我们的研究检查了 CRISPR/Cas9 方法对参与生长素生物合成途径的色氨酸氨基转移酶 BnaTAA1 基因的突变效率。我们制作了九种 CRISPR/Cas9 构建体,这些构建体具有不同的启动子,可驱动金黄色葡萄球菌 Cas9 (SaCas9) 或植物密码子优化的化脓性链球菌 Cas9 (pcoCas9) 的表达。我们开发了一种快速有效的系统,用于评估每个构建体使用油菜毛状根引起的突变种类和频率。我们发现 pcoCas9 在突变目标位点方面比 SaCas9 更有效,并且 NLS 信号的存在使诱变机会增加了 25%。在再生系中进一步研究了突变,并确定了转基因植物中 BnaTAA1 基因的表达和基因修饰的遗传性。毛状根转化与 CRISPR/Cas9 介导的基因编辑相结合,为研究重要油料作物 B. napus 中的靶基因功能提供了一种快速而直接的系统。
作为最先进的电光设施,MSSS 将研究和开发与运营任务相结合;这是世界上独一无二的设施。该设施位于海拔 10,000 英尺处,毛伊岛气候稳定,表面散射光极少,一年中大多数日子都能提供极佳的观测条件。MSSS 使用其可见光和红外传感器、自适应光学系统和望远镜收集近地和深空物体的成像和特征数据。AFRL 科学家和工程师分析这些数据并传播成像和特征产品以支持 SDA 当前的需求。
。CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可证下可用未经同行评审认证)是作者/资助者,他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是
蓍草花 利兹·富特 罗里·弗兰普顿 亚历克斯·弗朗科 雅各布·弗里曼 克里斯汀·弗里曼 格蕾丝·冯 斯图尔特·芬克-德埃格努夫 拉娜·甘斯克-塞里佐 梅赛德斯·加西亚·法尔·加西亚·罗伯斯 夏琳·格里芬 布雷特·戈巴尔 约翰·戈尔曼 玛丽·格鲁德 内特拉·哈尔佩林 汉斯·哈德 鲁比·黑斯廷斯 斯基皮·豪 阿黛尔·海伍德 哈利·赫克特 尤里·赫茨菲尔德 艾米·霍奇斯 迈克尔·豪登 帕特·霍斯金 查尔斯·亨特 马克·海德 布洛克·约翰逊 维多利亚·约翰逊 凯文·琼斯 阿什利·荣格 丹尼尔·卡纳赫勒 帕梅拉·坎塔罗娃 金凯奥·卡帕胡莱华 凯奥莫库·卡普·基奥内 威廉·基利 比利·金 谢丽尔·金 莫里·金 罗宾·诺克斯 保罗·科勒 埃伦·克拉夫索 玛吉·克兰普 弗农·库拉尼考 丹尼斯·莱蒂宁
摘要。imd是为了在天气和气候事项上充当该国的节点机构。本文大致涵盖了气候服务的旅程,成为一个单独的分支机构,并直接与部门应用程序联系在一起,而不是详尽的文档。从概念上讲,天气和气候在前者中有所不同,而后者则是一定时间的统计描述。两者都指的是地球物理现象,这些现象影响了个人和集体社会的生活。气候经历一直以来一直在影响人类活动的记忆中生活,但是在现代,物理观察已被系统地和广泛地受到数学和统计处理的记录。这允许以客观的方式进行社会应用。是气候对农业,水资源,健康,能源生产和对气候危害的安全的影响。气候服务与不同时期内气候变异性有关,包括因人为影响而导致的变化。这使气候知识的应用非常重要。此处还指示了这些服务需要功能的框架。
我们在分析中使用的主要资源是由国家可再生能源实验室(NREL)编写的2023年可再生能源属性数据库(REMPD)和2022年对先进的水冷却反应堆设计的资本成本评估,并考虑了MIT核工程研究者W. Robb Stewart and Korforb stewart and Korefors word s s s shirvan的不确定性和风险报告。1,2在最能代表当前的技术状态时,我们使用其他公开文献和行业报告进一步更新并补充了这些数据。对于核能技术,我们的分析考虑了Westinghouse AP-1000反应堆,FRAMATOME进化功率反应器(EPR)和一般的Electric-Hitachi BWRX-300,这是目前正在开发的较小的300 MWE设计。3非轻水晚期核反应堆设计的材料使用估计值不足以在本报告中对我们进行严格研究。
自1996年至今他曾在众多上市及私人机构担任并担任重要职务。仅举几个例子,他曾担任欧洲投资银行 (EIB) 审计委员会主席、Banca SanPaoloImi 审计委员会主席、Sviluppo Italia 审计委员会主席、意法半导体审计委员会主席。他目前担任意大利华特迪士尼公司、Esprinet、Gruppo Klepierre 和 Kiko Cosmetics 的审计委员会主席等职务。作为董事会主席或成员,其担任的重要职务包括 Illycaffè、Gabetti Property Solutions、Seat Pagine Gialle、Banca Akros、Podravska Banka、Sorin、Citylife、Marsh、Dun & Bradstreet、Valentino Fashion Group。作为服务机构的公民,他曾担任米兰 ATM(市政运输公司)副总裁等职务; TPM(蒙泽西公共交通公司)总裁、AEM(米兰能源公司)顾问,负责私有化/IPO 后续工作。公共选举职位
图 S1. Kcnq4 W276S/+ 小鼠的静纤毛形态和野生型小鼠耳蜗中的 Kcnq4 表达。图 S2. 靶向 Kcnq4 突变等位基因的候选 sgRNA。图 S3. 优化 sgRNA 以进行体内基因编辑。图 S4. SpCas9 和 sgRNA 的双分裂 AAV 系统。图 S5. 优化体内基因编辑的递送途径。图 S6. SpCas9 在耳蜗毛细胞中的转染。图 S7. 将 AAV 和 RNP 注射到中耳阶的安全性。图 S8. 通过 AAV 注射进行体内基因编辑后 Kcnq4 W276S/+ 中的听觉脑干反应 (ABR) 的特征。图 S9. 通过基因编辑在 Kcnq4 W276S/+ 小鼠中实现 sgRNA 依赖性听力恢复。图 S10。 Kcnq4 W276S/+ 体内基因编辑的长期影响。图 S11。核糖核苷酸复合物 (RNP) 载体的优化和体内表型拯救。图 S12。体内基因编辑对 Kcnq4 W276S/+ 小鼠毛细胞和神经丝的影响。图 S13。体内基因编辑对 Kcnq4 W276S/+ 小鼠神经元存活和毛细胞形态的影响。注 S1。双 AAV 质粒系统的编码序列。电影 S1 的标题。使用铊敏感染料 (FluxOR- Tl +) 在野生型耳蜗的尖转 (6 kHz) 中对外毛细胞进行离体成像。