CRISPR 技术的最新发展为改进梭菌属专用的基因组编辑工具开辟了新的可能性。在本研究中,我们改进了基于该技术的双质粒工具,以便对产生丙酮/丁醇/乙醇 (ABE) 或异丙醇/丁醇/乙醇 (IBE) 混合溶剂的两种拜氏梭菌参考菌株的基因组进行无瘢痕修饰。在 NCIMB 8052 ABE 生产菌株中,SpoIIE 孢子形成因子编码基因的失活导致孢子形成缺陷的突变体,并且通过用功能性 spoIIE 基因补充突变菌株可以恢复此表型。此外,将真菌纤维素酶编码 celA 基因插入拜氏梭菌 NCIMB 8052 染色体中,产生具有内切葡聚糖酶活性的突变体。接下来,我们采用类似的双质粒方法对天然 IBE 产生菌株 C. beijerinckii DSM 6423 的基因组进行编辑,该菌株此前从未进行过基因工程改造。首先,删除赋予甲砜霉素抗性的 catB 基因,使该菌株与我们的双质粒编辑系统兼容。作为概念验证,我们在 C. beijerinckii DSM 6423 Δ catB 中使用了我们的双质粒系统,以去除内源性 pNF2 质粒,从而大幅提高转化效率。
体细胞突变可能在植物进化中起作用,但与植物体细胞突变有关的常见期望仍未得到充分的测试。与大多数动物不同,假定植物种系在发育后期被搁置,这导致人们期望植物会沿生长积累体细胞突变。因此,对躯体突变的命运做出了一些预测:突变在植物组织中的频率通常很低。高频的突变具有更高的代际传播的机会。树的分支拓扑决定了突变分配;暴露于紫外线(紫外线)辐射会增加诱变。为了深入了解植物中突变的积累和传播,我们产生了两个高质量的参考基因组和一个独特的数据集,该数据集的60个高覆盖范围 - 整体 - 基因组序列的两种热带树种,番茄科植物(Fabaceae)(fafaceae)(fafaceae)和sextonia rubra(lauraceae)。,我们在D.圭亚那的D. guianensis中发现了15,066个从头突变,在S. rubra中发现了3,208个,令人惊讶的是,几乎全部都以低频发现。我们证明1)低频率突变可以传输到下一代; 2)突变系统发育偏离树的分支拓扑; 3)突变率和突变光谱并不明显受到紫外线暴露差异的影响。总的来说,我们的结果表明,植物生长,衰老,紫外线暴露和突变速率之间的联系比通常想象的要复杂得多。
百日咳的主要病原体百日咳是一种重新出现的病原体,最近中国爆发了疫苗耐药菌株,并出现了大环内酯类耐药菌株,这对该疾病的控制提出了新的担忧。因此需要新的疫苗和潜在的新抗生素。百日咳博德特氏菌培养繁琐,需要几天的生长时间才能在琼脂培养基上计数分离的菌落,这使得大规模筛选新的抗百日咳博德特氏菌化合物或对大量免疫血清进行功能评估变得困难。在此,我们开发了一种可扩展、快速、高通量的基于发光的百日咳博德特氏菌生长抑制测定法 (BGIA),以量化用抗百日咳博德特氏菌化合物处理后存活的细菌。发现发光和菌落形成单位之间存在很强的相关性 (r2 = 0.9345, p < 0.0001),并且 BGIA 表现出高灵敏度和重现性。我们在此证明,BGIA 可用于以易于操作和快速的方式量化百日咳博德特氏菌对抗生素的耐药性、对补体和对人血清的敏感性。我们优化了该检测方法,并测试了不同百日咳博德特氏菌菌株和生长条件对血清和补体敏感性的影响。我们还发现了补体独立的抗体介导的百日咳博德特氏菌生长抑制。因此,BGIA 可有效地用于大规模血清研究,以进一步在功能水平上研究抗百日咳博德特氏菌免疫反应,以及用于筛选百日咳博德特氏菌菌株对抗生素或补体的耐药性,以及用于新型抗百日咳博德特氏菌化合物的高通量筛选。
