhipe支架,并将其内部3D表面官能化,具有薄薄的电活性导电聚合物聚(3,4-乙基二乙烯二苯乙烯)(PEDOT)将其变成4D电子scappersive。所产生的支架与成纤维细胞,支持的细胞浸润和宿主细胞具有细胞相交,这些细胞显示出3D扩散的形态。它在富含离子和蛋白质的复杂培养基中表现出了强大的致动,并且其电子恢复活力并未通过成纤维细胞定殖改变。多亏了自定义的电化学刺激设置,在共聚焦显微镜下,Polyhipe/Pedot支架的机电响应在原位表征,并显示出10%可逆的体积变化。最后,在几个机电刺激的循环中,设置用于实时监测和原位成纤维细胞在Polyhipe/Pedot支架中培养的原位成纤维细胞。因此,我们证明了这种可调节支架的概念证明,作为未来4D细胞培养和机械生物学研究的工具。关键字:工程细胞微环境,4D支架,响应式细胞培养平台,Polyhipe,Pedot,电子导电聚合物,原位细胞刺激■简介
注意:可以通过将RNTP浓度提高到4 mm,可以获得更高的RNA产量。MGCL浓度也应提高到20mm(高于16毫米的总RNTP浓度4 mm)。