Clemens C. C. Bauer, 1 , 2 , 5 Julia Leonard, 6 Hannah Grotzinger, 7 Melissa A. Giebler, 8 Yesi Camacho Torres, 1 Andrea Imhof, 9 Rachel Romeo, 10 * and John D. E. Gabrieli 1 , 2 * 1 McGovern Institute for Brain Research, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge, Massachusetts, 2 Department of大脑和认知科学,马萨诸塞州技术研究院,马萨诸塞州剑桥,3个言语和听力的课程生物科学与技术计划,哈佛大学,马萨诸塞州剑桥,马萨诸塞州4,内布拉斯加州林肯大学心理学系4,内布拉斯加州林肯大学,内布拉斯加州,内布拉斯加州,康夫斯顿大学,林肯大学5号。加利福尼亚大学,加利福尼亚州圣巴巴拉大学心理与脑科学,纽约州哥伦比亚大学8师学院,纽约,俄勒冈大学9号心理学系,俄勒冈大学,俄勒冈大学,人类发展与定量方法论和量化方法论,聆听与言论科学,以及玛丽·玛丽学院公园,玛丽·玛丽学院公园,玛丽·帕尔特·科学界的计划,
摘要 DNA 双链断裂 (DSB) 的修复对于保持基因组完整性至关重要。因此,定义 DSB 修复的潜在机制将增强我们对这些途径中的缺陷如何导致人类疾病的理解,并可能导致发现新的治疗干预方法。在这里,我们在 U2OS 细胞中建立了一组 HaloTagged DNA 损伤反应因子,这使得荧光 HaloTag 配体能够进行浓度依赖性蛋白质标记。在这些修复因子的内源位点处基因组插入 HaloTag 可保持表达水平,蛋白质保持适当的亚细胞定位、形成病灶的能力并在功能上支持 DSB 修复。我们系统地分析了总细胞蛋白质丰度,测量了激光诱导的 DNA 损伤位点的募集动力学,并通过活细胞单分子成像确定了扩散动力学和染色质结合特性。我们的工作表明,Shieldin 复合物(端接的关键因子)并不存在于预组装状态,并且这些因子在 DSB 处的相对积累具有不同的动力学。此外,活细胞单分子成像揭示了 MDC1 和染色质之间的组成性相互作用,该相互作用由其 PST 重复域介导。总之,我们的研究证明了单分子成像的实用性,可以为 DNA 修复提供机制见解,这将成为表征活细胞中 DNA 修复因子的生物物理特性的强大资源。
挑战之一是未取消英国消费价格通货膨胀率上涨的根本原因。我们复制了欧洲中央银行(ECB),瓶颈和货币政策的最新研究,在那里我们希望对那些特别受经济或供应瓶颈产生特别影响的商品或服务进行分类。这是以85个消费者价格指数(CPI) - 类别水平进行的。然后,我们跟踪这些贡献,以显示这些项目近年来对英国CPI运动的影响。这包括这些价格变动与2012年至2019年更“正常”的时间相比,在此期间,CPI通货膨胀率达到2%的通货膨胀目标。这提供了这些通货膨胀压力最近建立的程度。