拜氏梭菌 (Clostridium beijerinckii) 是一种很有前途的丁醇工业生产微生物,但其丁醇产量低且缺乏高效的基因工程工具包。一些负责 Spo0A 磷酸化的组氨酸激酶 (HK) 已被证实是调控溶剂型梭菌 (如丙酮丁醇梭菌) 丁醇生物合成的重要功能组分,但尚未在拜氏梭菌中进行有关 HK 的研究。本研究通过序列比对,筛选出 6 个已注释但尚未鉴定的候选 HK 基因,这些基因与丙酮丁醇梭菌的基因具有部分同源性(不低于 30%)。利用基于 CRISPR-Cas9n 的基因组编辑技术删除这些 HK 基因的编码区。 cbei2073 和 cbei4484 的缺失导致丁醇生物合成发生显著变化,与野生型相比,丁醇产量分别增加了 40.8% 和 17.3% (13.8 g/L 和 11.5 g/L vs. 9.8 g/L)。观察到丁醇生产速率更快,丁醇生产率分别大幅提高了 40.0% 和 20.0%,表明这两个 HK 在调节 C. beijerinckii 细胞代谢中起重要作用。此外,两个 HKs 失活菌株的孢子形成频率分别降低了 96.9% 和 77.4%。与野生型相比,另外四个 HK 缺失突变菌株(包括 cbei2087、cbei2435、cbei4925 和 cbei1553)表现出的表型变化很小。本研究揭示了HKs在拜氏梭菌中孢子形成和溶剂生成中的作用,并提供了一种新的HKs工程化策略来提高代谢物的产量。本研究产生的高丁醇生产菌株在工业生物丁醇生产中具有巨大的潜力。
地点由合同方指定 2.2 合同期限 自合同签订之日起至 2025 年 3 月 31 日 2.3 计划人员数量和细菌检查次数 将使用喜界岛通信站的 4 名工作人员,具体如下。 细菌检测(每月:痢疾、沙门氏菌、O-157) 48次(4人x12个月) 诺如病毒检测(10月至3月每月) 24次(4人x6个月) 2.4 食品样品微生物检测的项目、数量及检测实施日期 对以下五种食品进行四次检测。 检测项目:微生物学检查组(总菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌)1次下一步:按政府指定日期。第二届会议:政府指定的日期为 2024 年 7 月至 9 月之间。第三届会议:政府指定的日期为2024年10月至12月之间。第四次:政府将在2025年1月至3月之间指定日期。 2.5 服务内容 a) 细菌检测原则上每月一次,政府将向受检者采集样本,并
问:脑膜炎球菌危险吗?答:是的。每年,美国有数百人感染脑膜炎球菌病并死于该感染。此外,五分之一的幸存者会遭受永久性终身残疾,如癫痫、肢体缺失、肾病、听力丧失和智力障碍。大多数脑膜炎球菌感染发生在 1 岁以下的婴儿中。 2至10岁儿童中脑膜炎球菌病的发病率较低,但随着青春期的开始,发病率会升高。青少年感染的可能性比婴儿小,但如果感染,则死亡的可能性更大。 脑膜炎球菌尤其危险,因为它会迅速产生大量称为内毒素的有毒物质。内毒素会引起血管损伤,导致低血压和休克。因此,脑膜炎球菌感染血液后很快就会致命。孩子们前一分钟可能还好好的,但4-6小时后却会死去。该疾病进展如此之快,甚至适当的治疗干预都可能会被延迟,或者初步治疗可能无效。脑膜炎球菌病常常引起社区恐慌,因为疫情发生在大学、学校、托儿所、军营和其他人们密切接触的地方。
抽象的果蝇Melanogaster是探索宿主与微生物之间共生关系的宝贵模型。本综述总结了有关果蝇肠道微生物群的维持机制,生理角色和营养不良的最新发现。果蝇的肠道微生物群是通过饮食中的微生物的连续摄入量与其在肠道中的定殖和增殖之间保持的。果蝇的活性氧(ROS)产生和抗菌肽(AMP)的不同途径在识别致病性和共生微生物中起着至关重要的作用。肠道菌群对果蝇的生理功能有重大影响。在幼体阶段已经报道了促进生长的作用,肠道菌群也表现出各种成人果蝇的功能。由衰老或疾病引起的肠道菌群异常导致肠道炎症和肠道屏障功能降低,导致寿命缩短。 此外,已经建议营养不良影响神经退行性疾病模型的病理。 使用果蝇的肠道微生物群研究的未来进步有望阐明宿主微叶相互作用的基本机制。 关键词:肠道菌群;抗微生物肽;活性氧;寿命;本能行为; drosbiosis;果蝇由衰老或疾病引起的肠道菌群异常导致肠道炎症和肠道屏障功能降低,导致寿命缩短。此外,已经建议营养不良影响神经退行性疾病模型的病理。使用果蝇的肠道微生物群研究的未来进步有望阐明宿主微叶相互作用的基本机制。关键词:肠道菌群;抗微生物肽;活性氧;寿命;本能行为; drosbiosis;果蝇
在一项随机、盲法、安慰剂对照研究中,在接种单剂 RECOMBITEK® 口服博德氏菌疫苗或安慰剂 13 个月后,通过雾化方式用两种毒性博德氏菌混合物对狗进行攻击。安慰剂组中约 76% 的幼犬在攻击后出现自发性咳嗽,而疫苗组中 100% 的狗受到保护。RECOMBITEK 口服博德氏菌显著降低了疾病的患病率††,接种疫苗 13 个月后可预防率为 100%。此外,单剂 RECOMBITEK 口服博德氏菌疫苗显著减少了咳嗽天数和咳嗽持续时间,并在攻击后 14 天显著减少鼻腔和气管中博德氏菌的脱落。
摘要:结肠素是一种用于治疗多药耐药的革兰氏阴性菌粒的最后一个抗菌剂。表型结肠蛋白抗性高度与质粒介导的移动结肠蛋白抗性(MCR)基因高度相关。MCR - 耐肠杆菌科在许多国家都被发现,随着抗组织素病原体的出现是全球关注的。这项研究评估了MCR-1,MCR-2,MCR-3,MCR-4和MCR-5基因的分布,并在孟加拉国的腹泻婴儿和儿童分离株中具有表型结肠蛋白耐药性。使用API-20E生化面板和16S rDNA基因测序鉴定细菌。聚合酶链反应检测到分离株中的MCR基因变体。通过琼脂稀释剂和E检验确定其对大肠菌素的敏感性,并通过最小的抑制浓度(MIC)测量来确定。根据琼脂稀释评估(MIC>2μg/ml),分离株超过31.6%(71/225)的分离株显示出结肠蛋白酶的耐药性。总体而言,15.5%的分离株携带MCR基因(7,MCR-1; 17,MCR-2; 13和MCR-3,共发生在两个分离株中)。临床突破MIC值(≥4μg/ml)与91.3%的MCR阳性分离株有关。MCR-斑点病原体包括20个spp。,五个志贺氏菌,五个柠檬酸杆菌属,两个克雷伯氏菌肺炎和三个假单胞菌parafulva。MCR基因似乎与表型结肠蛋白抗性现象显着相关(P = 0.000),其中100%抗菌菌素抗性分离株显示了MDR现象。患者的年龄和性别与检测到的MCR变体没有显着关联。总体而言,邦德什已经出现了与MCR相关的抗colist蛋白抗性细菌,该细菌需要进一步的研究来确定其传播并促进活动以降低耐药性。
细菌间竞争会塑造宿主中发现的微生物群落,但是这场比赛与宿主防御之间的相互作用尚不清楚。在这里,我们使用斑马鱼后脑心室(HBV)作为体内平台,以研究具有不同形式的细菌间竞争形式的定义细菌群落的宿主反应。我们发现,来自Vibrio Cholerae和Acinetobacter baylyi的VI型分泌系统(T6SS)的抗菌活性都可以诱发宿主炎症,并使宿主敏感到独立于任何个体效应子的感染。化学抑制炎症可以解决宿主存活中T6SS依赖性差异,但是两种细菌物种之间发生这种情况的机制有所不同。相比之下,尽管志贺氏菌sonnei菌株是一种更有效的细菌杀手,但引起了大结菌素介导的拮抗作用,导致宿主的反应可忽略不计,导致对A的影响没有影响。baylyi或v。霍乱毒力。总的来说,这些结果提供了有关体内不同模式的不同模式如何以不同的方式影响宿主的方式。